研究与神经退行性疾病相关的蛋白质

Thermo Fisher Scientific 为神经生物学和神经科学研究提供了多种灵敏准确的免疫检测方法。这些检测包括 ELISA 试剂盒和多重免疫检测(用于 Luminex 技术平台),可以定量脑脊液 (CSF)、血浆和血清中的生物标志物,用于神经炎症、神经退行性疾病、创伤性脑损伤以及中枢神经系统 (CNS) 的各种病症和疾病。

神经生物学概述

蛋白质生物标志物的定量对神经生物学和神经科学研究至关重要。基于抗体的技术,如酶联免疫吸附检测 (ELISA) 和多重免疫检测,为实现灵敏的定量提供了强大的工具。这些蛋白质包括神经退行性疾病生物标志物、创伤性脑损伤生物标志物,包括由于星形胶质细胞、轴突和神经元细胞体损伤而释放的生物标志物、在神经元发育中起关键作用的神经营养因子 (NTF)、其可塑性、保护、修复以及参与中枢神经系统 (CNS) 组织稳态和神经炎症的关键细胞因子和趋化因子。

中枢神经系统 (CNS) 的多种病症或疾病,包括脑外伤、中风、多发性硬化、帕金森氏病或阿尔茨海默氏病,可引发神经炎症和血脑屏障 (BBB) 的功能障碍。与衰老、表观遗传、环境和其他风险因素协同作用会强烈影响这些疾病的发作和进展。例如,外伤性脑损伤已被确定为生命后期发生神经退行性疾病和痴呆症的一个风险因素。为了对 CNS 稳态失调作出应答,胶质细胞在早期快速激活形成急性炎症应答。这将导致受损区域的修复,但如果风险没有被清除并持续存在,反应的激活会被放大,变成慢性,并可能导致组织退化,甚至血脑屏障 (BBB) 完整性的急剧丧失。

用于神经退行性疾病的主要靶标:

  • 淀粉样 β 蛋白(Aβ,β 淀粉样蛋白,或 Abeta),作为在阿尔茨海默病患者大脑中发现的淀粉样斑块的主要成分,与阿尔茨海默病密切相关。
  • Tau 是一种稳定微管的蛋白质,当其功能不正常时,会导致神经系统病症和痴呆。
  • Alpha 突触核蛋白 (α-synuclein),被认为在维持突触前终末突触小泡的供应中起重要作用,也可能有助于调节多巴胺的释放。

用于创伤性脑损伤的主要靶标:

  • 胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) 是一种在星形胶质细胞骨架中发现的单体中间丝 (IF) 蛋白。这种蛋白质在中枢神经系统之外是找不到的,只有在细胞死亡或损伤后才释放出来,这时它可以在血液中检测到。
  • S100B 是一种钙传感器蛋白,在星形胶质细胞中高度表达,但也存在于神经系统的其他细胞中,包括少突胶质细胞、Schwann细胞和室管膜细胞。在生物体液中,S100B 水平升高已被证明是急性脑损伤的生物标志物。
  • 神经丝 - 重 (NF-H) 轻 (NF-L) 是神经元的神经丝支架蛋白的亚基。神经元损伤可导致神经丝释放到间质液中,随后释放到脑脊液和血液中。
  • 泛素 C 端水解酶 (UCH-L1)  是一种脑特异性去泛素酶。UCH-L1 的脑脊液和血液浓度升高与创伤性脑损伤有关。

用于神经炎症的主要靶标:

  • 脑源性神经营养因子 (BDNF)  是一种诱导神经元维持、存活、可塑性和神经递质调节的神经营养因子,神经退行性疾病通常显示血液和大脑中的 BDNF 浓度降低。
  • 神经生长因子 (NGF)  是一种诱导神经元存活、发育和功能的神经营养因子,已被证明对免疫反应有直接和间接的影响。
  • 促炎细胞因子 ,包括肿瘤坏死因子 (TNF)-α、白细胞介素 (IL)-1、IL-6、IL-8。

 

图 1.CNS 的主要神经元和非神经元细胞类型以及神经炎症、脑损伤和神经退行性病变的候选生物标志物。本图描述了神经炎症、创伤性脑损伤和神经退行性疾病的生物标志物的可能来源。缩略词:GFAP(胶质纤维酸性蛋白);S100B (S100 钙结合蛋白 B);NCAM-1(神经细胞粘附分子-1);NF-H(神经丝重多肽);UCHL1(泛素羧基末端水解酶同工酶 L1);TREM-2(髓样细胞表达的触发受体 2);CHI3L1/YKL-40(几丁质酶-3 样蛋白 1/前三个 N 端氨基酸、酪氨酸(Y)、赖氨酸(K)和亮氨酸(L)表观分子量为 40 的蛋白);sRAGE(晚期糖基化终产物可溶性受体);NGF-beta(神经生长因子 β);BDNF(脑源性神经营养因子);GDNF(胶质细胞源性神经营养因子);CTNF(睫状神经营养因子);BACE1(β-分泌酶 1);KLK6(激肽释放酶相关肽酶 6);TDP-43 (TAR DNA 结合蛋白-43)。

神经生物学 ELISA 试剂盒

ELISA 能够对各种生物来源的蛋白质进行特异性定量检测,包括各种物种的血清、血浆和脑脊液 (CSF)。我们提供 ELISA 试剂盒用于研究与神经退行性疾病相关的关键蛋白,如 Aβ40/Aβ42、磷酸化 Tau 和 α-突触核蛋白。

适用于常用靶标的 Invitrogen ELISA 试剂盒,例如 BDNF , GDNF ,淀粉样蛋白 β 等,见 表 1。  

人 Tau (总) 的标准曲线以及天然和重组人 tau (总) 人 ELISA KI 之间的 ELISA 平行性  ,如图 2 所示。

查看所有神经生物学 ELISA 试剂盒

了解更多有关 ELISA 试剂盒和组分的信息

常见神经生物学蛋白质靶标和 ELISA 性能数据

表 1.查看所有 ELISA 试剂盒,了解以下常用靶标:

Human Tau (总) ELISA 的性能数据

图 2.Human Tau (总) ELISA的性能数据。使用 0 – 2 , 000 pg/mL 和 Tau (总) 人类 ELISA 试剂盒进行 ELISA 工作。左图:典型 7 点标准曲线。动态范围为 31–2000 pg/mL,分析灵敏度为 12pg/mL。右侧panel:套件中提供的重组人(Hu)tau蛋白质标准与自然人tau进行比较,并在标准稀释缓冲液中进行连续稀释对照标准曲线绘制每个稀释物的光密度。天然蛋白和重组蛋白的平行性表明,标准品准确反映了样品中天然 Hu tau 的含量。

神经生物学 ProQuantum 高灵敏度免疫检测

用于神经生物学和神经科学研究的 ProQuantum 免疫检测试剂盒旨在提供小样本量的蛋白质定量测量。该检测利用基于邻近扩增技术,将高亲和力抗体-抗原结合的分析物特异性与实时 PCR 的信号检测和扩增能力相结合,实现了简单而强大的下一代蛋白质定量平台。用户友好、无需清洗的工作流程与直观的分析软件相结合,使样品到结果过程只需两小时。我们将持续推出针对新靶标的检测,尽请关注。

适用于 EGF , IL-8 , VEGF 等常用靶标的 Invitrogen ELISA 试剂盒见 表 2。使用 人 Tau 总 ProQuantum 免疫检测试剂盒的 Tau 标准曲线如图 3 所示。

查找神经生物学相关的 ProQuantum 检测

进一步了解 ProQuantum 免疫检测试剂盒的工作原理

Read BioProbes Journal article: Introducing ProQuantum High-Sensitivity Immunoassays—The new generation of target-specific protein quantitation

常见毒理学研究蛋白靶标和 ProQuantum 检测试剂盒性能数据

表2.毒理学相关 ProQuantum 免疫检测试剂盒。查看用于检测以下常见靶标的赛默飞 ELISA 试剂盒:

人 IL-6 的代表性标准曲线

图3.人 IL-6 的代表性标准曲线。ProQuantum Human Tau 总蛋白免疫检测试剂盒的标准曲线显示 Tau 蛋白的动态范围很大 (3.2–500,000 pg/mL)。

神经生物学 ProcartaPlex 多重免疫检测

Invitrogen ProcartaPlex 多重免疫检测面板是一款强大的生物标志物检测工具,有助于区分疾病状态和非疾病状态,甚至区分不同的神经退行性疾病。这些基于 Luminex xMAP(液态芯片)的检测能够随着时间的推移同时测量和跟踪多种因素/生物标志物,并为更深入和更彻底地了解神经炎症和神经退行性疾病的进展开辟了道路。使用 ProcartaPlex Human Neuroscience Panel 18plex (图 4) 对人成人和儿科患者的脑脊液样本中的各种生物标志物水平进行了测试。

请选择我们下面介绍的预混Panel中的一个,或使用下面的 Panel Configurator选择工具按键自定义您的特定Panel。

ProcartaPlex Panel 选择工具

进一步了解 ProcartaPlex 多重免疫检测 Panel

预混的神经生物学 - 多重免疫检测Panels和性能数据

图4.使用 ProcartaPlex 预混Panel定量脑脊液和血浆中的生物标志物。我们使用 ProcartaPlex Human Neuroscience Panel 18plex 测试了 10 名未分组成人和 10 名儿科患者的脑脊液样本 18 种生物标志物水平。显示所有靶标的未分组人类样本的结果。[数据由华盛顿大学人类免疫学和免疫疗法项目 Bursky 中心(CHiiPs)免疫监测实验室提供]

表3.用于神经生物学的预混 ProcartaPlex 多重免疫检测Panels。

神经科学预混多重Panel
产品名称规格货号

ProcartaPlex 人类神经科学检测组合, 18plex

靶标列表 [微球编码]:
Amyloid beta 1-42 [42], BDNF [57], YKL-40 (CHI3L1) [34], CNTF [36], FGF-21 [76], GDNF [44], GFAP [22], Kallikrein-6 (KLK6) [14], MIF [67], NCAM-1 [48], Neurogranin (NRGN) [75], NF-H [33], NGF beta [55], S100B [18], Tau (total) [46], Tau (pT181) [61], TDP-43 [74], UCHL1 [19]

96 次EPX180-15837-901
神经退行性疾病预混多重Panels

ProcartaPlex 人神经退行性病变 Panel 1 , 9plex

靶标列表 [微球编码]:
Amyloid beta 1-40 [30], Amyloid beta 1-42 [42], FGF-21 [76], Kallikrein-6 (KLK-6) [14], NCAM-1 [48], Neurogranin (NRGN) [75], Tau (total) [46], Tau (pT181) [61], TDP-43 [74]

96 次EPX090-15836-901

ProcartaPlex 人神经退行性病变 Panel 2 , 4plex

靶标列表 [微球编码]:
Apolipoprotein E4 [65], Clusterin (Apo J) [72], Complement Factor H [38], Fetuin-A [62]

96 次EPX040-15832-901
神经炎症预混多重Panel

ProcartaPlex 人神经炎症检测组合, 6plex 

靶标列表 [微球编码]:
BLC (CXCL13) [15], IL-34 [52], MIF [67], RAGE [47], TREM-2 [13], YKL-40 (CHI3L1) [34]

96 次EPX060-15833-901
神经营养因子预混多重Panel

ProcartaPlex 人神经营养因子检测组合, 4plex 

靶标列表 [微珠编号]:
B7-H6 [42], CD276 (B7-H3) [72], CD47 (IAP) [74], CD48 (BLAST-1) [19], CD134 (OX40) [55], ICOS Ligand (B7-H2) [34], TIMD-4 [39], S100A8/A9 [76], VISTA (B7-H5) [64]

96 次EPX040-15828-901

多重基因表达和蛋白质检测 - 神经生物学研究

QuantiGene RNA 基因表达分析为多重基因表达定量提供了快速、高通量的解决方案,可同时测量 96 孔板或 384 孔板的单个孔中多达 80 个目的基因。QuantiGene Plex 分析基于杂交,并结合了分支 DNA (bDNA) 技术,该技术使用信号扩增而不是靶标扩增来直接测量 RNA 转录物。该检测在 Luminex 平台上运行,工作流程简单,不需要 RNA 纯化。有了这些功能,用户就可以使用相同的样本,将用于基因表达谱分析的 QuantiGene 工作流程与用于蛋白质定量的 ProcartaPlex 工作流程合并(图 5)。

由于其高通量和定制的特性,以及其测量任何具有相关 RNA 序列靶标的灵活性,QuantiGene 已被用于研究神经生物学许多不同领域的基因表达。Alterman 等人用 QuantiGene Plex 建立了一种高通量检测,利用寡核苷酸疗法对体外初级皮层神经元进行 mRNA沉默 (1)。此外,该小组还发表了一个二价 siRNA 化学支架,以有效和持续地调节整个中枢神经系统的基因表达 (2)。此外,QuantiGene Plex 被用来评估药物 omaveloxolone 在猴子体内的药代动力学、药效学和组织分布,以将这些发现与弗里德希共济失调患者的初步结果进行比较 (3)。贝茨的研究小组使用 QuantiGene Plex 分析 (4) 研究了来自 zQ175亨廷顿氏病小鼠模型的大脑区域中 Htt 转录物的广泛表达分析,并且随后能够显示热休克反应在亨廷顿氏病小鼠模型中受损,并且如 QuantiGene Plex 的测量,不是由 HSF1 减少引起的 (5)。多重基因表达分析是测量胶质母细胞瘤样本中 92 个与血管生成和血管形成相关基因的肿瘤基因表达谱的关键,以评估胶质母细胞瘤的血管形成及其对患者恢复结果的影响 (6)。

进一步了解用于基因表达谱分析的 QuantiGene RNA 检测

图 5.QuantiGene 基因表达和 ProcartaPlex 蛋白质定量检测的组合工作流程。

神经生物学概述

蛋白质生物标志物的定量对神经生物学和神经科学研究至关重要。基于抗体的技术,如酶联免疫吸附检测 (ELISA) 和多重免疫检测,为实现灵敏的定量提供了强大的工具。这些蛋白质包括神经退行性疾病生物标志物、创伤性脑损伤生物标志物,包括由于星形胶质细胞、轴突和神经元细胞体损伤而释放的生物标志物、在神经元发育中起关键作用的神经营养因子 (NTF)、其可塑性、保护、修复以及参与中枢神经系统 (CNS) 组织稳态和神经炎症的关键细胞因子和趋化因子。

中枢神经系统 (CNS) 的多种病症或疾病,包括脑外伤、中风、多发性硬化、帕金森氏病或阿尔茨海默氏病,可引发神经炎症和血脑屏障 (BBB) 的功能障碍。与衰老、表观遗传、环境和其他风险因素协同作用会强烈影响这些疾病的发作和进展。例如,外伤性脑损伤已被确定为生命后期发生神经退行性疾病和痴呆症的一个风险因素。为了对 CNS 稳态失调作出应答,胶质细胞在早期快速激活形成急性炎症应答。这将导致受损区域的修复,但如果风险没有被清除并持续存在,反应的激活会被放大,变成慢性,并可能导致组织退化,甚至血脑屏障 (BBB) 完整性的急剧丧失。

用于神经退行性疾病的主要靶标:

  • 淀粉样 β 蛋白(Aβ,β 淀粉样蛋白,或 Abeta),作为在阿尔茨海默病患者大脑中发现的淀粉样斑块的主要成分,与阿尔茨海默病密切相关。
  • Tau 是一种稳定微管的蛋白质,当其功能不正常时,会导致神经系统病症和痴呆。
  • Alpha 突触核蛋白 (α-synuclein),被认为在维持突触前终末突触小泡的供应中起重要作用,也可能有助于调节多巴胺的释放。

用于创伤性脑损伤的主要靶标:

  • 胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) 是一种在星形胶质细胞骨架中发现的单体中间丝 (IF) 蛋白。这种蛋白质在中枢神经系统之外是找不到的,只有在细胞死亡或损伤后才释放出来,这时它可以在血液中检测到。
  • S100B 是一种钙传感器蛋白,在星形胶质细胞中高度表达,但也存在于神经系统的其他细胞中,包括少突胶质细胞、Schwann细胞和室管膜细胞。在生物体液中,S100B 水平升高已被证明是急性脑损伤的生物标志物。
  • 神经丝 - 重 (NF-H) 轻 (NF-L) 是神经元的神经丝支架蛋白的亚基。神经元损伤可导致神经丝释放到间质液中,随后释放到脑脊液和血液中。
  • 泛素 C 端水解酶 (UCH-L1)  是一种脑特异性去泛素酶。UCH-L1 的脑脊液和血液浓度升高与创伤性脑损伤有关。

用于神经炎症的主要靶标:

  • 脑源性神经营养因子 (BDNF)  是一种诱导神经元维持、存活、可塑性和神经递质调节的神经营养因子,神经退行性疾病通常显示血液和大脑中的 BDNF 浓度降低。
  • 神经生长因子 (NGF)  是一种诱导神经元存活、发育和功能的神经营养因子,已被证明对免疫反应有直接和间接的影响。
  • 促炎细胞因子 ,包括肿瘤坏死因子 (TNF)-α、白细胞介素 (IL)-1、IL-6、IL-8。

 

图 1.CNS 的主要神经元和非神经元细胞类型以及神经炎症、脑损伤和神经退行性病变的候选生物标志物。本图描述了神经炎症、创伤性脑损伤和神经退行性疾病的生物标志物的可能来源。缩略词:GFAP(胶质纤维酸性蛋白);S100B (S100 钙结合蛋白 B);NCAM-1(神经细胞粘附分子-1);NF-H(神经丝重多肽);UCHL1(泛素羧基末端水解酶同工酶 L1);TREM-2(髓样细胞表达的触发受体 2);CHI3L1/YKL-40(几丁质酶-3 样蛋白 1/前三个 N 端氨基酸、酪氨酸(Y)、赖氨酸(K)和亮氨酸(L)表观分子量为 40 的蛋白);sRAGE(晚期糖基化终产物可溶性受体);NGF-beta(神经生长因子 β);BDNF(脑源性神经营养因子);GDNF(胶质细胞源性神经营养因子);CTNF(睫状神经营养因子);BACE1(β-分泌酶 1);KLK6(激肽释放酶相关肽酶 6);TDP-43 (TAR DNA 结合蛋白-43)。

神经生物学 ELISA 试剂盒

ELISA 能够对各种生物来源的蛋白质进行特异性定量检测,包括各种物种的血清、血浆和脑脊液 (CSF)。我们提供 ELISA 试剂盒用于研究与神经退行性疾病相关的关键蛋白,如 Aβ40/Aβ42、磷酸化 Tau 和 α-突触核蛋白。

适用于常用靶标的 Invitrogen ELISA 试剂盒,例如 BDNF , GDNF ,淀粉样蛋白 β 等,见 表 1。  

人 Tau (总) 的标准曲线以及天然和重组人 tau (总) 人 ELISA KI 之间的 ELISA 平行性  ,如图 2 所示。

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常见神经生物学蛋白质靶标和 ELISA 性能数据

表 1.查看所有 ELISA 试剂盒,了解以下常用靶标:

Human Tau (总) ELISA 的性能数据

图 2.Human Tau (总) ELISA的性能数据。使用 0 – 2 , 000 pg/mL 和 Tau (总) 人类 ELISA 试剂盒进行 ELISA 工作。左图:典型 7 点标准曲线。动态范围为 31–2000 pg/mL,分析灵敏度为 12pg/mL。右侧panel:套件中提供的重组人(Hu)tau蛋白质标准与自然人tau进行比较,并在标准稀释缓冲液中进行连续稀释对照标准曲线绘制每个稀释物的光密度。天然蛋白和重组蛋白的平行性表明,标准品准确反映了样品中天然 Hu tau 的含量。

神经生物学 ProQuantum 高灵敏度免疫检测

用于神经生物学和神经科学研究的 ProQuantum 免疫检测试剂盒旨在提供小样本量的蛋白质定量测量。该检测利用基于邻近扩增技术,将高亲和力抗体-抗原结合的分析物特异性与实时 PCR 的信号检测和扩增能力相结合,实现了简单而强大的下一代蛋白质定量平台。用户友好、无需清洗的工作流程与直观的分析软件相结合,使样品到结果过程只需两小时。我们将持续推出针对新靶标的检测,尽请关注。

适用于 EGF , IL-8 , VEGF 等常用靶标的 Invitrogen ELISA 试剂盒见 表 2。使用 人 Tau 总 ProQuantum 免疫检测试剂盒的 Tau 标准曲线如图 3 所示。

查找神经生物学相关的 ProQuantum 检测

进一步了解 ProQuantum 免疫检测试剂盒的工作原理

Read BioProbes Journal article: Introducing ProQuantum High-Sensitivity Immunoassays—The new generation of target-specific protein quantitation

常见毒理学研究蛋白靶标和 ProQuantum 检测试剂盒性能数据

表2.毒理学相关 ProQuantum 免疫检测试剂盒。查看用于检测以下常见靶标的赛默飞 ELISA 试剂盒:

人 IL-6 的代表性标准曲线

图3.人 IL-6 的代表性标准曲线。ProQuantum Human Tau 总蛋白免疫检测试剂盒的标准曲线显示 Tau 蛋白的动态范围很大 (3.2–500,000 pg/mL)。

神经生物学 ProcartaPlex 多重免疫检测

Invitrogen ProcartaPlex 多重免疫检测面板是一款强大的生物标志物检测工具,有助于区分疾病状态和非疾病状态,甚至区分不同的神经退行性疾病。这些基于 Luminex xMAP(液态芯片)的检测能够随着时间的推移同时测量和跟踪多种因素/生物标志物,并为更深入和更彻底地了解神经炎症和神经退行性疾病的进展开辟了道路。使用 ProcartaPlex Human Neuroscience Panel 18plex (图 4) 对人成人和儿科患者的脑脊液样本中的各种生物标志物水平进行了测试。

请选择我们下面介绍的预混Panel中的一个,或使用下面的 Panel Configurator选择工具按键自定义您的特定Panel。

ProcartaPlex Panel 选择工具

进一步了解 ProcartaPlex 多重免疫检测 Panel

预混的神经生物学 - 多重免疫检测Panels和性能数据

图4.使用 ProcartaPlex 预混Panel定量脑脊液和血浆中的生物标志物。我们使用 ProcartaPlex Human Neuroscience Panel 18plex 测试了 10 名未分组成人和 10 名儿科患者的脑脊液样本 18 种生物标志物水平。显示所有靶标的未分组人类样本的结果。[数据由华盛顿大学人类免疫学和免疫疗法项目 Bursky 中心(CHiiPs)免疫监测实验室提供]

表3.用于神经生物学的预混 ProcartaPlex 多重免疫检测Panels。

神经科学预混多重Panel
产品名称规格货号

ProcartaPlex 人类神经科学检测组合, 18plex

靶标列表 [微球编码]:
Amyloid beta 1-42 [42], BDNF [57], YKL-40 (CHI3L1) [34], CNTF [36], FGF-21 [76], GDNF [44], GFAP [22], Kallikrein-6 (KLK6) [14], MIF [67], NCAM-1 [48], Neurogranin (NRGN) [75], NF-H [33], NGF beta [55], S100B [18], Tau (total) [46], Tau (pT181) [61], TDP-43 [74], UCHL1 [19]

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神经退行性疾病预混多重Panels

ProcartaPlex 人神经退行性病变 Panel 1 , 9plex

靶标列表 [微球编码]:
Amyloid beta 1-40 [30], Amyloid beta 1-42 [42], FGF-21 [76], Kallikrein-6 (KLK-6) [14], NCAM-1 [48], Neurogranin (NRGN) [75], Tau (total) [46], Tau (pT181) [61], TDP-43 [74]

96 次EPX090-15836-901

ProcartaPlex 人神经退行性病变 Panel 2 , 4plex

靶标列表 [微球编码]:
Apolipoprotein E4 [65], Clusterin (Apo J) [72], Complement Factor H [38], Fetuin-A [62]

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神经炎症预混多重Panel

ProcartaPlex 人神经炎症检测组合, 6plex 

靶标列表 [微球编码]:
BLC (CXCL13) [15], IL-34 [52], MIF [67], RAGE [47], TREM-2 [13], YKL-40 (CHI3L1) [34]

96 次EPX060-15833-901
神经营养因子预混多重Panel

ProcartaPlex 人神经营养因子检测组合, 4plex 

靶标列表 [微珠编号]:
B7-H6 [42], CD276 (B7-H3) [72], CD47 (IAP) [74], CD48 (BLAST-1) [19], CD134 (OX40) [55], ICOS Ligand (B7-H2) [34], TIMD-4 [39], S100A8/A9 [76], VISTA (B7-H5) [64]

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多重基因表达和蛋白质检测 - 神经生物学研究

QuantiGene RNA 基因表达分析为多重基因表达定量提供了快速、高通量的解决方案,可同时测量 96 孔板或 384 孔板的单个孔中多达 80 个目的基因。QuantiGene Plex 分析基于杂交,并结合了分支 DNA (bDNA) 技术,该技术使用信号扩增而不是靶标扩增来直接测量 RNA 转录物。该检测在 Luminex 平台上运行,工作流程简单,不需要 RNA 纯化。有了这些功能,用户就可以使用相同的样本,将用于基因表达谱分析的 QuantiGene 工作流程与用于蛋白质定量的 ProcartaPlex 工作流程合并(图 5)。

由于其高通量和定制的特性,以及其测量任何具有相关 RNA 序列靶标的灵活性,QuantiGene 已被用于研究神经生物学许多不同领域的基因表达。Alterman 等人用 QuantiGene Plex 建立了一种高通量检测,利用寡核苷酸疗法对体外初级皮层神经元进行 mRNA沉默 (1)。此外,该小组还发表了一个二价 siRNA 化学支架,以有效和持续地调节整个中枢神经系统的基因表达 (2)。此外,QuantiGene Plex 被用来评估药物 omaveloxolone 在猴子体内的药代动力学、药效学和组织分布,以将这些发现与弗里德希共济失调患者的初步结果进行比较 (3)。贝茨的研究小组使用 QuantiGene Plex 分析 (4) 研究了来自 zQ175亨廷顿氏病小鼠模型的大脑区域中 Htt 转录物的广泛表达分析,并且随后能够显示热休克反应在亨廷顿氏病小鼠模型中受损,并且如 QuantiGene Plex 的测量,不是由 HSF1 减少引起的 (5)。多重基因表达分析是测量胶质母细胞瘤样本中 92 个与血管生成和血管形成相关基因的肿瘤基因表达谱的关键,以评估胶质母细胞瘤的血管形成及其对患者恢复结果的影响 (6)。

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图 5.QuantiGene 基因表达和 ProcartaPlex 蛋白质定量检测的组合工作流程。

用于神经生物学免疫检测的附加资源

免疫测定仪器

参考文献

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