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Thermo Scientific™ SYBR™ Green qPCR Master Mixは、リアルタイムPCRによるDNA(cDNA およびgDNA)ターゲットの、SYBR™ Greenベースの定量的増幅用に設計された、すぐに使用できる2Xマスターミックスです。
幅広い機器に対応:スタンダードモードでもFast モードでも使用可能で、さまざまなリアルタイムPCR装置に対応可能です。
包括的なワークフローに適応:さまざまな逆転写酵素(RT)に適応し、Tm値の適用範囲が広い(55~65 ℃)ため、プライマー設計が簡単です。
広いダイナミックレンジ:低濃度サンプルでも高濃度サンプルでも正確な検出が可能です。
SYBR Green qPCR Master Mix は低レベルの検出を可能にし、非特異的な初期ポリメラーゼ活性の軽減のために、抗体によるホットスタート機能を備えています。他の主要なマスターミックスとのパフォーマンスの比較については、図1 をご参照ください。
図1. ターゲット特異性 Universal human reference(UHR)cDNA、 PRTN3(プロテイナーゼ 3)、FN1(フィブロネクチン 1 )をターゲットとするプライマーを用いてリアルタイムPCR を行った。SYBR Green qPCR Master Mix の使用により、特異的増幅を示す単一の融解曲線が得られた。一方、他社のマスターミックスを使用した場合には、融解曲線の複数のピークで表される非特異的増幅が観察された。
SYBR Green qPCR Master Mix は、cDNA に対して最大6-log のダイナミックレンジを示し(図2)、他社のマスターミックスと比較して、さまざまなターゲットの検出において同等以上のダイナミックレンジを示しました。
図2. リニアなダイナミックレンジ 384 ウェルブロックのリアルタイムPCR 装置を用いて、10 µL 反応でマスターミックスメーカーのプロトコールに従って 4 回ランを実施した。増幅曲線は、FN1(フィブロネクチン 1 )をターゲットとし、UHR cDNA の 6-log 希釈系列を鋳型にして得た。SYBR Green qPCR Master Mix により、広いダイナミックレンジで正確な結果が得られた。PCR 効率=100.9%, R2=0.998。
Applied Biosystems™ PowerTrack™ SYBR™ Green Master Mix
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