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성능, 속도, 실험 간소화, 유연성을 제공하기 위해 설계 및 엔지니어링된 electroporation 장비로 귀중한 연구 시간을 단축하고 Sample을 보존하십시오. Invitrogen Neon NxT Electroporation System의 독점적인 피펫 팁 기술, 간소화된 워크플로우, 유연성을 결합하면 Sample 손실률과 오염 위험을 줄이고 단계를 절약하며 실험을 제어하며 수행할 수 있습니다.
Neon NxT Electroporation System은 면역 세포, 일차 세포, 줄기 세포와 같이 트랜스펙션을 수행하기 어려운 세포에서 최대 90%의 transfection 및 유전자 편집 효율을 제공하는 electroporation 기기입니다. 효율성과 생존율에 대해 즉시 사용 가능한 최적화된 조건에서 150개 이상의 세포주를 테스트했습니다.
여러 세포주에서 최적화된 electroporation 프로토콜을 확인하기 위해 Transfection 프로토콜 및 인용 데이터베이스를 검색합니다.
그림 1. Neon NxT Electroporation System으로 Transfection 효율 달성. 10μL 또는 100μL 의 electroporation 반응에서 GFP 플라스미드 DNA 또는 GFP mRNA을 사용하여 세포를 transfection 했습니다. Transfection 효율은 GFP 양성 세포(n=3)의 비율로 보고됩니다. 참고: Naive T세포는 100μL의 반응에서만 electroporation 되었습니다.
그림 2. Neon NxT 시스템에서 electroporation 후의 세포 생존율. 세포는 10μL 또는 100μL의 electroporation 반응에서 GFP 플라스미드 DNA 또는 GFP mRNA를 사용하여 transfection 되었습니다. Transfection 된 세포는 Invitrogen SYTO Red Dead Cell Stain으로 염색되었고, Invitrogen Attune NxT 유세포 분석기에서 생존율을 평가했습니다. 세포 생존율(%)은 측정값 3개의 평균으로 측정했습니다. 참고: Naive T 세포는 100μL 반응에서만 electroporation 되었습니다.
그림 3. 표준 electroporation 큐벳 대비 Neon NxT 파이펫 팁의 장점. 독점적인 생물학적 호환 가능성 (A) Neon NxT 팁은 (B) electroporation 큐벳에 중요한 장점을 활용할 수 있는 입증된 capillary electroporation 기술을 제공합니다.
보통의 cuvette 기반 electroporation chamber와 달리 Neon NxT Electroporation System은 더욱 특허받은 생물학적 호환 pipette tip chamber를 사용하여 보다 균일한 전기장을 생성합니다. 이러한 설계는 기존 electroporation에 비해 생리적 조건을 더 잘 유지하고, 이를 통해 세포 생존율을 높일 수 있습니다.†
Neon NxT Electroporation System을 사용하면 귀중한 시간을 절약하고 실험에서 가장 중요한 파라미터를 정밀하게 제어할 수 있습니다. 이 transfection 시스템으로 다음 사항을 수정할 수 있습니다.
반응 당 2 x 10⁴~6 x 10의 세포를 transfection하는 유연성으로 다양한 포유류 세포에 DNA, RNA 또는 단백질을 전달합니다.
Thermo Fisher Connect에서 찾아볼 수 있는 클라우드 기반 앱 Invitrogen TransfectionLab은 설계 단계부터 각 electroporation 실험에 맞는 단계별 가이드를 자동으로 생성할 수 있습니다. 최대 384개의 샘플에 대한 여러 개의 플레이트 레이아웃을 원격으로 설정할 수 있으며, 앱에 저장된 모든 프로토콜 또는 플레이트 레이아웃을 연결된 Neon NxT 시스템에서 직접 액세스할 수 있습니다
쉽게 따라 수행할 수 있는 Neon NxT Electroporation System의 간소화된 워크플로우는 간단한 작동법으로 일관성과 재현성을 높입니다.
이 transfection 시스템으로 electroporation 공정을 간단하게 수행할 수 있습니다. 먼저 세포와 플라스미드 혼합물을 Neon NxT 파이펫 팁에 넣습니다. 두 번째, 피펫 홀더에 연결한 후 Electroporation을 누릅니다. 마지막으로, transfection 된 세포를 배양 용기에 다시 피펫팅합니다. 파이펫 팁의 품질과 직결되는 transfection은 다음의 3단계로 간단하게 이루어집니다. Aspirate, Electroporate, Dispense.
1단계 |
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AspirateNeon NxT 버퍼에 세포를 부유시켜 준비합니다. 세포와 페이로드 혼합물을에 로드합니다Neon NxT 버퍼를 Neon NxT 피펫 팁에 넣습니다. |
2단계 |
Electroporate 세포에 전기 Pulse를 사용하여 특수 버퍼에 페이로드를 전달합니다. |
3단계 |
DispenseTransfection된 세포를 회복할 수 있도록 성장 조건을 복원합니다. |
4단계 |
세포 분석 평가 예시: 유전자 발현, 유전자 편집, 발현억제, 세포주 개발 등 |
당사의 독점적인 electroporation 기술은 워크플로우를 간소화할 뿐만 아니라, Neon NxT 피펫 팁을 사용하여 transfection을 수행하므로 기존 electroporation 시스템에 비해 전체 실험에 소요되는 시간을 10~15분 단축할 수 있습니다.†
세포주에 사용 가능한 버퍼 키트를 보다 쉽게 찾을 수 있습니다. 150개 이상의 포유류 세포주에 사용 가능한 버퍼 키트 한 개로 공정을 간소화했습니다. 1,900V 미만의 전압에서는 Neon NxT Resuspension R Buffer를 사용하고, 그보다 높은 전압에서는 Invitrogen Neon NxT Resuspension T Buffer를 사용하시길 권장합니다.
Quick Start로 샘플 간의 electroporation 파라미터를 조정하는 대신, Neon NxT Electroporation System의 직관적인 사용자 인터페이스로 전체 플레이트를 사전에 셋업합니다. 각 Sample을 electroporation 한 뒤에 화면에서 진행 상황을 모니터링하고, 20분 안에 최대 24개의 샘플을 electroporation 합니다.
Sample은 귀중하지만 기존의 electroporation 큐벳을 사용하면 Sample을 옮기는 도중에 일부 용량은 필연적으로 손실됩니다. Neon NxT Electroporation System에서 electroporation은 피펫 팁 내부에서 발생하기 때문에 Sample 손실과 세포에서 발생하는 전단력을 최소화할 수 있습니다.
Pulse 생성기 및 피펫 스테이션을 비롯한 Neon NxT 시스템의 컴팩트한 공간은 대부분의 생물 안전 작업대(BSC)에 적합하도록 충분히 작게 설계되었습니다. 기기를 사용하는 동안 Sample은 항상 무균 영역 내에 유지되어 귀중한 세포를 오염시킬 위험을 줄여줍니다. 또한 Neon NxT 시스템은 새로운 케이블 관리 기능을 제공하여 BSC에서 쉽게 사용할 수 있도록 합니다.
그림 4. Neon NxT Electroporation System 크기. Neon NxT Pulse 생성기(23.1cm W x 19.3cm H x 25.1cm D)와 Neon NxT 피펫 스테이션(12.4cm W x 29.2cm H x 15cm D)을 대부분의 BSC 내부에 설치하여 Sample 오염을 최소화할 수 있습니다.
사양 | Neon NxT Electroporation System | Neon Transfection System |
---|---|---|
Electroporation 부피 | 10µL 또는 100µL | 10µL 또는 100µL |
Electroporation 버퍼 부피* | 2mL | 3mL |
팁 부착 | ClipTip 기술 | 마찰 |
Electroporation Pulse | 1~10 | 1~10 |
Pulse 지속 시간 | 1~100ms | 1~100ms |
Pulse 전압 | 500~2,500V | 500~2,500V |
Arc detection | Yes | No |
클라우드 연결 | Yes | No |
Pulse 생성기 크기** | 23.1 x 19.3 x 25.1cm(W x H x D) 11. 9 lb(5.4 kg) | 23.1 x 22.6 x 34.5cm(W x H x D) 13. 8 lb(6.25 kg) |
케이블 관리 기능*** | Yes | No |
터치 디스플레이 | 8인치 터치스크린 | 7인치 터치스크린 |
정격 | 100~240VAC, 270W | 100~240VAC, 150W |
* Neon NxT Electroporation의 버퍼 튜브에는 2mL 레벨 표시기가 있습니다.
**새시를 제거할 필요 없이 Neon NxT Pulse 생성기를 일반적인 BSC의 안팎으로 이동시킬 수 있습니다.
***케이블의 남는 부분은 부착형 케이블 정리 도구로 Neon NxT 시스템 뒤에 고정할 수 있습니다.
그림 5. Neon NxT Electroporation System 및 Neon Transfection System 성능. GFP 플라스미드 DNA 또는 GFP mRNA를 사용하여 다양한 포유류 세포주를 transfection하여 성능을 평가했습니다. (A) GFP 양성 세포의 백분율로 보고된 GFP 플라스미드 DNA transfection 효율 (B) GFP 플라스미드 DNA로 transfection 후의 세포 생존율. (C) GFP 양성 세포의 백분율로 보고된 GFP mRNA transfection 효율 (D) GFP mRNA로 transfection 후의 세포 생존율.
† Kim JA, Cho K, Shin MS, et al. (2008) 모세관 및 와이어 유형의 전극을 사용한 새로운 electroporation 방법. Biosens Bioelectron 23(9):1353–1360.
문서
이 라이브러리를 검색하여 실험 요구사항을 충족할 수 있도록 엄선된 프로토콜 및 인용을 확인하십시오. 세포 유형, 페이로드, 선택하신 제품명으로 필터링하여 쉽게 답을 얻을 수 있습니다.
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