Expi293 Expression System components

Trust the industry standard for rapid, high-yield transient HEK 293 expression

Every minute counts when it comes to expressing drug candidates. That's why the Gibco Expi293 Expression System is the tried-and-true choice for transient expression in mammalian 293 cells. This rapid, high-yield protein production system is based on high density culture of Expi293F(TM) Cells in Expi293(TM) Expression Medium and powered by Expifectamine(TM) 293, a cationic lipid-based transfection reagent. All of the system components work together to allow access to recombinant 293-derived proteins in just five to seven days, with a 2-10-fold increase in protein yields compared to previous generation transient expression systems. Get the protein yields that you need faster.

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Benefits of the Expi293 Expression System

Get more protein while reducing hands-on time and waste

The Expi293 Expression System is designed to deliver up to 6x more protein in just one week, compared with other transient 293 expression systems that can take two weeks or more. This is in part due to the fact that Expi293F Cells are adapted to achieve higher pg/cell/day productivity than standard HEK 293 cells, and the Expifectamine 293 Transfection Reagent and enhancers enable high-efficiency transfection and expression levels of high-density HEK 293 cultures. Additionally, the Expi293 Expression System requires less plasticware, which means less waste and more incubator space. The graph showcases the expression of human IgG and Fc-tagged Cripto, achieving expression levels of over 1g/L in the Expi293 Expression System.

See expression data

Use your preferred culture format without sacrificing yield

The Expi293 Expression System is designed to support robust protein production in a variety of culture vessels. In small and large-scale formats—and everything in between—you can express the protein you need. The graph highlights the expression of Fc-tagged Cripto, which achieves similar volumetric protein yields at three different scales.

Fully documented cGMP-banked cells

The graph represents the equivalent rabbit IgG titers are obtained in cGMP-banked Expi293F cells and catalog Expi293F cells at 30 mL scale using the Expi293 Expression System.

  • Fully documented cGMP-banked cell line 
  • Derived from the same Master Seed Bank as standard Expi293F Cells (Cat No. A14527
  • Pre-adapted to Expi293 Expression Medium 
  • A component of the fully integrated, animal origin-free Expi293 Expression System for applications requiring cGMP-banked cells 
  • Flexible commercial licensing options with no royalties

See product information

Get more protein while reducing hands-on time and waste

The Expi293 Expression System is designed to deliver up to 6x more protein in just one week, compared with other transient 293 expression systems that can take two weeks or more. This is in part due to the fact that Expi293F Cells are adapted to achieve higher pg/cell/day productivity than standard HEK 293 cells, and the Expifectamine 293 Transfection Reagent and enhancers enable high-efficiency transfection and expression levels of high-density HEK 293 cultures. Additionally, the Expi293 Expression System requires less plasticware, which means less waste and more incubator space. The graph showcases the expression of human IgG and Fc-tagged Cripto, achieving expression levels of over 1g/L in the Expi293 Expression System.

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Use your preferred culture format without sacrificing yield

The Expi293 Expression System is designed to support robust protein production in a variety of culture vessels. In small and large-scale formats—and everything in between—you can express the protein you need. The graph highlights the expression of Fc-tagged Cripto, which achieves similar volumetric protein yields at three different scales.

Fully documented cGMP-banked cells

The graph represents the equivalent rabbit IgG titers are obtained in cGMP-banked Expi293F cells and catalog Expi293F cells at 30 mL scale using the Expi293 Expression System.

  • Fully documented cGMP-banked cell line 
  • Derived from the same Master Seed Bank as standard Expi293F Cells (Cat No. A14527
  • Pre-adapted to Expi293 Expression Medium 
  • A component of the fully integrated, animal origin-free Expi293 Expression System for applications requiring cGMP-banked cells 
  • Flexible commercial licensing options with no royalties

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What’s in the Expi293 Expression system?

The Expi293 Expression System brings together a high-expressing 293 cell line, a chemically defined serum–free culture medium, and a high-efficiency transfection reagent with specialized enhancers.

  • 2 vials of frozen Gibco Expi293F Cells
  • 1 L of Gibco Expi293 Expression Medium
  • 1 Gibco ExpiFectamine 293 Transfection Kit, sufficient to transfect 1 L of culture
  • Gibco Opti-MEM I Reduced Serum Medium
  • An antibody-expressing positive control vector

고밀도 포유류의 일시적 단백질 발현

  • 높은 transfection 효율
  • 최대 10배 더 높은 단백질 수율
  • 세포 생활성 개선
  • 작은 배양 용적

발현 데이터 확인하기   Expi293 savings calculator


Expi293™ Expression System 추천

일시적 발현 시스템을 사용해 작업하는 몇 년 간 Expi293™ Expression System은 2.3g/L를 확보해 준 첫 번째 시스템으로 다른 모든 HEK293 일시적 발현 시스템보다 우수한 성능을 자랑합니다.” - 젤트 장 레이츠마(Jelte-Jan Reitsma), Research Associate


Expi293™ Expression System videos


Additional capabilities of Expi293 Transient Protein Expression System for structural biology and inducible expression

Expi293 Transient Protein Expression System

Expect more from the system that transformed mammalian transient expression. Now introducing three additional cell lines and a labeling kit that unlock new possibilities within the Expi293 Transient Protein Expression System. With features accommodating structural biology and inducible protein expression applications, you can expand your work with the same incredible yield and intricate structure you’ve experienced with our other Expi293 Expression Systems. Get the high yields, rapid time to protein (just 5–7 days), and reproducibility you’ve come to expect, with the added flexibility to suit a broader range of applications and proteins.  

The Expi293 system’s additional capabilities include:

  • Glycan modulation
  • Inducible expression
  • Methionine protein labeling


Expi293 Expression System applications

20배 더 우수한 막 단백질 수율을 확보할 수 있습니다.

Expi293 MembranePro Expression System
GPCR(G protein–coupled receptor) 및 기타 막 단백질을 연구할 때 Expi293™ MembranePro™ Expression System은 효율, 확장성, 안정성이 높은 농축된 기능성 막 단백질이 됩니다.

  • 우수한 효율성— 부착 시스템에 비해 20배 더 높은 막 단백질 수율
  • 우수한 확장성—여러 플라스크 없이도 확장이 용이함
  • 사용 용이성—효소 또는 물리적 해리가 필요 없음

자세히 보기


정확한 folding 단백질 발현

구조 생물학자에게 불용성 및 misfolded 단백질은 재시작을 의미합니다. Expi293 Expression System은 현탁 293 세포, 최적화된 배지, transfection 시약과 함께 사용해 native folding 및 최고의 단백질 수율을 확보합니다. 이제 구조 연구에서 충분한 생물학적 관련성을 확보할 수 있습니다.

자세히 보기

The Expi293 Expression System은 포유류 세포에서 mg부터 g까지 분량의 재조합 단백질을 빠르게 생성합니다. 휴먼이나 다른 포유류 단백질 발현의 경우, 휴먼 유래 293 세포에서의 발현이 E. coli, 효모, 또는 곤충 세포 등 숙주 기반 발현 시스템보다 많은 native folding과 glycosylation 같은 이행 후 변형을 갖는 장점이 있습니다.


Expi293™ 프로토콜

Expi293™ Expression System에는 실험실에서 높은 수준의 재조합 단백질을 쉽게 만들기 위해 필요한 모든 요소가 들어 있습니다. 필요한 단 한 가지 추가 물질은 관심 단백질에 대한 DNA를 포함한 포유류 발현 벡터입니다.

Gibco™ Expi293F™ cell은 해동 후 Expi293™ Expression Medium에서 현탁 배양으로 성장합니다. 세포는 일반적으로 플라스크에 넣어 CO2 세포 배양기 또는 생물배양기 내 진탕기 플랫폼에서 성장합니다. 이 세포를 ExpiFectamine™ 293 Transfection Reagent를 사용해 transfection합니다. 그리고 transfection 후 16-18시간째에 transfection 증강인자(enhancer) 1과 2를 배양액에 첨가합니다. 단백질 생성 중 배양 배지를 바꾸거나 배양액에 보충제를 첨가할 필요가 없습니다. 타깃 단백질의 발현 양상에 따라 transfection 후 2-7일째에 단백질을 수득할 수 있습니다. 재조합 항체 발현의 경우, 최대 수율은 대개 transfection 후 5-7일째에 관찰됩니다.

이 시스템은 확장성이 매우 높아 24-well 플레이트의 1mL 배양액에서 진탕 플라스크의 최대 1L 배양액까지의 transfection 형식에서 비슷한 양의 단백질 수율을 생성합니다(그림 1 참조).

Expression of Fc-tagged Cripto 
그림 1. Fc-tagged Cripto 발현이 3가지 크기에서 비슷한 단백질 수율 달성.


어플리케이션 노트

20배 더 우수한 막 단백질 수율을 확보할 수 있습니다.

Expi293 MembranePro Expression System
GPCR(G protein–coupled receptor) 및 기타 막 단백질을 연구할 때 Expi293™ MembranePro™ Expression System은 효율, 확장성, 안정성이 높은 농축된 기능성 막 단백질이 됩니다.

  • 우수한 효율성— 부착 시스템에 비해 20배 더 높은 막 단백질 수율
  • 우수한 확장성—여러 플라스크 없이도 확장이 용이함
  • 사용 용이성—효소 또는 물리적 해리가 필요 없음

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정확한 folding 단백질 발현

구조 생물학자에게 불용성 및 misfolded 단백질은 재시작을 의미합니다. Expi293 Expression System은 현탁 293 세포, 최적화된 배지, transfection 시약과 함께 사용해 native folding 및 최고의 단백질 수율을 확보합니다. 이제 구조 연구에서 충분한 생물학적 관련성을 확보할 수 있습니다.

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The Expi293 Expression System은 포유류 세포에서 mg부터 g까지 분량의 재조합 단백질을 빠르게 생성합니다. 휴먼이나 다른 포유류 단백질 발현의 경우, 휴먼 유래 293 세포에서의 발현이 E. coli, 효모, 또는 곤충 세포 등 숙주 기반 발현 시스템보다 많은 native folding과 glycosylation 같은 이행 후 변형을 갖는 장점이 있습니다.


Expi293™ 프로토콜

Expi293™ Expression System에는 실험실에서 높은 수준의 재조합 단백질을 쉽게 만들기 위해 필요한 모든 요소가 들어 있습니다. 필요한 단 한 가지 추가 물질은 관심 단백질에 대한 DNA를 포함한 포유류 발현 벡터입니다.

Gibco™ Expi293F™ cell은 해동 후 Expi293™ Expression Medium에서 현탁 배양으로 성장합니다. 세포는 일반적으로 플라스크에 넣어 CO2 세포 배양기 또는 생물배양기 내 진탕기 플랫폼에서 성장합니다. 이 세포를 ExpiFectamine™ 293 Transfection Reagent를 사용해 transfection합니다. 그리고 transfection 후 16-18시간째에 transfection 증강인자(enhancer) 1과 2를 배양액에 첨가합니다. 단백질 생성 중 배양 배지를 바꾸거나 배양액에 보충제를 첨가할 필요가 없습니다. 타깃 단백질의 발현 양상에 따라 transfection 후 2-7일째에 단백질을 수득할 수 있습니다. 재조합 항체 발현의 경우, 최대 수율은 대개 transfection 후 5-7일째에 관찰됩니다.

이 시스템은 확장성이 매우 높아 24-well 플레이트의 1mL 배양액에서 진탕 플라스크의 최대 1L 배양액까지의 transfection 형식에서 비슷한 양의 단백질 수율을 생성합니다(그림 1 참조).

Expression of Fc-tagged Cripto 
그림 1. Fc-tagged Cripto 발현이 3가지 크기에서 비슷한 단백질 수율 달성.


어플리케이션 노트

Expi293 Met(–) Protein Labeling Kit

Use our Expi293 methionine-deficient protein labeling kit that streamlines structural biology studies by x-ray crystallography and NMR using high-titer mammalian suspension cultures.

Key benefits:

  • Uniform labeling of methionine residues
     
Bar charts of protein titer obtained from expression at different passages and growth conditions with methyl 13C methionine and selenomethionine and in the Expi293 expression system

(A) Protein expression with methyl 13C methionine added back at various time points prior to transfection. (B) Protein expression with selenomethionine added back at various time points prior to transfection.

Theoretical mass spectrographs showing peptides containing SeMet and a mix of native and SeMet-labeled peptide.

A comparison of theoretical spectra for peptide containing selenomethionine and the experimental spectra for a mixture of native and SeMet-labeled peptide.
 

Expi293 Expression System customer stories

Expi293 is cost-effective compared to other FreeStyle 293 Medium

NOTE: Cost comparison based on list price in USD and protein yields of 1 g/L with Expi293 Expression System.


시스템 구성품은?

Expi293™ Expression System

ExpiFectamine™ 293 Reagent 및 ExpiFectamine™ 293 Transfection Enhancers 1과 2는 ExpiFectamine™ 293 Transfection 키트로만 판매됩니다. 그 외 다른 모든 시스템 구성요소는 별도로 구입할 수 있습니다. 각 키트의 구성:

  • 동결 Expi293F™ 세포 2 바이알
  • Expi293™ Expression Medium 1L
  • ExpiFectamine™ 293 Transfection Kit 1개: 배양액 1L transfection에 충분
  • Opti-MEM® Reduced Serum Medium
  • 항체 발현 양성 대조군

Expi293 Expression System은 포유류 세포에서 신속하게 초고수율 단백질을 생성할 수 있는 첨단 일시적 발현 기술입니다. 이는 Expi293™ Expression Medium에서 Expi293F™세포의 고밀도 배양을 기초로 합니다. 일시적 발현은 새로운 양이온 지질(cationic lipid) 기반 ExpiFectamine™ 293 transfection 시약과 특히 이러한 transfection 시약에 사용하도록 최적의 transfection 증강인자(transfection enhancer)를 함께 사용하여 이루어집니다. 모든 구성물질이 함께 어우러져 FreeStyle™ 293 Expression System 같은 기존 배양 시스템보다 2-10배 높은 단백질 수율을 제공합니다. IgG 및 non-IgG 단백질에서 1g/L 이상의 발현이 이루어졌습니다(그림 2 참조).
 

Expi293™ Expression System 
그림 2. Expi293™ Expression System에서 휴먼 IgG 및 Fc-tagged Cripto의 발현이 1g/L 이상의 수준에 달했습니다.


Expi293™ Expression System의 고유한 특징

Expi293 Expression Medium은 무혈청, 무단백질의 합성 배지입니다. Expi293™ Expression Medium은 고밀도 세포 배양(그림 3 참조)과 transfection을 가능하게 하여 기존 배양 시스템보다 훨씬 많은 양의 단백질을 얻을 수 있습니다.

Expi293™ Expression Medium 
그림 3. Expi293™ Expression Medium과 다른 293 배양 배지에서 성장한 세포에 대한 시간 경과에 따른 생존 세포 밀도 및 세포 생활성.

Expi293F cells은 Expi293™ Expression System에 사용 시 전형적인 293 세포 보다 높은 생산성을 나타내고 Freestyle™ 293F 보다 최대 1.7배 많은 단백질을 생성하도록 특별히 조정됩니다. ExpiFectamine™ 293 transfection 시약 은 고밀도 293 배양의 transfection 효율성을 높이며 transfection 증강인자(enhancer)와 결합해 transfection 성능과 발현 수준을 더욱 배가시킵니다. (그림 4 참조)
 

Expression of hIgG 
그림 4. transfection 증강인자(enhancer) 유무에 따른 IgG의 발현.


Expi293™ System 비용 비교 차트

 FreeStyle™ 293 Medium을 이용한 PEIExpi293™ System(5배의 수율)
1L Transfection의 비용$548$1531
배지$458$893
DNA$90$90
Tfxn Reagent$0$548
동등한 수율의 배양 용적1L200mL
transfection 비용$548$306
배양 용기 비용$59$18
동량의 단백질에서 총 비용$607$324

Ordering information

We offer a full array of innovative products and services, including fast and flexible cell line development, media and feeds, class-setting technologies, quality custom media development, and media optimizing services.

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Thermo Scientific Nalgene sterile single-use Erlenmeyer flasks

Sterile, single-use Thermo Scientific Nalgene flasks are made from light, break-resistant, crystal-clear PETG, so you can express with confidence. All sizes are available in vented or non-vented formats, and with plain or baffled bottoms for use on the benchtop or shaker table.

See protocol for flasks validated with Expi293 Expression system

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.