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TaqMan hPSC 스코어카드 어세이
PSC 다분화능 정량 분석
Applied Biosystems TaqMan hPSC 스코어카드 패널(Scorecard Panel)은 Real-Time qPCR 어세이와 직관적인 데이터 분석 소프트웨어를 사용하여 다능성과 다분화능(trilineage differentiation potential)을 평가합니다. hPSC 스코어카드 어세이는 Alex Meissner와 협력하여 개발한 제품으로, 그의 대표 출판물 내용을 충실히 따릅니다(Cell 2011 144:439–452). 함께 제공되는 분석 소프트웨어를 사용하면 연구자가 세계 어디에 있든 자신의 세포주 유전자 발현 프로파일을 공통의 참조 자료 세트와 비교해볼 수 있습니다.
TaqMan hPSC 스코어카드 어세이를 선택한 이유
스코어카드가 제공하는 장점에 대해 RUCDR/Infinite Biologics에서 근무하는 Jennifer Moore의 경험담을 들어 보십시오.
데이터 분석
TaqMan hPSC 스코어카드 패널에는 직관적인 무료 웹 기반 분석 소프트웨어에 액세스할 수 있는 권한이 포함되어 있습니다. 연구자는 이를 이용하여 샘플의 유전자 발현 프로파일을 참조 자료 세트와 정량적으로 비교해볼 수 있습니다.
CellModel 서비스
리소스나 기기 부족으로 스코어카드 패널을 이용하기 곤란합니까? 저희가 대신해드리겠습니다!
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TaqMan hPSC 스코어카드 패널은
배아와 유도 만능 줄기 세포주 모두에서 다능성(다분화능)을 정량적으로 확인합니다. hPSC 스코어카드 패널(96-well 및 384-well 형태로 제공)은 94개의 미리 정의된 TaqMan 유전자 발현 어세이(내생 대조물질 포함)를 어세이 플레이트 웰에 건조시킨 상태로 포함합니다. 이 유전자 패널은 Alex Meissner와 협력하여 개발하였으며, 그의 대표 출판물 내용을 충실히 따릅니다(Cell 144:439-452 (2011)).
TaqMan hPSC 스코어카드 패널이 제공하는 기능은 다음과 같습니다.
- 다능성과 다분화능 확인을 위한 정량적 어세이
- 발현 프로파일을 참조용 표준에 비교 가능
- 사용이 간편한 플랫폼에 미리 플레이트에 준비한 어세이 및 직관적인 전용 분석 소프트웨어 제공
프로토콜 개요:
- 미분화된 시료, 자연적 분화(EB) 또는 유도(단층) 분화된 시료 테스트
- RNA 추출 및 정제
- cDNA 생성
- 호환되는 qRT-PCR 기기에서 유전자 발현 패널 실행
- .eds 파일을 hPSC 스코어카드 분석 소프트웨어에 업로드
- 편리한 클라우드 기반 분석 응용 프로그램에서 데이터를 분석하고 결과를 내보냄
hPSC 스코어카드 어세이 실시 방법
미분화된 ESC/iPSC
분화된 ESC/iPSC: 배양체(1주차) - 또는 - 직접 분화된 세포.
시료 요건: >1 x 106 세포/시료
미분화된 ESC/iPSC
지지세포(feeder) 의존 배양
지지세포(feeder) 무의존 배양
Differentiated ESC/iPSC (EBs)
RNA 분리
- TRIzol reagent
- RNase-free water
- 클로로포름
- 이소프로판올
- 에탄올
- DNA 비함유
조성
TRIzol 유기상(organic phase) 추출
시료 요건: 6 cm 배양 접시 한 개당 TRIzol 시약 1 mL
[RNA] (mg/mL) = A260 * 40
권장 A260/A280 비율 = 1.6 – 1.8
RNA 시료 한 개당 역전사(RT) 반응 8회
직관적인 분석 소프트웨어를 사용하여 TaqMan hPSC 스코어카드 패널에서 얻은 데이터 분석
hPSC 스코어카드 분석 소프트웨어에 로그인
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미분화된 ESC/iPSC
분화된 ESC/iPSC: 배양체(1주차) - 또는 - 직접 분화된 세포.
시료 요건: >1 x 106 세포/시료
미분화된 ESC/iPSC
지지세포(feeder) 의존 배양
지지세포(feeder) 무의존 배양
Differentiated ESC/iPSC (EBs)
RNA 분리
- TRIzol reagent
- RNase-free water
- 클로로포름
- 이소프로판올
- 에탄올
- DNA 비함유
조성
TRIzol 유기상(organic phase) 추출
시료 요건: 6 cm 배양 접시 한 개당 TRIzol 시약 1 mL
[RNA] (mg/mL) = A260 * 40
권장 A260/A280 비율 = 1.6 – 1.8
RNA 시료 한 개당 역전사(RT) 반응 8회
직관적인 분석 소프트웨어를 사용하여 TaqMan hPSC 스코어카드 패널에서 얻은 데이터 분석
hPSC 스코어카드 분석 소프트웨어에 로그인
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For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.