iBlot 3 웨스턴 블랏 트랜스퍼 시스템은 차세대 드라이 트랜스퍼 장치입니다. 두 개의 독립 제어 트랜스퍼 스테이션, 더 빠른 트랜스퍼 프로토콜, 더 높은 처리량 등 여러 가지 새로운 기능으로 오리지널 iBlot 및 iBlot 2 장치보다 훨씬 높은 편의성을 제공합니다. 또한 iBlot 3은 단 3분 만에 간단한 고효율 웨스턴 블로팅 트랜스퍼가 가능한 뛰어난 성능을 제공합니다.
iBlot 3으로 업그레이드
차세대 성능 및 편의성
iBlot 2 및 iBlot 3 장치 비교
iBlot 3 장치 | iBlot 2 장치 | |
| 트랜스퍼 시간 | 3-10분 | 5-10분 |
| 블랏 처리량 | 1–4 mini gels 1–2 midi gels | 1–2 mini gels 1 midi gel |
| 사전 조립된 트랜스퍼 스택 트레이가 장치에 바로 삽입됨 | ✔ | ✔ |
| 터치스크린 | ✔ | ✔ |
| 내장형 냉각 기능 | ✔ | – |
| 유연성 - 여러 프로그램을 동시에 실행 | ✔ | – |
| 보증 연장 | ✔ | – |
생산성 극대화
iBlot 3을 사용하면 단 3분 만에 그 어느 때보다 빠르게 안정적인 고품질 트랜스퍼를 수행할 수 있습니다. 또한 2개의 독립 제어형 트랜스퍼 스테이션을 통해 장치를 동료와 공유할 수 있으며, 동시에 2개의 서로 다른 프로그램을 사용하여 총 4개의 미니 젤(mini gel) 또는 2개의 미디 젤(midi gel)을 동시에 실행할 수 있습니다.
일관되고 재현성 있는 결과
사전 조립된 일회용 소모품과 초고속 트랜스퍼 방식으로 변동성이 제거되어 기존 방법에 비해 일관되고 재현성 있는 결과를 보장할 수 있습니다. 또한 내장형 냉각 기능이 포함된 완전히 새로운 견고한 설계로 열 축적이 감소하고 실행 간 일관성이 향상됩니다.
iBlot 3 장치는 일관된 결과를 제공합니다. HEK293 용해물(Thermo Scientific RIPA 버퍼에서 용해됨)의 연속 희석액을 4개의 Invitrogen Bolt 4–12% Bis-Tris Plus 젤에 로드했습니다. 단백질 로드(왼쪽에서 오른쪽 순, μg 단위)는 10, 5, 2.5, 1.25, 0.625, 0.312, 0.156, 0.078, 0.039, 0.020, 0.010이었습니다. Invitrogen iBright Prestained Protein Ladder(2 μL)는 마지막 레인에 로드했습니다. MES-SDS 러닝(running) 버퍼를 젤 전기영동에 사용했습니다. 단백질은 광범위한(30–250 kDa) 사전 프로그래밍된 트랜스퍼 방법(25 V, 6분, 저냉각)을 사용하는 iBlot 3 웨스턴 블랏 트랜스퍼 장치 및 iBlot 3 트랜스퍼 스택, 미디(Midi), NC를 사용하여 트랜스퍼되었습니다. 그런 다음 블랏을 Pierce Clear Milk Blocking Buffer로 차단한 다음 12시간 동안 맑은 우유에서 표피성장인자 수용체(EGFR), calreticulin 및 p23에 대해 생성된 1차 항체를 사용하여 프로빙했습니다. 2차 항체 GAR-Invitrogen Alexa Fluor Plus 800 dye, GAM-Invitrogen Alexa Fluor Plus 488 dye 및 GAChk-Invitrogen Alexa Fluor 546 dye를 TBST에서 전처리한 다음 2시간 동안 블랏에 추가했습니다. Bandmate Automated Western Blot Processor에서 이뮤노프로세싱을 완료했습니다. 이미징은 iBright FL1500 이미징 시스템에서 완료했습니다. 참고: GAChk = goat anti-chicken.
트랜스퍼 효율성 향상
iBlot 3을 사용하면 습식 탱크 트랜스퍼 및 기타 신속 트랜스퍼 방법에 비해 단백질 트랜스퍼 효율이 양호하거나 더 우수합니다. 이는 새로운 설계가 내장형 냉각 기능을 포함하여 그 어느 때보다 더 많은 최적화 옵션을 제공하기 때문입니다. 또한 온도 제어를 통해 실행 간에 시스템이 냉각될 때까지 기다리지 않고 연속 실행을 수행할 수 있습니다.
iBlot 3 시스템은 트랜스퍼 효율이 더 우수합니다. (A) Hsp70: Invitrogen NuPAGE 4–12% Bis-Tris 미니 젤에 20, 15, 10, 5, 2.5, 1.25, 0.625 및 0.312 μg의 A431 용해물을 로드하였습니다. Invitrogen Bandmate Automated Western Blot Processor를 사용하여 이뮤노프로세싱을 완료했습니다. Thermo Scientific Pierce Clear Milk Blocking Buffer를 사용하여 30분 동안 블랏을 인큐베이션했습니다. Hsp70 1차 항체(맑은 우유에서 1:1,000)를 블랏에 추가하여 RT에서 12시간 동안 인큐베이션했습니다. GAM-HRP 2차 항체(TBST에서 1:120,000)를 블랏에 추가하여 2시간 동안 인큐베이션했습니다. Thermo Scientific SuperSignal West Dura 기질을 검출에 사용했습니다. 이미지 캡처에 Invitrogen iBright FL1500 이미징 시스템을 사용했습니다. (B) 4EBP1: Invitrogen Novex 16% Tricine 미니 젤에 10, 5, 2.5, 1.25, 0.625, 0.312, 0.156 및 0.078 μg의 A431 용해물을 로드하였습니다. Bandmate Automated Western Blot Processor를 사용하여 이뮤노프로세싱을 완료했습니다. Pierce Clear Milk Blocking Buffer를 사용하여 30분 동안 블랏을 인큐베이션했습니다. 4EBP1 1차 항체(맑은 우유에서 1:1,000)를 블랏에 추가하여 RT에서 12시간 동안 인큐베이션했습니다. GAR-HRP 2차 항체(TBST에서 1:175,000)를 블랏에 추가하여 2시간 동안 인큐베이션했습니다. SuperSignal West Dura 기질을 검출에 사용했습니다. 이미지 캡처에 iBright FL1500 기기를 사용했습니다.
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