L-Glutamine & GlutaMAX Cell Culture Supplements

A L-glutamina é um aditivo de aminoácido essencial para a cultura celular

L-glutamina é um suplemento de aminoácido comumente adicionado ao meio de cultura de células de mamíferos. A L-glutamina serve como fonte de energia auxiliar, especialmente quando as células se dividem rapidamente e também pode ser usada por células como fonte de nitrogênio para a síntese de proteínas, ácidos nucleicos, etc.

Em soluções aquosas, como meios de cultura celular, a L-glutamina se decompõe em amônia, que é tóxica às células. Para minimizar os efeitos disso, os pesquisadores podem adotar uma estratégia de alimentação continua baixos níveis de L-glutamina na cultura ou podem usar uma formulação alternativa de L-glutamina, como o suplemento Gibco GlutaMAX, projetado para ser mais estável em solução.

L-glutamina para cultura celular

A L-glutamina é um nutriente essencial em culturas celulares para a produção de energia, bem como para a síntese de proteínas e ácidos nucleicos. Oferecemos este aminoácidos para suplementar meios de cultura tanto em formas líquidas como em pó. A glutamina em pó é fornecida como um produto químico de grau USP (United States Pharmacopeia), e as formulações líquidas são fornecidas como uma solução de estoque de 200 mm pronta para uso.

O suplemento GlutaMAX mantém as suas células mais saudáveis durante mais tempo

Embora a L-glutamina seja um nutriente essencial em culturas celulares, ela degrada espontaneamente em meios de cultura celular gerando amônia e Ácido Pirrolidonocarboxílico como subprodutos. O suplemento Gibco GlutaMAX é um suplemento para cultura de células melhorado que pode ser usado como um substituto direto para o L-glutamina em seu meio de cultura celular.

O suplemento glutaMAX é um dipeptídeo, L-alanina-L-glutamina, que é mais estável em soluções aquosas e não se degrada espontaneamente.

Escolha entre uma variedade de formulações

Oferecemos muitas formulações nas quais o dipeptídeo glutaMAX substitui a L-glutamina. As opções incluem DMEM, MEM, RPMI, Opti-MEM e outros meios basais.

Use o suplemento GlutaMAX na solução de 200 mm como substituto direto da L-glutamina em concentrações equimolares em sua formulação atual de meios de cultura celular. Use a solução de 200 mm suplemento GlutaMAX como substituto direto da L-glutamina em concentrações equimolares em sua formulação atual de meios de cultura celular. O suplemento GlutaMAX é estável em temperatura ambiente, o que significa que os ciclos de congelamento e descongelamento podem ser evitados, reduzindo o risco de contaminação por cultura devido a frequentes etapas de manuseio de líquidos.

Gibco GlutaMAX suplemento de meio de cultura e Gibco GlutaMAX meio de cultura são adequados para culturas de células de mamíferos aderentes e suspensas, com pouca ou nenhuma adaptação necessária.

Levando seu trabalho para a clínica? Não se esqueça de conferir o Suplemento CTS GlutaMAX

OBSERVAÇÃO:  Este suplemento é adequado para culturas de células de mamíferos. Não é recomendado para culturas de células de insetos.

Suplemento glutaMAX versus L-glutamina

Aproveite ao máximo suas culturas de células com o suplemento GlutaMAX

Como funciona o suplemento GlutaMAX?

O mecanismo de utilização do dipeptídeo envolve a liberação gradual da peptídase durante a cultura para permitir a hidrólise gradual do dipeptídeo no meio (Figura 1). Isto pode ser comparado com a estratégia de alimentação gradual de uma cultura celular em que a L-glutamina é continuamente acrescentada na cultura, mas mantida em baixa concentração. O resultado é um metabolismo de energia eficiente e um alto rendimento de crescimento.

Aplicação controlada de L-glutamina

Figura 1. Aplicação controlada de L-glutamina de meios a células em cultura.

Quando as células são cultivadas em meios que contêm suplemento GlutaMAX, as células liberam gradualmente aminopeptidases que hidrolisam o dipeptídeo, liberando lentamente L-alanina e L-glutamina no meio de cultura. A L-glutamina e a L-alanina podem então ser utilizadas pelas células e para a produção de proteínas ou no ciclo TCA. Isto pode ser comparado com a estratégia de alimentação gradual de uma cultura celular em que a L-glutamina é continuamente acrescentada na cultura, mas mantida em baixa concentração. O resultado é um metabolismo de energia eficiente e um alto rendimento de crescimento sem excesso de amônia.

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Figura 2. Células tronco mesenquimais humanas cultivadas com meios GlutaMAX e coradas com corante nuclear DAPI e anticorpo CD105 primário ligado a um anticorpo Invitrogen Alexa Fluor 488 secundário.

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Figura 3.  Células tronco mesenquimais humanas cultivadas com meios GlutaMAX sob condições adipogênicas diferenciadoras e coradas com marcador nuclear Hoechst 33342, Invitrogen LipidTOX™ Green Neutral Lipid Stain e Invitrogen MitoTracker Red.

Como o suplemento GlutaMAX melhora sua cultura de células?

O uso do suplemento glutaMAX no lugar da L-glutamina na cultura celular pode melhorar a viabilidade e o crescimento celular, aumentando potencialmente os níveis de produtividade.

Os resultados podem variar dependendo da linhagem celular usada. Em um exemplo específico da aplicação, as Figuras 4 e 5 mostram uma curva de crescimento de células AE-1 e uma produção de IgG 1 recombinante. O suplemento para cultura de células GlutaMAX demonstra melhor número de células e produtividade.

O suplemento GlutaMAX pode prolongar a vida da cultura celular, o que pode reduzir o número de vezes que as células devem ser subcultivadas e economiza tempo e dinheiro.  

A Figura 6 compara as células MDBK cultivadas em D-MEM com 10% de FBS e L-glutamina ou suplemento glutaMAX. As células cultivadas em suplemento de GlutaMAX atingem a densidade de pico dois dias mais tarde e a viabilidade diminui menos rapidamente do que a observada em culturas com suplementação de L-glutamina. O pequeno aumento na fase de crescimento exponencial é atribuído ao tempo necessário para liberar a peptidase e dipeptídeo.  

Isso permite um aumento gradual na disponibilidade de L-glutamina para as células. (Appl Biocem Biotecnol 30:29 (1991)).

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Figura 4. Crescimento celular. As células do mieloma de camundongo AE-1 foram semeadas a 1 x 105 células/mL. As amostras foram coletadas diariamente após três dias e avaliadas em triplicado para densidade celular. A viabilidade celular foi determinada pela exclusão de azul de tripan. A densidade celular continuou a aumentar em amostras contendo o suplemento GlutaMAX além do ponto em que L-glutamina contendo amostras diminuiu na densidade celular.

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Figura 5. Produção de IgG1. As amostras da Figura 4 também foram examinadas por ELISA para a produção de IgG1. Suplemento glutaMAX – contendo amostras que não foram realizadas com L-glutamina.

 

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Figura 6. As células MDBK foram semeadas a aproximadamente 1 x 105 células/frasco em D-MEM com 10% de FBS e L-glutamina ou suplemento glutaMAX em frascos T de 25 cm 2.

Como a L-glutamina é usada na cultura celular?

L-glutamina é um aminoácido essencial exigido em formulações de meios de cultura celular. A L-glutamina participa da formação de nucleotídeos de purina e pirimidina, aminoácidos, glutationa, L-glutamato e outros aminoácidos, bem como na síntese proteica e produção de glicose. Diferentemente da maioria dos outros aminoácidos, a L-glutamina não é estável na solução. A taxa na qual a degradação prossegue é uma função de tempo, temperatura e pH. Oferecemos o suplemento Gibco GlutaMAX como uma alternativa mais estável à L-glutamina.

Como posso descongelar a L-glutamina?

Quando a L-glutamina está em uma solução de estoque concentrado, ela precipita facilmente quando resfriada. Aquecer a solução por breves instantes num banho de água a 37 oC com um redemoinho suave dissolverá o precipitado. Não use o produto a menos que o precipitado esteja totalmente dissolvido.

Qual é a vida útil da L-glutamina?

24 meses a partir da data de fabricação

Quanto L-glutamina deve ser adicionada ao meio?

A Gibco L-glutamina é fornecida como uma solução de estoque de 200 mm pronta para uso que atua como um suplemento de cultura celular. A concentração ideal depende do tipo de célula e do meio utilizado para a cultura das células, mas geralmente cai na faixa de 2 a 6 mm.

Qual é a diferença entre o suplemento L-glutamina e o suplemento GlutaMAX?

A L-glutamina é um nutriente essencial em culturas celulares para a produção de energia, bem como para a síntese de proteínas e ácidos nucleicos. Entretanto, a L-glutamina em meio de cultura celular degrada espontaneamente, gerando amônia e Ácido Pirrolidonocarboxílico como subprodutos.

O suplemento glutaMAX é um dipeptídeo, L-alanina-L-glutamina, que é mais estável em soluções aquosas e não se degrada espontaneamente. Os meios e meios de comunicação Gibco GluutaMAX complementados com o suplemento GlutaMAX são adequados para culturas de células de mamíferos aderentes e suspensas, com pouca ou nenhuma adaptação necessária.

Como funciona o suplemento GlutaMAX?

O mecanismo de utilização do dipeptídeo envolve a liberação gradual da peptídase durante a cultura para permitir a hidrólise gradual do dipeptídeo no meio (Figura 1). Isto pode ser comparado com a estratégia de alimentação gradual de uma cultura celular em que a L-glutamina é continuamente acrescentada na cultura, mas mantida em baixa concentração. O resultado é um metabolismo de energia eficiente e um alto rendimento de crescimento.

Aplicação controlada de L-glutamina

Figura 1. Aplicação controlada de L-glutamina de meios a células em cultura.

Quando as células são cultivadas em meios que contêm suplemento GlutaMAX, as células liberam gradualmente aminopeptidases que hidrolisam o dipeptídeo, liberando lentamente L-alanina e L-glutamina no meio de cultura. A L-glutamina e a L-alanina podem então ser utilizadas pelas células e para a produção de proteínas ou no ciclo TCA. Isto pode ser comparado com a estratégia de alimentação gradual de uma cultura celular em que a L-glutamina é continuamente acrescentada na cultura, mas mantida em baixa concentração. O resultado é um metabolismo de energia eficiente e um alto rendimento de crescimento sem excesso de amônia.

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Figura 2. Células tronco mesenquimais humanas cultivadas com meios GlutaMAX e coradas com corante nuclear DAPI e anticorpo CD105 primário ligado a um anticorpo Invitrogen Alexa Fluor 488 secundário.

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Figura 3.  Células tronco mesenquimais humanas cultivadas com meios GlutaMAX sob condições adipogênicas diferenciadoras e coradas com marcador nuclear Hoechst 33342, Invitrogen LipidTOX™ Green Neutral Lipid Stain e Invitrogen MitoTracker Red.

Como o suplemento GlutaMAX melhora sua cultura de células?

O uso do suplemento glutaMAX no lugar da L-glutamina na cultura celular pode melhorar a viabilidade e o crescimento celular, aumentando potencialmente os níveis de produtividade.

Os resultados podem variar dependendo da linhagem celular usada. Em um exemplo específico da aplicação, as Figuras 4 e 5 mostram uma curva de crescimento de células AE-1 e uma produção de IgG 1 recombinante. O suplemento para cultura de células GlutaMAX demonstra melhor número de células e produtividade.

O suplemento GlutaMAX pode prolongar a vida da cultura celular, o que pode reduzir o número de vezes que as células devem ser subcultivadas e economiza tempo e dinheiro.  

A Figura 6 compara as células MDBK cultivadas em D-MEM com 10% de FBS e L-glutamina ou suplemento glutaMAX. As células cultivadas em suplemento de GlutaMAX atingem a densidade de pico dois dias mais tarde e a viabilidade diminui menos rapidamente do que a observada em culturas com suplementação de L-glutamina. O pequeno aumento na fase de crescimento exponencial é atribuído ao tempo necessário para liberar a peptidase e dipeptídeo.  

Isso permite um aumento gradual na disponibilidade de L-glutamina para as células. (Appl Biocem Biotecnol 30:29 (1991)).

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Figura 4. Crescimento celular. As células do mieloma de camundongo AE-1 foram semeadas a 1 x 105 células/mL. As amostras foram coletadas diariamente após três dias e avaliadas em triplicado para densidade celular. A viabilidade celular foi determinada pela exclusão de azul de tripan. A densidade celular continuou a aumentar em amostras contendo o suplemento GlutaMAX além do ponto em que L-glutamina contendo amostras diminuiu na densidade celular.

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Figura 5. Produção de IgG1. As amostras da Figura 4 também foram examinadas por ELISA para a produção de IgG1. Suplemento glutaMAX – contendo amostras que não foram realizadas com L-glutamina.

 

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Figura 6. As células MDBK foram semeadas a aproximadamente 1 x 105 células/frasco em D-MEM com 10% de FBS e L-glutamina ou suplemento glutaMAX em frascos T de 25 cm 2.

Como a L-glutamina é usada na cultura celular?

L-glutamina é um aminoácido essencial exigido em formulações de meios de cultura celular. A L-glutamina participa da formação de nucleotídeos de purina e pirimidina, aminoácidos, glutationa, L-glutamato e outros aminoácidos, bem como na síntese proteica e produção de glicose. Diferentemente da maioria dos outros aminoácidos, a L-glutamina não é estável na solução. A taxa na qual a degradação prossegue é uma função de tempo, temperatura e pH. Oferecemos o suplemento Gibco GlutaMAX como uma alternativa mais estável à L-glutamina.

Como posso descongelar a L-glutamina?

Quando a L-glutamina está em uma solução de estoque concentrado, ela precipita facilmente quando resfriada. Aquecer a solução por breves instantes num banho de água a 37 oC com um redemoinho suave dissolverá o precipitado. Não use o produto a menos que o precipitado esteja totalmente dissolvido.

Qual é a vida útil da L-glutamina?

24 meses a partir da data de fabricação

Quanto L-glutamina deve ser adicionada ao meio?

A Gibco L-glutamina é fornecida como uma solução de estoque de 200 mm pronta para uso que atua como um suplemento de cultura celular. A concentração ideal depende do tipo de célula e do meio utilizado para a cultura das células, mas geralmente cai na faixa de 2 a 6 mm.

Qual é a diferença entre o suplemento L-glutamina e o suplemento GlutaMAX?

A L-glutamina é um nutriente essencial em culturas celulares para a produção de energia, bem como para a síntese de proteínas e ácidos nucleicos. Entretanto, a L-glutamina em meio de cultura celular degrada espontaneamente, gerando amônia e Ácido Pirrolidonocarboxílico como subprodutos.

O suplemento glutaMAX é um dipeptídeo, L-alanina-L-glutamina, que é mais estável em soluções aquosas e não se degrada espontaneamente. Os meios e meios de comunicação Gibco GluutaMAX complementados com o suplemento GlutaMAX são adequados para culturas de células de mamíferos aderentes e suspensas, com pouca ou nenhuma adaptação necessária.

cell culture media icon GMP manufacturing

Gibco cell culture products are manufactured in facilities that are compliant with current good manufacturing practices (GMP) for medical devices and adheres to a robust quality management system.

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We are committed to delivering products that serve the research needs of our customers, while striving to develop them in a way that minimizes our use of natural resources and our impact on the environment.

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