四部通则 

电雾式检测器

2020 版《中国药典》四部0512 高效液相色谱法的征求意见稿中，首次添加了电雾式检测器CAD 的相关表述，并指出其对所有物质均有响应。 CAD 是一种新型的、质量型通用检测器；能够检测任何非挥发性和半挥发性物质； 既不需要发色团，也不需要离子化。相较传统物理型检测器，其线性宽一个数量级，而灵敏度达十倍以上，同时具有更好的响应一致性。

CAD 原理

与传统紫外检测器的区别

药物分子的结构骨架决定其物理光学性质， 不同药物化合物分子千差万别，其性质也会 有所不同，要准确分析则需要采取不同的方 法。如传统的紫外检测器，只能鉴定有紫外 吸收的化合物。而CAD 作为一种全新的质量 型检测器，对所有非/ 半挥发性化合物均有 相应。

0.1mg/mL 吲哚洛尔、普萘洛尔、维拉帕米- 酮洛芬和特非那定混合CAD 检测器可以提供紫外检测器不能提供的信息

与传统质量检测器的区别

与传统的质量检测器相比，更好的响应一致性、更高的灵敏度和更宽的线性范围。 以ELSD 为例：原理上，CAD 检测干燥气溶胶表面带电荷数，与化合物结构无关；而ELSD 蒸发光散射检测器检测干燥气溶 胶对光的散射，与化合物结构相关，ELSD 信号对于颗粒直径的依赖性，使得其更难获得高灵敏度，并具有更复杂的响应曲线。

CAD 检测限可达1ng/μL，ELSD 的检测限仅为10 ng/μL

特色应用1：中药指纹图谱

通过黄芪配方颗粒紫外检测与CAD 检测图谱对比可知，CAD 检测可以提供常规检测方式所不能提供的信息。
就中药指纹图谱而言，使用CAD 检测器可以检测到更多种类的化合物，不但可以做到一测多评，还可做到一测全评。

黄芪配方颗粒紫外检测图谱（上图）与CAD 检测图谱（下图）
黄芪配方颗粒指纹图谱—与UV 互为补充，兼顾多类化合物

特色应用2：吐温

CAD 检测器尤其适用于检测那些无紫外吸收的化合物，以蛋白药物注射液中吐温20 的测定为例，HPLC-CAD 的方法，只需 要半小时，无需衍生，前处理过滤即可，也无需使用有毒试剂，关键是方法灵敏度高，定量限可以检测到10 ppm，远低于过 ELSD/ 荧光/ 衍生后UV 分光法。

赛默飞特异性生物类药物的辅料吐温监测方案

特色应用3：接轨国际标准

 

二维液相色谱方法

2020 版《中国药典》四部0512 高效液相色谱法的征求意见稿中，添加了对于多维色谱技术的相关表述。

多维色谱又称为色谱/ 色谱联用技术，是采用匹配的接口将不同分离性能或 特点的色谱连接起来，第一级色谱中未分离开或需要分离富集的组分由接口转移到第二级色谱中， 第二级色谱仍需进一步分离或分离富集的组分，也可以继续通 过接口转移到第三级色谱中。由于二维色谱基本可以满足对绝大多数难分离混合物样品 的分离或富集要求，所以一般的色谱/ 色谱联用都是二级，即二维色谱。

二维色谱技术主要分为: 中心切割式二维色谱和全二维色谱，其具有更大的理论峰容量，能够更好地解决药企的药物分离检测需求。

方法转移

2020 版《中国药典》征求意见稿中，明确提出色谱参数调整的相关原则，相比2015 版药典，细化方法调整幅度，与国际接轨，可操作性更强。

品种正文项下规定的色谱条件（参数）， 除填充剂种类、流动相组分、检测器类型不得改变外，其余如色谱柱内径与长度、填充剂粒径、流动相流速、流动相组分比例、柱温、进样量、检测器灵敏度等，均可适当改变调整。

简化方法转移，加快实验进程

当分析实验室需要维持现有方法又要提高实验室生产率时，Vanquish Core HPLC 系统通过可调节的梯度延迟体积，从而匹配分析物保留时间和色谱图，轻松实现HPLC 的方法转移。

Thermo Scientific™ Accucore 系列色谱柱 —— 方法转移简单高效，快到飞起

  • 卓越的表面多孔增强核技术，可实现低反压下的高分离度和快速分析。
  • 4 μm，2. 6 μm 和4 μm 三种粒径可选。
  • 耐用的 2.6 μm 实心核颗粒可以确保高效并同时兼容 HPLC 和 UHPLC。
  • 出色的重现性和更长的色谱柱使用寿命。

人参皂苷测定 —— 100min → 35min

色谱柱：Hypersil Gold C18（4.6×250 mm, 5 μm）
流动相：A- 乙腈；B- 水
梯度洗脱：完全参照15 版药典
人参皂苷Rg1 和Re 基线分离，一针分析100 min

色谱柱：Accucore C18（4.6×150 mm, 2.6 μm）
流动相：A- 乙腈；B- 水
梯度洗脱：在20 版药典规定方法转移范围内调整
人参皂苷Rg1 和Re 分离度2.92，完全满足药典要求，一针分析35 min

质谱检测器

新版药典征求意见稿中，新增了测定分析部分对于质谱检测的描述。明确了可以利用质谱检测器提供的色谱峰分子质量和结构 的信息进行定性分析，可获得比仅利用保留时间或增加光谱相似性进行定性分析更多的、更可靠信息，不仅可用于已知物的定 性分析，还可提供未知化合物的结构信息。 质谱检测器的引入，强化了2020 版药典向国际接轨的先进性，也为制药企业提供了一种更准确、更灵敏的定性选择。

ISQ EC/EM 单四极杆质谱检测器

 

更高灵敏度助力定性分析

紫外检测器和单四极杆质谱检测器的灵敏度比较：

Tenofovir（替诺韦福）和Adenine（腺嘌呤）为例：

相比单四极杆质谱，常规UV 检测器的灵敏度更低，且不能够得到结构信息。使用质谱检测器可以达到pg 级，且得到质量数测定，从而进行更准确的定性分析。

电雾式检测器

电雾式检测器

2020 版《中国药典》四部0512 高效液相色谱法的征求意见稿中，首次添加了电雾式检测器CAD 的相关表述，并指出其对所有物质均有响应。 CAD 是一种新型的、质量型通用检测器；能够检测任何非挥发性和半挥发性物质； 既不需要发色团，也不需要离子化。相较传统物理型检测器，其线性宽一个数量级，而灵敏度达十倍以上，同时具有更好的响应一致性。

CAD 原理

与传统紫外检测器的区别

药物分子的结构骨架决定其物理光学性质， 不同药物化合物分子千差万别，其性质也会 有所不同，要准确分析则需要采取不同的方 法。如传统的紫外检测器，只能鉴定有紫外 吸收的化合物。而CAD 作为一种全新的质量 型检测器，对所有非/ 半挥发性化合物均有 相应。

0.1mg/mL 吲哚洛尔、普萘洛尔、维拉帕米- 酮洛芬和特非那定混合CAD 检测器可以提供紫外检测器不能提供的信息

与传统质量检测器的区别

与传统的质量检测器相比，更好的响应一致性、更高的灵敏度和更宽的线性范围。 以ELSD 为例：原理上，CAD 检测干燥气溶胶表面带电荷数，与化合物结构无关；而ELSD 蒸发光散射检测器检测干燥气溶 胶对光的散射，与化合物结构相关，ELSD 信号对于颗粒直径的依赖性，使得其更难获得高灵敏度，并具有更复杂的响应曲线。

CAD 检测限可达1ng/μL，ELSD 的检测限仅为10 ng/μL

特色应用1：中药指纹图谱

通过黄芪配方颗粒紫外检测与CAD 检测图谱对比可知，CAD 检测可以提供常规检测方式所不能提供的信息。
就中药指纹图谱而言，使用CAD 检测器可以检测到更多种类的化合物，不但可以做到一测多评，还可做到一测全评。

黄芪配方颗粒紫外检测图谱（上图）与CAD 检测图谱（下图）
黄芪配方颗粒指纹图谱—与UV 互为补充，兼顾多类化合物

特色应用2：吐温

CAD 检测器尤其适用于检测那些无紫外吸收的化合物，以蛋白药物注射液中吐温20 的测定为例，HPLC-CAD 的方法，只需 要半小时，无需衍生，前处理过滤即可，也无需使用有毒试剂，关键是方法灵敏度高，定量限可以检测到10 ppm，远低于过 ELSD/ 荧光/ 衍生后UV 分光法。

赛默飞特异性生物类药物的辅料吐温监测方案

特色应用3：接轨国际标准

 

二维液相色谱方法

二维液相色谱方法

2020 版《中国药典》四部0512 高效液相色谱法的征求意见稿中，添加了对于多维色谱技术的相关表述。

多维色谱又称为色谱/ 色谱联用技术，是采用匹配的接口将不同分离性能或 特点的色谱连接起来，第一级色谱中未分离开或需要分离富集的组分由接口转移到第二级色谱中， 第二级色谱仍需进一步分离或分离富集的组分，也可以继续通 过接口转移到第三级色谱中。由于二维色谱基本可以满足对绝大多数难分离混合物样品 的分离或富集要求，所以一般的色谱/ 色谱联用都是二级，即二维色谱。

二维色谱技术主要分为: 中心切割式二维色谱和全二维色谱，其具有更大的理论峰容量，能够更好地解决药企的药物分离检测需求。

方法转移

方法转移

2020 版《中国药典》征求意见稿中，明确提出色谱参数调整的相关原则，相比2015 版药典，细化方法调整幅度，与国际接轨，可操作性更强。

品种正文项下规定的色谱条件（参数）， 除填充剂种类、流动相组分、检测器类型不得改变外，其余如色谱柱内径与长度、填充剂粒径、流动相流速、流动相组分比例、柱温、进样量、检测器灵敏度等，均可适当改变调整。

简化方法转移，加快实验进程

当分析实验室需要维持现有方法又要提高实验室生产率时，Vanquish Core HPLC 系统通过可调节的梯度延迟体积，从而匹配分析物保留时间和色谱图，轻松实现HPLC 的方法转移。

Thermo Scientific™ Accucore 系列色谱柱 —— 方法转移简单高效，快到飞起

  • 卓越的表面多孔增强核技术，可实现低反压下的高分离度和快速分析。
  • 4 μm，2. 6 μm 和4 μm 三种粒径可选。
  • 耐用的 2.6 μm 实心核颗粒可以确保高效并同时兼容 HPLC 和 UHPLC。
  • 出色的重现性和更长的色谱柱使用寿命。

人参皂苷测定 —— 100min → 35min

色谱柱：Hypersil Gold C18（4.6×250 mm, 5 μm）
流动相：A- 乙腈；B- 水
梯度洗脱：完全参照15 版药典
人参皂苷Rg1 和Re 基线分离，一针分析100 min

色谱柱：Accucore C18（4.6×150 mm, 2.6 μm）
流动相：A- 乙腈；B- 水
梯度洗脱：在20 版药典规定方法转移范围内调整
人参皂苷Rg1 和Re 分离度2.92，完全满足药典要求，一针分析35 min

质谱检测器

质谱检测器

新版药典征求意见稿中，新增了测定分析部分对于质谱检测的描述。明确了可以利用质谱检测器提供的色谱峰分子质量和结构 的信息进行定性分析，可获得比仅利用保留时间或增加光谱相似性进行定性分析更多的、更可靠信息，不仅可用于已知物的定 性分析，还可提供未知化合物的结构信息。 质谱检测器的引入，强化了2020 版药典向国际接轨的先进性，也为制药企业提供了一种更准确、更灵敏的定性选择。

ISQ EC/EM 单四极杆质谱检测器

 

更高灵敏度助力定性分析

紫外检测器和单四极杆质谱检测器的灵敏度比较：

Tenofovir（替诺韦福）和Adenine（腺嘌呤）为例：

相比单四极杆质谱，常规UV 检测器的灵敏度更低，且不能够得到结构信息。使用质谱检测器可以达到pg 级，且得到质量数测定，从而进行更准确的定性分析。