Dynabeads® kilobaseBINDER™ 试剂盒专为固定长 (>2 kb) 双链 DNA 分子而设计。将 PCR 产物固定到链霉亲和素偶联的 Dynabeads® 上的传统方法表明,DNA 的固定量取决于DNA片段大小。当DNA片段大小超过 2 kb 时,由于空间位阻,结合效率显著降低( 图1 )。kilobaseBINDER™ 试剂盒的结合溶液中含有一种已获得专利的固定生物素化激活剂,它能够显著提高长生物素化 DNA 分子的结合效率。

Dynabeads kilobasedBINDER 试剂盒的优势

  • 提高与长 (>2 kb) 生物素化 dsDNA 片段的结合能力
  • 从细胞质中快速、高效、轻松地纯化核酸
  • 数分钟内完成染色质分离
链霉亲和素偶联生物试剂盒

图 1. B&W 缓冲液(红色)是推荐与链霉亲和素偶联 Dynabeads® 配合使用的标准结合和洗涤缓冲液。专门设计的结合溶液(绿色)可显著提高结合能力。

DNA 涂层 Dynabeads(红色)组装有丝分裂纺锤体(绿色)

图 2. DNA 包被的 Dynabeads®(红色)可在非洲爪蟾卵提取物中组装出有丝分裂纺锤体(绿色),其与正常分裂细胞中的纺锤体无异 (1)。 每毫克 Dynabeads®对8kb 生物素化 DNA 片段的结合能力通常为 20 µg (3.8 pmol)。由德国海德堡 EMBL 的 R. Heald、E Karsenti 和 A. Hyman 提供。

细胞生物学的多种创新应用都采用了这种方法,包括

  • 模拟染色体的染色质珠,用于研究微管自行融入到双极纺锤体中(参考文献1和图2
  • 用于研究体外细胞核输出RNA的合成细胞核 (2)
  • 重建细胞核沿微管的运动,并在体外研究这种运动的分子基础 (3)
  • 使用限制性内切酶测定和 DNase 足迹法对重建的染色质 DNA 片段上的糖皮质激素受体结合位点进行体外分析 (4)
  • 非洲爪蟾和果蝇 DNA 结合蛋白的募集分析 (5, 6)

部分参考文献

  • Heald R et al (1996) Nature.382:420-425
  • Arts GJ et al (1997) Biol.Chem.Hoppe Seyler.378:641-649
  • Reinsch S et al (1997) Curr.Biol.7:211-214
  • Fletcher TM et al (2000) Mol.Cell.Biol.20(17):6466-6475
  • Edwards MC et al (2002) J. Biol.Chem.277(36):33049-33057
  • Ikeda K et al (2002) Mol.Cell.Biol.22(19):6759-6766

仅供科研使用,不可用于诊断目的。