단백질 및 전하 변형체 특성 분석을 위한 ProPac LC 컬럼

ProPac LC Columns for Protein and Charge Variant Characterization

단백질, 단클론 항체, 바이오시밀러 및 전하 변형체에 대한 초고분해능

pI 3-10 및 분자량이 10,000 이상인 단백질 및 당단백질(glycoprotein)의 초고분해능 및 고효율 분리를 달성하십시오. Thermo Scientific ProPac Protein LC 컬럼은 광범위한 pH, 온도 및 이동상(mobile phase) 구성에서 탁월한 재현성과 내구성을 제공하여 오랫동안 명성을 유지하고 있습니다.

ProPac 컬럼은 Thermo Scientific MAbPac 및Acclaim SEC 300 컬럼과 함께 바이오제약 분리 분야의 과제를 해결하기 위한 당사의 광범위한 포트폴리오의 한 부분을 차지하고 있습니다.

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ProPac 이온 교환 컬럼

음이온, 양이온 교환 컬럼 중에서 어느 것이 필요한지 확신이 없습니까?

분리는 컬럼의 작용기와 단백질 또는 당단백질의 접근 가능한 표면 전하를 기반으로 합니다. 음이온, 양이온 교환 컬럼 중에서 어느 것이 필요한지 확신이 없습니까? 단백질의 pI는 사용할 컬럼을 결정하는데 도움을 줄 수 있습니다.

단백질 pI가 <6 인 경우, 음이온 교환 컬럼으로 시작합니다. 최상의 분해능을 제공하는 SAX 및 WAX 옵션을 모두 사용해 보아야 할 수도 있습니다.
pI가 >6 인 경우, 양이온 교환 컬럼으로 시작합니다. ProPac Elite는 염도 기울기(salt gradient) 뿐만 아니라 pH 기울기도 사용할 수 있으며, 초고 분해능, 속도 및 효율을 제공하는 최신의 혁신적인 제품입니다. 지금 분석법(method)을 개발하려는 단계에 있다면 이 컬럼으로 시작하는 것을 고려해 보십시오.

ProPac LC Columns for Protein and Charge Variant Characterization Decision Flowchart

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유형별 권장 이온 교환 컬럼
컬럼 유형	강음이온 교환(SAX) 컬럼	약음이온 교환(WAX) 컬럼	약양이온 교환(WCX) 컬럼		강양이온 교환(SCX) 컬럼
컬럼	ProPac SAX-10	ProPac WAX-10	ProPac Elite WCX 5μm	ProPac WCX-10	MAbPac SCX
작용기	4급 암모늄(Quaternary ammonium)	3급 아민(Tertiary amine)	카르복실산(Carboxylic acid)		술폰산(Sulfonic acid)
시료 pI	일반적으로 단백질 pI이 < 6인 경우		일반적으로 단백질 pI이 > 6인 경우
참고			WCX-10 컬럼 기반 초고분해능 더 빠르고 효율적이며 재현성이 높음	오랫동안 선택되어온 최적 표준 컬럼	강양이온 교환 컬럼은 약양이온 교환 컬럼에 대체 선택성 제공
기울기(gradient)	염도 기울기 사용	WAX가 SAX보다 상(phase) 완충 작용을 더 많이 함	염도(salt) 또는 pH 기울기 사용*	염도 기울기 사용	염도 또는 pH 기울기 사용

* 당사의 CX-1 pH 기울기 버퍼(Buffer) 사용

ProPac 이온 교환 컬럼의 혁신

바이오제약 산업에서 단백질 특성 분석을 위한 최적의 표준

Illustration: ProPac column nonporous particles covered by a hydrophilic polymer with grafted ion exchange functionality (strands).

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아미노산 하나의 차이밖에 나지 않는 변형체를 분리합니다.
소수성 상호반응을 제거하여 매우 효율적인 피크를 만듭니다.
비다공성 5 또는 10μm 입자는 55% 디비닐벤젠(DVB) 폴리머 기질과 가교 결합된(cross-linked) 용매-호환성의 에틸비닐벤젠입니다.
레진(resin)은 표면과 바이오폴리머(biopolymer) 사이의 비특이적 상호작용을 최소화하기 위해 친수성이 강한 중성 폴리머로 둘러싸여 있습니다.
콘트롤된 폴리머 사슬이 친수성 층(layer)에 접합되어 이온 교환 작용성을 가지게 됩니다. 이때 이온 교환 작용성 폴리머는 음이온 교환기 또는 양이온 교환기를 포함하여 선택성과 재현가능한 용량을 부여합니다.
다른 선택성(selectivity)을 가진 다양한 유형의 레진으로 유사한 단백질의 분리를 최대화하는 유연성을 제공합니다.

용도

단클론 항체 및 기타 단백질의 특성 분석 및 품질 관리 평가
염기서열 변형체, 절단 변형체, 인산화 변형체, 시알산화 변형체, 탈아미드화 변형체 및 기타 변형체 등 단백질 변형체 분리를 위한 매우 높은 분해능과 효율

ProPac 및 MAbPac hydrophobic interaction chromatography(HIC) 컬럼

번역후 변형(PTM)이 발생하는 경우가 많으므로 여러 개의 컬럼을 사용하여 모든 구조적 변형체 및 변이를 탐지, 특성 분석, 정량하고, 제품 안정성을 모니터링하는 것이 필요합니다.

소수성(hydrophonicity)의 정도에 따라 단백질, 펩타이드 및 기타 바이오분자를 분리합니다.

HIC 컬럼은 비변성 조건에서 소수성이 증가하는 순서로 단백질 및 mAb 분자를 분리합니다. 분석물질(analytes)은 염 농도가 높은 상태에서 소수성이 약한 고정상에 결합하고 염 농도가 감소함에 따라 컬럼으로부터 용리됩니다.

비변성(Nondenaturing)

역상 액체 크로마토그래피와 달리, HIC는 일반적으로 단백질의 생물학적 활성을 보존합니다. 따라서, 결합 및 세포-기반의 역가 어세이(cell-based potency assay) 같은 다운스트림 기능 분석에 유용합니다.

ProPac HIC-10

복합 혼합물을 포함한 단백질/펩타이드 분리에 이상적임
비변성 조건으로 생물학적 활성 유지
탁월한 분해능과 높은 효율
고용량 컬럼
유기 용매와 호환되며 소수성이 매우 높은 단백질의 분리에 사용가능
광범위한 응용 분야

Thermo Scientific MAbPac HIC 컬럼을 살펴보십시오.

MAbPac HIC-10 LC 컬럼	MAbPac HIC-20 LC 컬럼	MAbPac HIC-Butyl LC 컬럼
고순도, 구형, 넓은 공극(1,000Å), 5μm 실리카 입자 특허받은 알킬 아미드기(alkyl amide group)로 작용기화 첨단의 표면 결합 기술 탁월한 화학적 안정성, 높은 효율 및 mAb에 최적화된 고유의 선택성 다른 HIC 상(phase)과 다름	고분해능 실리카 기반 ProPac HIC-10 컬럼 기반 mAbs 및 산화 mAb 변이체 등의 mAb 변이체의 탁월한 분리를 위한 고유의 화학 기술 유기 용매 및 수성(aqueous) 이동상 둘다와 호환 가능 견고한 컬럼 안정성	친수성, 비다공성 5μm 폴리머 입자 부틸기(butyl group)로 작용기화 고분해능 분리 및 바이오적합성을 위해 최적화된 부틸기 밀도

ProPac 및 MAbPac biopharma HPLC 컬럼 정보

생명공학 및 바이오제약 산업은 단백질 및 단클론 항체(mAb) 치료제 개발을 위한 광범위한 개발 파이프 라인을 보유하고 있습니다. 우리는 mAb가 안전성, 효능 및 안정성 프로파일을 변화시킬 수 있는 많은 위치-특이적 변이와 더불어 매우 복잡한 구조를 가지고 있음을 알고 있습니다. 이러한 잠재적인 번역후 변형(PTM) 가능성 때문에 구조 변형체 및 변이를 탐지, 특성 분석, 정량하고, 제품 안정성을 모니터링하는 것이 필수적입니다.

규제 기관에 안전성, 효능 및 안정성을 입증하기 위해, mAb 개발 및 생산 과정을 위한 혁신적이고 효율적인 분석 도구를 개발하고 제공하는 것이 우리의 할 일이라고 생각합니다. mAb 및 기타 단백질 바이오치료제의 특성 분석을 위한 필수 도구로서 Thermo Scientific HPLC 및 LC/MS 기기 및 HPLC 컬럼을 살펴보십시오. 이 제품들은 고객의 과제를 해결할 수 있도록 설계되었습니다.

mAbs, mAb 변형체 및 기타 단백질을 위한 Thermo Scientific BioLC 컬럼

ProPac 이온 교환 컬럼은 단백질 변형체 분리를 위한 매우 높은 분해능과 분리 효율을 제공합니다. 이 컬럼은 하전된 잔기가 하나만 다른 아이소형(isoform)도 분리할 수 있습니다.
단클론 항체 분리용으로 특별히 고안된 MAbPac 컬럼은 ProPac 컬럼을 보완합니다.

분석	설명	컬럼 및 버퍼(buffer)
전하 변형체 분석	라이신 절단(lysine truncation), 탈아미드화(deamidation) 및 아실화(acylation)를 비롯한 루틴(routine) 전하 변형체 프로파일링/스크리닝	CX-1 pH 기울기 버퍼 키트 ProPac Elite WCX MAbPac SCX-10
메티오닌 및 트립토판 산화	메티오닌 및 트립토판 산화에 대한 표적 분석	ProPac HIC-10 MAbPac HIC-20 MAbPac HIC-10
MS를 이용한 항체 약물 콘주게이트(ADC) 분석	ADC DAR 분석/약물 대 항체 비율과 원형(intact) 질량	MAbPac HIC Butyl MAbPac RP
원형 mAb 및 절편(fragment) 분석	경사슬(LC) 및 중사슬(HC) 분석 절편(Fab 및 Fc) 분석 scFc 및 F(ab’)2 분석	ProPac Elite WCX MAbPac RP MAbPac SEC-1

ProPac 이온 교환 컬럼