In Situ Hybridization (ISH)

In situ 부합법(ISH)은 고정 조직과 세포 내에서 특정 핵산 표적을 찾아내기 위한 강력한 기법으로서 이를 통해 유전자 발현 및 유전자좌에 대한 시간 및 공간 정보를 얻을 수 있습니다. ISH의 기본 워크플로우는 블롯(blot) 부합법과 유사(핵산 프로브가 특정 표적에 합성, 라벨링, 정제 및 증착됨)하지만 조직 내 결과 시각화에 의해 더 많은 양의 정보를 얻을 수 있다는 차이가 있습니다. 

오늘날 In situ RNA 및 DNA 표적 시각화에는 두 가지 기본 방법인 형광(FISH) 및 발색(CISH) 검출이 있습니다. 각 검출 방법의 고유한 특징(아래 표 참조)은 다른 응용 분야에서 FISH 및 CISH를 유용하게 만듭니다. 이 두 방법에서 모두 시료와 부합되어 라벨링된 표적 특이적 프로브를 사용하지만 각 방법 별로 시료 시각화에는 다른 기기를 사용합니다. 아래에서는 각 방법의 차이와 장점에 대해 요약해서 설명합니다.

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In situ 부합법(Hybridization)의 특징

기법기기/시각화 방법주된 장점주된 애플리케이션
CISH명시야 현미경 검사CISH 신호와 조직 형태학을 동시에 볼 수 있음분자 병리학 진단
DNA-FISH형광 현미경 검사복합 분석 가능: 동일한 샘플에서 다수의 표적 시각화유전자 발현, 복제수 및 위치; 돌연변이 분석
RNA-FISH형광 현미경 검사, HCS 및 유세포분석복합 분석 가능: 동일한 샘플에서 다수의 표적 시각화유전자 발현, RNA의 시간 및 공간적 위치

발색 in situ 부합법(CISH)

her2-cish

발색 in situ 부합법(CISH)은 조직학 실험실에 이미 구비된 방법을 사용하여 조직 형태학적 컨텍스트로 유전자 정보를 얻을 수 있도록 합니다. 당사는 CISH DNA 프로브와 CISH 분석용 핵심 시약을 제공합니다.

형광 in situ 부합법(FISH)

형광 In situ 부합법(FISH)

복합 분석 형광 in situ 부합법(FISH)을 통해 다수의 표적에 대한 동시 어세이를 수행하고 단일 검체 내의 동시 로컬라이제이션(co-localization)을 시각화합니다. 서로 다른 각각의 부합법 프로브에 대해 스펙트럼이 다른 형광단 라벨을 사용하는 경우 이 접근법은 다색의 시각적 디스플레이에서 단일 검체에 나타나는 몇 가지 유전 요소 또는 여러 유전자 발현을 해결할 수 있는 능력을 제공합니다.

분기형(branched) DNA 신호 증폭을 사용한 RNA FISH

분기형(branched) DNA 신호 증폭

Invitrogen ViewRNA 및 PrimeFlow 어세이는 특정 신호 검출을 위해 분기형 DNA 신호 증폭(bDNA)을 사용하는 직접 형광 RNA ISH 방법입니다. 독립적이지만 호환 가능한 신호 증폭 시스템을 사용하면 RNA 표적의 복합 분석도 가능합니다. 형광 RNA in situ 부합법(hybridization) 어세이는 시료 전처리, 표적 부합, 신호 증폭, 검출의 4가지 주요 단계로 구성됩니다. 이 방법을 통해 더 높은 특이도, 더 낮은 백그라운드 및 더 높은 신호 대 잡음비를 얻을 수 있습니다.

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For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.