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형광 마이크로플레이트 어세이다양한 생물학적 애플리케이션에서 키네틱 또는 엔드포인트 어세이를 위한 기질, 버퍼 및 보정 표준물질. |
형광 기반 어세이의 감도와 마이크로플레이트 형식의 편리함의 결합으로 연구자는 고처리량 분석을 사용하여 신속한 정량 분석을 달성할 수 있습니다. 마이크로플레이트 웰 내에서 전 세포(whole cell), 세포 용해물(cell lysate) 또는 정제 효소 준비에 대한 형광 신호를 생성할 수 있으며, 이어서 세포 이미징 없이 웰에서 형광 강도를 측정해 정량할 수 있습니다.
세포 생존율 및 증식 어세이에서 효소 활성 및 단백질 정량 어세이에 이르기까지, 다양한 형광 마이크로플레이트 어세이를 이용할 수 있습니다. 이 도구는 광범위한 생물학적 애플리케이션에 걸쳐 키네틱 및 엔드포인트 프로토콜에 대한 정확하고 신뢰할 수 있는 측정을 제공합니다.
형광 마이크로플레이트 애플리케이션
Amplex Red 기질은 글루코스, 갈락토스, 콜레스테롤, 글루탐산, 잔틴(또는 하이포잔틴), 요산, 콜린, 아세틸콜린 및 과산화수소와 같은 다양한 분석물을 검출하기 위한 다양한 대사, 신경생물학 및 염증 어세이에서 사용됩니다.
차세대 염기서열분석, 트랜스펙션, real-time PCR, 마이크로어레이 실험, RT-PCR, 차등 표시 PCR, 노던 블랏, S1 뉴클레아제 어세이, RNase 보호 어세이 및 cDNA 라이브러리와 같은 다운스트림 응용 분야를 위한 dsDNA, ssDNA 및 RNA를 정량하기 위한 어세이.
시료 내 성분에 특이적인 정량 키트. 예를 들어 CBQCA는 지질단백질 또는 지질 단백질 혼합물과 호환되며, NanoOrange는 환원제와 호환되고, Quant-iT assay는 계면활성제가 아닌 염 및 용매와 호환됩니다
일반화된 산화 스트레스, 산화질소(nitric oxide, NO), 환원된 글루타치온(glutathione, GSH) 및 미엘로퍼옥시다아제(myeloperoxidase, MPO)와 같은 다양한 반응성 산소 종(reactive oxygen species, ROS)의 검출
Expertly detect fluorescence with Thermo Scientific plate readers
High-sensitivity fluorescence detection for 6-1,536 samples can be quickly performed on the Varioskan ALF or Varioskan LUX Multimode Microplate Reader using Invitrogen reagents to enable optimal detection. Take advantage of automatic dynamic range selection to get optimal gain settings for each individual well and automation capabilities for even higher throughput.
형광 기반 마이크로플레이트 어세이 최적화 가이드라인
- 최적의 형광 여기 및 방출 필터 또는 파장을 선택하십시오. 여기 및 방출 파장 데이터는 제품 매뉴얼 및/또는 빠른 검토 카드에 나와 있습니다. 검출 시약과 기기의 스펙트럼이 불일치할 경우 많은 신호가 손실될 수 있습니다.
- 기기의 감도 설정을 조정하여 형광 신호를 극대화하십시오. 최대의 선형 동적 범위를 얻으려면 최저 및 최고 예상 검사 값 모두에 적합한 가장 높은 이득 또는 감도 설정을 선택하십시오.
- 균일한 검사 부피를 사용하십시오. 검사 부피가 조금만 달라져도 신호가 크게 차이 날 수 있습니다. 안정적인 측정값을 얻으려면 항상 기기 제조업체에서 권장하는 최소 부피 이상을 사용하십시오.
- 시료를 완전히 혼합하십시오. 제대로 혼합하지 않으면 응집, 침전, 반응 속도 변이, 분석물 또는 검출 시약의 웰 간 농도 차이를 가져올 수 있습니다.
- 기포가 생기지 않도록 주의하십시오. 검사 수용액에 기포가 발생하면 광산란 및 잘못된 신호를 초래할 수 있습니다. 마이크로플레이트를 잠깐만 원심분리하고 분배 전에 수용액을 탈기하거나(살아있는 세포 어세이 제외) 피펫 팁으로 큰 기포를 터뜨리십시오.
- 반복 시료를 준비하십시오. 반복 시료를 분석하면 측정의 정밀도가 높아집니다.
- “edge effect”를 피하십시오. 적절한 스펙트럼의 형광단 수용액을 사용하면 마이크로플레이트의 모든 웰에서 얻은 형광 신호가 일관적인지 판단할 수 있습니다. 마이크로플레이트 가장자리를 따라 웰에서 신호 차이가 관찰된다면 적절한 보정 인자를 적용하거나 해당 웰을 사용하지 마십시오.
- 밝은 색상의 시료를 구분해 놓으십시오. 투명한 마이크로플레이트에서 강한 형광 시료는 인접한 웰에서 관찰되는 신호에 영향을 미칠 수 있습니다(웰 간 간섭 현상). 강한 형광 시료 옆의 웰을 비워두거나 형광 강도가 비슷한 시료를 인접 웰에 배치하십시오. 투명한 플레이트 대신 흰색 또는 검은색 벽면의 마이크로플레이트를 사용하십시오.
- 시료를 광표백하지 마십시오. 피치 못할 경우가 아니라면 시료를 재사용하지 마십시오. 형광 측정 중 일부 시약에서 심각한 광표백이 일어날 수 있으므로 표준물질을 재사용하지 마십시오.
- 검사 범위 내의 시료 농도를 사용하십시오. 알려지지 않은 시료의 경우 여러 가지 희석을 시도해 보십시오.
리소스
애플리케이션 노트
포스터
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.