RNA 추출

Ambion RNA extraction reagents and kit는 배양 세포 또는 조직 샘플, 식물, 세균 또는 포유류 세포로 시작하는지 여부에 관계없이 연구에 적합한 제품을 제공합니다. Ambion 브랜드에는 신뢰할 수 있는 TRIzol ReagentPureLink purification kit와 같은 기존 Invitrogen 제품과 Cells-to-CT, MagMAX, RNAlater 키트 및 시약과 같은 최고의 Ambion 제품이 포함됩니다.

나에게 맞는 혈액 샘플 RNA 추출 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 액체 샘플에 최적화무핵 적혈구를 제거하는 특수 키트HTP 요구에 맞는 96 컬럼의 필터 플레이트 형태안정화된 혈액 샘플의 정제에 최적화된 HTP모든 크기의 RNA를 복구할 수 있는 HTP 형태(microRNA 포함)전혈에서 직접 높은 RNA 수율, WBC 분리 불필요
 TRIzol LS PureLink Total RNA Blood Kit PureLink Pro 96 total RNA Purification KitMagMAX for Stabilized Blood Tubes RNA Isolation Kit MagMAX mirVana Total RNA Isolation RiboPure Blood Kit
최고 판매품     
호환되는 안정화 시약 EDTA, 헤파린, 구연산, RNAlaterEDTA, 헤파린, 구연산EDTA, 헤파린, 구연산Tempus 또는 PaxGene 튜브EDTA 또는 구연산EDTA, 헤파린, 구연산, RNAlater
안정화 시약 포함     
RNAlater
분리 방법고순도 유기 추출(알코올 침전 필요)빠르고 편리한 실리카 컬럼플레이트 형태의 빠르고 편리한 실리카 컬럼마그네틱 비드를 사용하여 확장 가능하고 유연한 형태마그네틱 비드를 사용하여 확장 가능하고 유연한 형태최고 순도 및 편리함, 유기 추출 및 실리카 컬럼 포함(침전 불필요)
전처리 시간1시간20분 2시간에 12개 튜브1시간 미만에 96개 샘플30분
고처리량 적합성   

혈액 작업에 대한 자세한 내용은 기술 자료를 검토하십시오.

보충 프로토콜

TechNotes 자료

배양된 세포로부터 RNA를 정제하는 것은 전통적으로 종종 독성 유기 화학물질의 사용을 포함하는 매우 반복적이고 시간 및 노동 집약적인 절차였습니다. 당사의 RNA 전문가가 개발한 이 제품을 사용하면 몇 가지 기술 형태(유기 추출, 유리 섬유 컬럼, 마그네틱 비드 및 이들의 조합)를 사용하여 최대 수율, 순도 및 무결성의 RNA를 분리할 수 있습니다.

RNA를 먼저 분리하지 않고 배양된 세포 용해물을 분석 할 수도 있습니다. 훨씬 짧은 시간에 정제된 RNA의 결과와 동등하거나 더 나은 qPCR 결과를 얻을 수 있습니다. Cells-to-CTSingle Cell-to-CT 제품군과 같은 Invitrogen 제품은 놀라운 성능과 처리 상의 이점을 제공합니다.

나에게 맞는 배양 세포 RNA 분리 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 고순도 원형(intact) RNARNA를위한 빠르고 편리한 컬럼 기반 형태(> 200nt)96개의 샘플을 위한 빠르고 편리한 컬럼 기반 필터 플레이트 형태(Rna> 200 nt)제한된 샘플 주입으로 빠르고 편리한 컬럼 기반 방법(Rna> 200 nt)small RNA 종을 위한 빠르고 편리한 방법RNA 정제 없이 세포에서 qRT-PCR로 이어지는 완벽한 시스템
 TRIzol ReagentPureLink RNA Mini KitPureLink Pro 96 total RNA Purification KitPureLink RNA Micro Scale KitMirVana miRNA Isolation KitCells-to-CT 키트
최고 판매품  
전처리 시간1시간20분20분20분30분<10분
세포 용해 방법고순도 유기 추출(알코올 침전 필요)무독성 guanidine-isothio-cyanate lysis무독성 guanidine-isothio-cyanate lysis무독성 guanidine-isothio-cyanate llysis유기 추출 후 알코올 침전Cells-to-CT lysis
시작 물질의 양최대 1x107 세포5x106 ~ 1x108 세포5x106 ~ 1x108 세포최대 5x105 세포102-107 배양 세포10–100,000개 세포
애플리케이션모든 RNA 발현 방법qRT-PCR, NGSqRT-PCR, NGSqRT-PCR, NGSMicro RNA 분석qRT-PCR

RNA 보존 및 안정화

RNAlater 솔루션은 원형(intact) 동물 조직, 기관, 세포 및 세균에서 RNA 보존을 위해 널리 사용됩니다. 이는 RNA 분리를 위해 샘플을 즉시 처리하거나 나중에 처리하기 위해 액체 질소에서 샘플을 동결해야 할 필요성을 제거합니다.

기술 리소스

나에게 맞는 FFPE 샘플 RNA 추출 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기
 동일한 FFPE 절편에서 RNA 및 DNA의 저처리량 분리동일한 FFPE 절편에서 RNA 및 DNA의 확장 가능한 분리
  FFPE를 위한 RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation Kit MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit
전처리 시간4.5시간(16개 샘플에 대한 총 소요 시간)
수작업 2.5시간
4시간(96개 전처리를 위한 총 소요 시간)
수작업 1시간
최종 산물 추출총 RNA, microRNA, gDNA총 RNA, microRNA, gDNA
분리 방법컬럼 정제마그네틱 비드 정제
탈파라핀화 필요
자동화 가능(탈파라핀화 후) 
(KF Flex 및 Duo Prime 스크립트)
호환되는 FFPE 샘플 범위최대 4 x 20미크론 절편
(300 mm2 조직)
최대 2 x 20미크론 절편
(300 mm2 조직)
샘플 부피~50µL 정제 DNA
~50µL 정제 RNA
~50uL 정제 DNA
~50µL 정제 RNA
Ion AmpliSeq DNA 패널(예 Cancer Hotspot Panel v2)과 호환
Ion AmpliSeq RNA 패널(예: RNA 암 및 RNA 융합)과 호환

FFPE에서 RNA 분리가 왜 까다롭습니까?

FFPE 검체에서 RNA 품질을 회복하는 것은 상당히 어려울 수 있습니다. 고정 공정은 핵산과 단백질 사이의 가교 결합을 유발하고 염기에 모노메틸기를 첨가함으로써 RNA를 공유 변형시킵니다. 결과적으로, 분자는 단단하고 기계적 전단에 취약하며 가교 결합은 역전사를 위한 기질로서 RNA의 사용을 저해할 수 있습니다. 따라서 유전자 발현 분석을 위한 공급원으로서 FFPE 조직을 사용하기 위해서는 가교 결합된 매트릭스로부터 RNA 추출을 위한 신뢰할 수 있는 방법이 필요합니다.

FFPE로 어떻게 성공 가능성을 높일 수 있습니까?

FFPE 조직으로부터 분리된 RNA의 전체 품질 및 수율에 영향을 미칠 수 있는 많은 요소가 있습니다. 다음은 몇 가지 주요 요소를 해결하기 위한 권장 사항입니다.

  1. 업스트림 조직 조달 및 조직 검체 전처리—가능하면 조직은 외과적 절제 후 1시간 이내에 고정해야 합니다. 고정 공정을 완료하기 전에 RNA의 광범위한 분해가 발생할 수 있습니다. 최적의 고정 시간은 12-24시간이며 중성 완충 포르말린 또는 파라포름알데히드를 사용합니다. 고정된 조직은 포매 공정 전에 완전히 탈수해야 합니다.
  2. 블록 저장—가능하면 절단면이 없는 블록을 보관하면 대기 산소, 물 및 기타 환경적 요인(예: 광선 및 곰팡이, 곤충 등의 침입) 노출로 인한 지속적인 손상을 방지할 수 있습니다.
  3. RNA 분리에 사용되는 조직 유형, 크기 및 양—권장 조직 두께는 10–20 µm입니다. 사용되는 절편 수는 조직 유형(세포 밀도에 영향을 미침)과 표면적 (권장 크기: 50–300 mm2)에 따라 결정됩니다. 시작 물질이 과도하면 필터가 막혀 수율이 떨어질 수 있습니다.
  4. 조직 포매에 사용되는 과도한 양의 파라핀—가능하면 정제 프로토콜을 시작하기 전에 잉여 파라핀을 제거해야 합니다. 자일렌 기반 정제 방법의 경우, 완전한 탈파라핀화를 위해 실온에서 2개의 자일렌 처리가 충분히 이루어져야 합니다. 원하는 경우, 보다 엄격한 37–55°C 처리를 최대 30분간 수행할 수 있습니다. 자일렌 탈파라핀화 후 100% 에탄올을 완전히 제거하고 2개의 100 % 에탄올 세척 후에 펠릿을 건조시키는 것이 중요합니다. 마그네틱 비드 방법은 20 µm 절편으로 주입을 제한하는 파라핀을 처리하기 위해 새로운 화학 기술을 사용합니다.

MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit는 Invitrogen MagMAX magnetic particle를 사용하여 FFPE 샘플에서 총 RNA 및 DNA를 빠르고 효율적으로 자동 분리하도록 설계되었습니다. Invitrogen MagMAX FFPE NA kit는 공정 중 품질을 저하시키지 않으면서 더 빠른 워크플로우를 제공하고 독성이 적은 시약을 사용합니다. 이 키트는 동급 최고의 RecoverAll 필터 기반 시스템과 유사한 핵산 수율 및 순도를 제공합니다. MagMAX FFPE NA kit는 유사한 프로토콜을 사용하는 제품보다 성능이 우수하며, 더 길고 위험하며 처리량이 적은 프로토콜과 유사한 RNA 및 DNA 수율을 달성합니다.

RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation Kit 절차에서는 수작업 시간이 약 45분이며 RNA 분리를 하루 내에 쉽게 완료할 수 있습니다. FFPE 샘플은 자일렌 및 에탄올 세척을 통해 탈파라핀화합니다. 그런 다음 RNA 또는 DNA 회수에 맞는 배양 시간 동안 확실한 프로테아제 분해를 실시합니다. 핵산은 온-필터 뉴클레아제 처리를 포함하는 신속한 유리-필터 방법을 사용하여 정제되며 제공된 물 또는 저염 완충액으로 용리됩니다.

기술 리소스

TechNotes 자료

실험실 팁

실험 데이터

  • FFPE 환자 샘플에서 암 관련 mRNA Signature 식별: H. Lee Moffitt Cancer Center and Research Institute(Tampa, FL)의 Yeatman 실험실은 결장, 유방암 및 기타 암을 정의하는 유전자 발현 표지를 조사합니다.
  • Real-Time RT-PCR에 대한 LCM 염색 효과: Ambion LCM Staining Kit가 추출된 RNA의 수율이나 품질을 저하시키지 않으면서 포르말린 고정 및 파라핀 포매(FFPE) 조직에 성공적으로 사용될 수 있음을 보여주는 연구 결과가 설명됩니다.

애플리케이션 노트

제품 공고

나에게 맞는 식물 RNA 분리 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 까다로운 샘플에 적합(침엽수 조직 및 씨앗)신속하고 간편한 사용microRNA 및 small RNA의 효율적 회수신속하고 완전한 자동화
  식물 RNA 시약 PureLink RNA Mini Kit mirVana miRNA Isolation Kit MagMAX-96 Total RNA Isolation Kit
인기 판매품   
분리되는 RNA 유형large RNA 분자만 분리large RNA 분자만 분리Small & large RNA 분자large RNA 분자만 분리
전처리 시간60분<20분30분<45분
시작 물질의 양최대 1g<250 mg0.5 ~ 250mg최대 10mg
분리 방법고순도 유기 추출(알코올 침전 필요)빠르고 편리한 실리카 컬럼최고 순도 및 편리함, 유기 추출 및 실리카 컬럼 포함(침전 불필요)마그네틱 비드를 사용하여 확장 가능하고 유연한 형태
고처리량 적합성   
호환 제품 Ambion Plant RNA Isolation Aid
흔한 식물 오염 물질 제거
Ambion Plant RNA Isolation Aid
흔한 식물 오염 물질 제거
Ambion Plant RNA Isolation Aid
흔한 식물 오염 물질 제거

다당류 제거

식물 RNA 분리와 관련된 주요 문제 중 하나는 폴리페놀 화합물 및 다당류와 같이 문제가 있는 바이오분자의 존재입니다. Ambion Plant RNA Isolation Aid는 폴리페놀 및 다당류에 결합하는 고분자량 고분자인 폴리비닐피롤리돈과 추출 전 스핀 단계를 통해 이러한 오염 물질을 최소화합니다.

RNA 보존 및 안정화

RNAlater 솔루션은 원형(intact) 동물 조직, 기관, 세포 및 세균에서 RNA 보존을 위해 널리 사용됩니다. 이는 RNA 분리를 위해 샘플을 즉시 처리하거나 나중에 처리하기 위해 액체 질소에서 샘플을 동결해야 할 필요성을 최소화합니다.

기술 리소스

나에게 맞는 조직 RNA 추출 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 고순도 원형(intact) RNA를 위한 골드 스탠다드간단하고 신뢰할 수 있는 빠른 방법96개의 샘플을 위한 빠르고 편리한 컬럼 기반 필터 플레이트 형태(Rna> 200 nt)제한된 샘플 주입으로 빠르고 편리한 컬럼 기반 방법(Rna> 200 nt)small RNA 종을 위한 빠르고 편리한 방법최고 순도의 TRIzol + 컬럼 정제, 침전 불필요모든 크기의 RNA를 복구할 수 있는 HTP 형태(microRNA 포함)
  TRIzol ReagentPureLink RNA Mini KitPureLink Pro 96 total RNA Purification KitPureLink RNA Micro Scale KitmirVana miRNA Isolation KitTRIzol Plus RNA Purification SystemMagMAX mirVana Total RNA Isolation
인기 판매품      
분리 방법 고순도 유기 추출(알코올 침전 필요)빠르고 편리한 실리카 컬럼필터 플레이트 형태의 빠르고 편리한 실리카 컬럼빠르고 편리한 마이크로 실리카 컬럼편리한 실리카 컬럼과 결합된 유기 추출최고 순도 및 편리함, 유기 추출 및 실리카 컬럼 포함(침전 불필요)마그네틱 비드를 사용하여 확장 가능하고 유연한 형태
전처리 시간 1시간20분20분20분30분1시간<1시간
시작 물질의 양최대 100 mg10 mg ~ 100 mg10 세포 ~ 10 mg최대 10 mg최대 250 mg 조직최대 100 mg최대 50 mg
고처리량 적합성     
전처리 크기100개 전처리50개 전처리96개 전처리50개 전처리96개 전처리50개 전처리96개 전처리

동물 조직에서 RNA 수율

RNA 함량은 조직, 세포 유형, 생리학적 상태 등에 따라 크게 다를 수 있습니다. 이 차트는 다양한 세포와 조직에서 RNA 수율을 추정하기 위한 일반적인 지침을 제공합니다.

1mg의 다양한 조직에서 일반적인 총 RNA 수율

표 1. 1mg의 다양한 조직에서 일반적인 총 RNA 수율.

RNA 보존 및 안정화

RNAlater 솔루션은 원형(intact) 동물 조직, 기관, 세포 및 세균에서 RNA 보존을 위해 널리 사용됩니다. 이는 RNA 분리를 위해 샘플을 즉시 처리하거나 나중에 처리하기 위해 액체 질소에서 샘플을 동결해야 할 필요성을 제거합니다.

기술 리소스

나에게 맞는 효모 RNA 추출 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 신속하고 완전한 자동화신속하고 간편한 사용발현 프로파일을 유지하면서 단단한 효모 세포벽에 맞도록 설계96개의 샘플을 위한 빠르고 편리한 컬럼 기반 필터 플레이트 형태(Rna> 200 nt)
 Platinum Taq MagMAX for Microarrays Total RNA Isolation Kit PureLink RNA Mini KitRiboPure-Yeast Kit PureLink Pro 96 total RNA Purification Kit
인기 판매품   
lysis를 위한 특수 비드 포함아니오아니오지르코니아 비드아니오
분리 방법최고 순도를 위한 확장 가능하고 유연한 형태, 유기 추출 및 마그네틱 비드 포함빠르고 편리한 실리카 컬럼최고 순도 및 편리함, 유기 추출 및 실리카 컬럼 포함96웰 필터 플레이트 형태의 빠르고 편리한 실리카 컬럼
전처리 시간<1시간20분90분(DNase 처리 포함)20분
시작 물질의 양 최대 5 x 106 세포최대 5 x 108 세포최대 3 x 108 세포신선한 log-phase 효모 세포 1.8 mL(OD660=0.6–0.8)
고처리량 적합성   
키트 크기96개 전처리50개 전처리50개 전처리96개 전처리

기술 리소스

진핵 세포와 달리 효모 및 많은 세균 균주는 파괴하기 어려운 세포벽에 의해 보호됩니다. 첫 번째 단계로 RNA 분리 절차 전에 효과적인 세포 용해(일반적으로 기계적 파괴 또는 효소 전처리를 통해)가 필요합니다.

Ambion RNA 전문가가 개발한 다양한 제품을 사용하면 세균과 효모에서 순수한 순수 RNA를 고수율로 분리할 수 있습니다.

나에게 맞는 세균 RNA 추출 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 lysis 절차 없음빠르고 간편함, 20분빠르고 편리한 실리카 컬럼 기반, 필터 플레이트 형태HTP, 45분lysis하기 어려운 그람 + 세균에 이상적
 TRIzol Max Bacterial RNA Isolation Kit w/TRIzol & Max Bacterial Enhancement Reagent PureLink RNA Mini Kit PureLink Pro 96 total RNA Purification KitMagMAX Total Nucleic Acid Isolation Kit RiboPure-Bacteria Kit
인기 판매품    
lysis를 위한 특수 비드 포함아니오아니오아니오지르코니아 비드지르코니아 비드
분리 방법고순도 유기 추출(알코올 침전 필요)빠르고 편리한 실리카 컬럼96웰 필터 플레이트 형태의 빠르고 편리한 실리카 컬럼마그네틱 비드를 사용하여 확장 가능하고 유연한 형태최고 순도 및 편리함, 유기 추출 및 실리카 컬럼 포함(침전 불필요)
전처리 시간1시간20분20분45분1시간
시작 물질의 양최대 1 x 108 세포최대 1 x 109 세포최대 1 x 109 세포최대 0.3 g의 고체 시료 또는 175 µl의 액체 시료최대 109 세포
고처리량 적합성   
키트 크기100개 전처리50개 전처리96개 전처리100개 전처리50개 전처리

기술 리소스

생물학적 샘플(동물, 곤충, 식물, 곰팡이, 세균) 및 환경 샘플(물, 공기, 음식)의 바이러스 분석시 테스트 중인 샘플의 바이러스 RNA 또는 DNA를 필요로 하는 분자 테스트 전략을 사용하는 경우가 점차 늘고 있습니다. 바이러스 RNA의 정제는 우수한 회수 및 검출 감도를 얻는데 있어 고유한 과제를 제기합니다. Ambion RNA 전문가는 여러 가지 형태 옵션으로 광범위한 샘플 유형에서 최대 바이러스 RNA 수율, 순도 및 무결성을 제공하도록 최적화된 RNA 정제 제품을 개발했습니다.

"PureLink Viral RNA/DNA Mini Kit의 고농축 바이러스 RNA는 바이러스 게놈에 대해 보다 민감하고 섬세한 다운스트림 분석을 위한 도구를 제공합니다."
Dongning Wang, PhD, Feng Gao 실험실, MD, Duke Human Vaccine Institute, Duke University

제품 사양

 가장 적합한 다운스트림 애플리케이션
제품형태Real-Time RT-PCR마이크로어레이 분석서열분석Northern Blot클로닝

총 RNA

PureLink Viral RNA⁄DNA Mini Kit카오트로픽염 기반 lysis, 실리카 필터   
RNAqueous Kit카오트로픽염 기반 lysis, 실리카 필터  
MagMAX AI⁄ND Viral RNA Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자   
MagMAX-96 AI⁄ND Viral RNA Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자, 96-웰 처리, 자동화 가능   

DNA/RNA

PureLink Pro 96 Viral RNA⁄DNA Purification Kit카오트로픽염 기반 lysis, 실리카 필터, 96-웰 처리, 자동화 가능    
MagMAX Total Nucleic Acid Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자, 96-웰 처리, 자동화 가능   
MagMAX-96 Viral RNA Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자, 96-웰 처리, 자동화 가능   
Dynabeads SILANE Viral NA카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 비드, 자동화 가능     
iPrep PureLink Virus Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자, 자동화 가능    
MagMAX Viral RNA Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자    
MagMAX-96 Viral RNA Isolation Kit(5 x 96 rxns)카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자, 96-웰 처리, 자동화 가능    

MicroRNA

mirVana miRNA Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 실리카 필터    
mirVana miRNA Isolation Kit(페놀 미포함 - 별도 구매해야 함)카오트로픽염 기반 lysis, 실리카 필터    
TRIzol LS ReagentTRIzol 시약에서 lysis, 원스텝 시약 

mRNA

Dynabeads mRNA DIRECT Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 비드   
Dynabeads mRNA DIRECT Micro Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 비드   
Resources
  • Protocol Videos—Videos to help you isolate nucleic acids using a variety of techniques.
  • DNA & RNA Selection Guide—Find the right purification products.
  • Videos—View our library of DNA & RNA purification and analysis videos.
  • Application Notes—Explore our application notes from scientists sharing data for isolation products

나에게 맞는 혈액 샘플 RNA 추출 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 액체 샘플에 최적화무핵 적혈구를 제거하는 특수 키트HTP 요구에 맞는 96 컬럼의 필터 플레이트 형태안정화된 혈액 샘플의 정제에 최적화된 HTP모든 크기의 RNA를 복구할 수 있는 HTP 형태(microRNA 포함)전혈에서 직접 높은 RNA 수율, WBC 분리 불필요
 TRIzol LS PureLink Total RNA Blood Kit PureLink Pro 96 total RNA Purification KitMagMAX for Stabilized Blood Tubes RNA Isolation Kit MagMAX mirVana Total RNA Isolation RiboPure Blood Kit
최고 판매품     
호환되는 안정화 시약 EDTA, 헤파린, 구연산, RNAlaterEDTA, 헤파린, 구연산EDTA, 헤파린, 구연산Tempus 또는 PaxGene 튜브EDTA 또는 구연산EDTA, 헤파린, 구연산, RNAlater
안정화 시약 포함     
RNAlater
분리 방법고순도 유기 추출(알코올 침전 필요)빠르고 편리한 실리카 컬럼플레이트 형태의 빠르고 편리한 실리카 컬럼마그네틱 비드를 사용하여 확장 가능하고 유연한 형태마그네틱 비드를 사용하여 확장 가능하고 유연한 형태최고 순도 및 편리함, 유기 추출 및 실리카 컬럼 포함(침전 불필요)
전처리 시간1시간20분 2시간에 12개 튜브1시간 미만에 96개 샘플30분
고처리량 적합성   

혈액 작업에 대한 자세한 내용은 기술 자료를 검토하십시오.

보충 프로토콜

TechNotes 자료

배양된 세포로부터 RNA를 정제하는 것은 전통적으로 종종 독성 유기 화학물질의 사용을 포함하는 매우 반복적이고 시간 및 노동 집약적인 절차였습니다. 당사의 RNA 전문가가 개발한 이 제품을 사용하면 몇 가지 기술 형태(유기 추출, 유리 섬유 컬럼, 마그네틱 비드 및 이들의 조합)를 사용하여 최대 수율, 순도 및 무결성의 RNA를 분리할 수 있습니다.

RNA를 먼저 분리하지 않고 배양된 세포 용해물을 분석 할 수도 있습니다. 훨씬 짧은 시간에 정제된 RNA의 결과와 동등하거나 더 나은 qPCR 결과를 얻을 수 있습니다. Cells-to-CTSingle Cell-to-CT 제품군과 같은 Invitrogen 제품은 놀라운 성능과 처리 상의 이점을 제공합니다.

나에게 맞는 배양 세포 RNA 분리 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 고순도 원형(intact) RNARNA를위한 빠르고 편리한 컬럼 기반 형태(> 200nt)96개의 샘플을 위한 빠르고 편리한 컬럼 기반 필터 플레이트 형태(Rna> 200 nt)제한된 샘플 주입으로 빠르고 편리한 컬럼 기반 방법(Rna> 200 nt)small RNA 종을 위한 빠르고 편리한 방법RNA 정제 없이 세포에서 qRT-PCR로 이어지는 완벽한 시스템
 TRIzol ReagentPureLink RNA Mini KitPureLink Pro 96 total RNA Purification KitPureLink RNA Micro Scale KitMirVana miRNA Isolation KitCells-to-CT 키트
최고 판매품  
전처리 시간1시간20분20분20분30분<10분
세포 용해 방법고순도 유기 추출(알코올 침전 필요)무독성 guanidine-isothio-cyanate lysis무독성 guanidine-isothio-cyanate lysis무독성 guanidine-isothio-cyanate llysis유기 추출 후 알코올 침전Cells-to-CT lysis
시작 물질의 양최대 1x107 세포5x106 ~ 1x108 세포5x106 ~ 1x108 세포최대 5x105 세포102-107 배양 세포10–100,000개 세포
애플리케이션모든 RNA 발현 방법qRT-PCR, NGSqRT-PCR, NGSqRT-PCR, NGSMicro RNA 분석qRT-PCR

RNA 보존 및 안정화

RNAlater 솔루션은 원형(intact) 동물 조직, 기관, 세포 및 세균에서 RNA 보존을 위해 널리 사용됩니다. 이는 RNA 분리를 위해 샘플을 즉시 처리하거나 나중에 처리하기 위해 액체 질소에서 샘플을 동결해야 할 필요성을 제거합니다.

기술 리소스

나에게 맞는 FFPE 샘플 RNA 추출 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기
 동일한 FFPE 절편에서 RNA 및 DNA의 저처리량 분리동일한 FFPE 절편에서 RNA 및 DNA의 확장 가능한 분리
  FFPE를 위한 RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation Kit MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit
전처리 시간4.5시간(16개 샘플에 대한 총 소요 시간)
수작업 2.5시간
4시간(96개 전처리를 위한 총 소요 시간)
수작업 1시간
최종 산물 추출총 RNA, microRNA, gDNA총 RNA, microRNA, gDNA
분리 방법컬럼 정제마그네틱 비드 정제
탈파라핀화 필요
자동화 가능(탈파라핀화 후) 
(KF Flex 및 Duo Prime 스크립트)
호환되는 FFPE 샘플 범위최대 4 x 20미크론 절편
(300 mm2 조직)
최대 2 x 20미크론 절편
(300 mm2 조직)
샘플 부피~50µL 정제 DNA
~50µL 정제 RNA
~50uL 정제 DNA
~50µL 정제 RNA
Ion AmpliSeq DNA 패널(예 Cancer Hotspot Panel v2)과 호환
Ion AmpliSeq RNA 패널(예: RNA 암 및 RNA 융합)과 호환

FFPE에서 RNA 분리가 왜 까다롭습니까?

FFPE 검체에서 RNA 품질을 회복하는 것은 상당히 어려울 수 있습니다. 고정 공정은 핵산과 단백질 사이의 가교 결합을 유발하고 염기에 모노메틸기를 첨가함으로써 RNA를 공유 변형시킵니다. 결과적으로, 분자는 단단하고 기계적 전단에 취약하며 가교 결합은 역전사를 위한 기질로서 RNA의 사용을 저해할 수 있습니다. 따라서 유전자 발현 분석을 위한 공급원으로서 FFPE 조직을 사용하기 위해서는 가교 결합된 매트릭스로부터 RNA 추출을 위한 신뢰할 수 있는 방법이 필요합니다.

FFPE로 어떻게 성공 가능성을 높일 수 있습니까?

FFPE 조직으로부터 분리된 RNA의 전체 품질 및 수율에 영향을 미칠 수 있는 많은 요소가 있습니다. 다음은 몇 가지 주요 요소를 해결하기 위한 권장 사항입니다.

  1. 업스트림 조직 조달 및 조직 검체 전처리—가능하면 조직은 외과적 절제 후 1시간 이내에 고정해야 합니다. 고정 공정을 완료하기 전에 RNA의 광범위한 분해가 발생할 수 있습니다. 최적의 고정 시간은 12-24시간이며 중성 완충 포르말린 또는 파라포름알데히드를 사용합니다. 고정된 조직은 포매 공정 전에 완전히 탈수해야 합니다.
  2. 블록 저장—가능하면 절단면이 없는 블록을 보관하면 대기 산소, 물 및 기타 환경적 요인(예: 광선 및 곰팡이, 곤충 등의 침입) 노출로 인한 지속적인 손상을 방지할 수 있습니다.
  3. RNA 분리에 사용되는 조직 유형, 크기 및 양—권장 조직 두께는 10–20 µm입니다. 사용되는 절편 수는 조직 유형(세포 밀도에 영향을 미침)과 표면적 (권장 크기: 50–300 mm2)에 따라 결정됩니다. 시작 물질이 과도하면 필터가 막혀 수율이 떨어질 수 있습니다.
  4. 조직 포매에 사용되는 과도한 양의 파라핀—가능하면 정제 프로토콜을 시작하기 전에 잉여 파라핀을 제거해야 합니다. 자일렌 기반 정제 방법의 경우, 완전한 탈파라핀화를 위해 실온에서 2개의 자일렌 처리가 충분히 이루어져야 합니다. 원하는 경우, 보다 엄격한 37–55°C 처리를 최대 30분간 수행할 수 있습니다. 자일렌 탈파라핀화 후 100% 에탄올을 완전히 제거하고 2개의 100 % 에탄올 세척 후에 펠릿을 건조시키는 것이 중요합니다. 마그네틱 비드 방법은 20 µm 절편으로 주입을 제한하는 파라핀을 처리하기 위해 새로운 화학 기술을 사용합니다.

MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit는 Invitrogen MagMAX magnetic particle를 사용하여 FFPE 샘플에서 총 RNA 및 DNA를 빠르고 효율적으로 자동 분리하도록 설계되었습니다. Invitrogen MagMAX FFPE NA kit는 공정 중 품질을 저하시키지 않으면서 더 빠른 워크플로우를 제공하고 독성이 적은 시약을 사용합니다. 이 키트는 동급 최고의 RecoverAll 필터 기반 시스템과 유사한 핵산 수율 및 순도를 제공합니다. MagMAX FFPE NA kit는 유사한 프로토콜을 사용하는 제품보다 성능이 우수하며, 더 길고 위험하며 처리량이 적은 프로토콜과 유사한 RNA 및 DNA 수율을 달성합니다.

RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation Kit 절차에서는 수작업 시간이 약 45분이며 RNA 분리를 하루 내에 쉽게 완료할 수 있습니다. FFPE 샘플은 자일렌 및 에탄올 세척을 통해 탈파라핀화합니다. 그런 다음 RNA 또는 DNA 회수에 맞는 배양 시간 동안 확실한 프로테아제 분해를 실시합니다. 핵산은 온-필터 뉴클레아제 처리를 포함하는 신속한 유리-필터 방법을 사용하여 정제되며 제공된 물 또는 저염 완충액으로 용리됩니다.

기술 리소스

TechNotes 자료

실험실 팁

실험 데이터

  • FFPE 환자 샘플에서 암 관련 mRNA Signature 식별: H. Lee Moffitt Cancer Center and Research Institute(Tampa, FL)의 Yeatman 실험실은 결장, 유방암 및 기타 암을 정의하는 유전자 발현 표지를 조사합니다.
  • Real-Time RT-PCR에 대한 LCM 염색 효과: Ambion LCM Staining Kit가 추출된 RNA의 수율이나 품질을 저하시키지 않으면서 포르말린 고정 및 파라핀 포매(FFPE) 조직에 성공적으로 사용될 수 있음을 보여주는 연구 결과가 설명됩니다.

애플리케이션 노트

제품 공고

나에게 맞는 식물 RNA 분리 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 까다로운 샘플에 적합(침엽수 조직 및 씨앗)신속하고 간편한 사용microRNA 및 small RNA의 효율적 회수신속하고 완전한 자동화
  식물 RNA 시약 PureLink RNA Mini Kit mirVana miRNA Isolation Kit MagMAX-96 Total RNA Isolation Kit
인기 판매품   
분리되는 RNA 유형large RNA 분자만 분리large RNA 분자만 분리Small & large RNA 분자large RNA 분자만 분리
전처리 시간60분<20분30분<45분
시작 물질의 양최대 1g<250 mg0.5 ~ 250mg최대 10mg
분리 방법고순도 유기 추출(알코올 침전 필요)빠르고 편리한 실리카 컬럼최고 순도 및 편리함, 유기 추출 및 실리카 컬럼 포함(침전 불필요)마그네틱 비드를 사용하여 확장 가능하고 유연한 형태
고처리량 적합성   
호환 제품 Ambion Plant RNA Isolation Aid
흔한 식물 오염 물질 제거
Ambion Plant RNA Isolation Aid
흔한 식물 오염 물질 제거
Ambion Plant RNA Isolation Aid
흔한 식물 오염 물질 제거

다당류 제거

식물 RNA 분리와 관련된 주요 문제 중 하나는 폴리페놀 화합물 및 다당류와 같이 문제가 있는 바이오분자의 존재입니다. Ambion Plant RNA Isolation Aid는 폴리페놀 및 다당류에 결합하는 고분자량 고분자인 폴리비닐피롤리돈과 추출 전 스핀 단계를 통해 이러한 오염 물질을 최소화합니다.

RNA 보존 및 안정화

RNAlater 솔루션은 원형(intact) 동물 조직, 기관, 세포 및 세균에서 RNA 보존을 위해 널리 사용됩니다. 이는 RNA 분리를 위해 샘플을 즉시 처리하거나 나중에 처리하기 위해 액체 질소에서 샘플을 동결해야 할 필요성을 최소화합니다.

기술 리소스

나에게 맞는 조직 RNA 추출 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 고순도 원형(intact) RNA를 위한 골드 스탠다드간단하고 신뢰할 수 있는 빠른 방법96개의 샘플을 위한 빠르고 편리한 컬럼 기반 필터 플레이트 형태(Rna> 200 nt)제한된 샘플 주입으로 빠르고 편리한 컬럼 기반 방법(Rna> 200 nt)small RNA 종을 위한 빠르고 편리한 방법최고 순도의 TRIzol + 컬럼 정제, 침전 불필요모든 크기의 RNA를 복구할 수 있는 HTP 형태(microRNA 포함)
  TRIzol ReagentPureLink RNA Mini KitPureLink Pro 96 total RNA Purification KitPureLink RNA Micro Scale KitmirVana miRNA Isolation KitTRIzol Plus RNA Purification SystemMagMAX mirVana Total RNA Isolation
인기 판매품      
분리 방법 고순도 유기 추출(알코올 침전 필요)빠르고 편리한 실리카 컬럼필터 플레이트 형태의 빠르고 편리한 실리카 컬럼빠르고 편리한 마이크로 실리카 컬럼편리한 실리카 컬럼과 결합된 유기 추출최고 순도 및 편리함, 유기 추출 및 실리카 컬럼 포함(침전 불필요)마그네틱 비드를 사용하여 확장 가능하고 유연한 형태
전처리 시간 1시간20분20분20분30분1시간<1시간
시작 물질의 양최대 100 mg10 mg ~ 100 mg10 세포 ~ 10 mg최대 10 mg최대 250 mg 조직최대 100 mg최대 50 mg
고처리량 적합성     
전처리 크기100개 전처리50개 전처리96개 전처리50개 전처리96개 전처리50개 전처리96개 전처리

동물 조직에서 RNA 수율

RNA 함량은 조직, 세포 유형, 생리학적 상태 등에 따라 크게 다를 수 있습니다. 이 차트는 다양한 세포와 조직에서 RNA 수율을 추정하기 위한 일반적인 지침을 제공합니다.

1mg의 다양한 조직에서 일반적인 총 RNA 수율

표 1. 1mg의 다양한 조직에서 일반적인 총 RNA 수율.

RNA 보존 및 안정화

RNAlater 솔루션은 원형(intact) 동물 조직, 기관, 세포 및 세균에서 RNA 보존을 위해 널리 사용됩니다. 이는 RNA 분리를 위해 샘플을 즉시 처리하거나 나중에 처리하기 위해 액체 질소에서 샘플을 동결해야 할 필요성을 제거합니다.

기술 리소스

나에게 맞는 효모 RNA 추출 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 신속하고 완전한 자동화신속하고 간편한 사용발현 프로파일을 유지하면서 단단한 효모 세포벽에 맞도록 설계96개의 샘플을 위한 빠르고 편리한 컬럼 기반 필터 플레이트 형태(Rna> 200 nt)
 Platinum Taq MagMAX for Microarrays Total RNA Isolation Kit PureLink RNA Mini KitRiboPure-Yeast Kit PureLink Pro 96 total RNA Purification Kit
인기 판매품   
lysis를 위한 특수 비드 포함아니오아니오지르코니아 비드아니오
분리 방법최고 순도를 위한 확장 가능하고 유연한 형태, 유기 추출 및 마그네틱 비드 포함빠르고 편리한 실리카 컬럼최고 순도 및 편리함, 유기 추출 및 실리카 컬럼 포함96웰 필터 플레이트 형태의 빠르고 편리한 실리카 컬럼
전처리 시간<1시간20분90분(DNase 처리 포함)20분
시작 물질의 양 최대 5 x 106 세포최대 5 x 108 세포최대 3 x 108 세포신선한 log-phase 효모 세포 1.8 mL(OD660=0.6–0.8)
고처리량 적합성   
키트 크기96개 전처리50개 전처리50개 전처리96개 전처리

기술 리소스

진핵 세포와 달리 효모 및 많은 세균 균주는 파괴하기 어려운 세포벽에 의해 보호됩니다. 첫 번째 단계로 RNA 분리 절차 전에 효과적인 세포 용해(일반적으로 기계적 파괴 또는 효소 전처리를 통해)가 필요합니다.

Ambion RNA 전문가가 개발한 다양한 제품을 사용하면 세균과 효모에서 순수한 순수 RNA를 고수율로 분리할 수 있습니다.

나에게 맞는 세균 RNA 추출 키트 알아보기

 지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기지금 주문하기
 lysis 절차 없음빠르고 간편함, 20분빠르고 편리한 실리카 컬럼 기반, 필터 플레이트 형태HTP, 45분lysis하기 어려운 그람 + 세균에 이상적
 TRIzol Max Bacterial RNA Isolation Kit w/TRIzol & Max Bacterial Enhancement Reagent PureLink RNA Mini Kit PureLink Pro 96 total RNA Purification KitMagMAX Total Nucleic Acid Isolation Kit RiboPure-Bacteria Kit
인기 판매품    
lysis를 위한 특수 비드 포함아니오아니오아니오지르코니아 비드지르코니아 비드
분리 방법고순도 유기 추출(알코올 침전 필요)빠르고 편리한 실리카 컬럼96웰 필터 플레이트 형태의 빠르고 편리한 실리카 컬럼마그네틱 비드를 사용하여 확장 가능하고 유연한 형태최고 순도 및 편리함, 유기 추출 및 실리카 컬럼 포함(침전 불필요)
전처리 시간1시간20분20분45분1시간
시작 물질의 양최대 1 x 108 세포최대 1 x 109 세포최대 1 x 109 세포최대 0.3 g의 고체 시료 또는 175 µl의 액체 시료최대 109 세포
고처리량 적합성   
키트 크기100개 전처리50개 전처리96개 전처리100개 전처리50개 전처리

기술 리소스

생물학적 샘플(동물, 곤충, 식물, 곰팡이, 세균) 및 환경 샘플(물, 공기, 음식)의 바이러스 분석시 테스트 중인 샘플의 바이러스 RNA 또는 DNA를 필요로 하는 분자 테스트 전략을 사용하는 경우가 점차 늘고 있습니다. 바이러스 RNA의 정제는 우수한 회수 및 검출 감도를 얻는데 있어 고유한 과제를 제기합니다. Ambion RNA 전문가는 여러 가지 형태 옵션으로 광범위한 샘플 유형에서 최대 바이러스 RNA 수율, 순도 및 무결성을 제공하도록 최적화된 RNA 정제 제품을 개발했습니다.

"PureLink Viral RNA/DNA Mini Kit의 고농축 바이러스 RNA는 바이러스 게놈에 대해 보다 민감하고 섬세한 다운스트림 분석을 위한 도구를 제공합니다."
Dongning Wang, PhD, Feng Gao 실험실, MD, Duke Human Vaccine Institute, Duke University

제품 사양

 가장 적합한 다운스트림 애플리케이션
제품형태Real-Time RT-PCR마이크로어레이 분석서열분석Northern Blot클로닝

총 RNA

PureLink Viral RNA⁄DNA Mini Kit카오트로픽염 기반 lysis, 실리카 필터   
RNAqueous Kit카오트로픽염 기반 lysis, 실리카 필터  
MagMAX AI⁄ND Viral RNA Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자   
MagMAX-96 AI⁄ND Viral RNA Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자, 96-웰 처리, 자동화 가능   

DNA/RNA

PureLink Pro 96 Viral RNA⁄DNA Purification Kit카오트로픽염 기반 lysis, 실리카 필터, 96-웰 처리, 자동화 가능    
MagMAX Total Nucleic Acid Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자, 96-웰 처리, 자동화 가능   
MagMAX-96 Viral RNA Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자, 96-웰 처리, 자동화 가능   
Dynabeads SILANE Viral NA카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 비드, 자동화 가능     
iPrep PureLink Virus Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자, 자동화 가능    
MagMAX Viral RNA Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자    
MagMAX-96 Viral RNA Isolation Kit(5 x 96 rxns)카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 입자, 96-웰 처리, 자동화 가능    

MicroRNA

mirVana miRNA Isolation Kit카오트로픽염 기반 lysis, 실리카 필터    
mirVana miRNA Isolation Kit(페놀 미포함 - 별도 구매해야 함)카오트로픽염 기반 lysis, 실리카 필터    
TRIzol LS ReagentTRIzol 시약에서 lysis, 원스텝 시약 

mRNA

Dynabeads mRNA DIRECT Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 비드   
Dynabeads mRNA DIRECT Micro Kit카오트로픽염 기반 lysis, 마그네틱 비드   
Resources
  • Protocol Videos—Videos to help you isolate nucleic acids using a variety of techniques.
  • DNA & RNA Selection Guide—Find the right purification products.
  • Videos—View our library of DNA & RNA purification and analysis videos.
  • Application Notes—Explore our application notes from scientists sharing data for isolation products

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.