Gránulos de referencia de tamaño y calibración del citómetro de flujo

Partículas de calibración de varios colores Las partículas de calibración se pueden usar para la calibración de rutina de los citómetros de flujo utilizando longitudes de onda que varían de 365 a 650 nm.

• Manual partículas de calibración de varios colores

Gránulos de alineación del citómetro de flujo Alignflow de Invitrogen son referencias confiables para alinear, enfocar y calibrar citómetros de flujo. Estas microesferas de poliestireno teñidas con fluorescencia son altamente uniformes con respecto al tamaño y la intensidad de fluorescencia (Figura 3) , y están diseñadas para replicar aproximadamente el tamaño, la longitud de onda de emisión y la intensidad de las muestras biológicas. Debido a que los tintes están contenidos dentro de la matriz de la microesfera, en lugar de sobre la superficie de los gránulos , los gránulos AlignFlow tienen una excelente estabilidad fotoquímica y física, proporcionando señales de referencia confiables para la configuración del instrumento. Los tintes fluorescentes han sido cuidadosamente seleccionados para una excitación óptima por fuentes de láser comúnmente utilizadas en citometría de flujo.

Los gránulos AlignFlow están disponibles en tres versiones: para excitación de 350–370 nm con láseres UV, para excitación de 488 nm con láseres azules y para excitación de 633 nm con láseres rojos. Ambos están disponibles en dos tamaños 2.5 μm de diámetro y 6.0 μm de diámetro. Consulte la tabla de abajo para la selección de productos.

• Lea el manual del producto AlignFlow

El kit de calibración de tamaño para citometría de flujo Invitrogen proporciona un conjunto de suspensiones de microesferas no fluorescentes que sirven como referencias de tamaño confiables para los usuarios de citometría. El kit contiene seis suspensiones de microesferas de poliestireno sin teñir, cada una con un diámetro conocido, determinada por microscopía electrónica de transmisión. El tamaño de las células en una muestra experimental se puede estimar comparando las señales de dispersión directa (FSC) con las de las microesferas de referencia. Las microesferas funcionan como marcadores de tamaño reproducibles (Figura 4) y se pueden mezclar con la muestra experimental o usarse en corridas paralelas.

• Lea el manual del producto del kit de calibración de tamaño para citometría de flujo

El kit de referencia de tamaño de partículas submicrométrico de citometría de flujo Invitrogen proporciona un conjunto de suspensiones de microesferas de fluorescencia verde que sirven como referencias de tamaño confiable para usuarios de citometría de flujo. El kit contiene seis suspensiones de microesferas de poliestireno, cada una con un diámetro conocido determinado por microscopía electrónica de transmisión. El perfil de excitación y emisión de todas los gránulos es similar al colorante Invitrogen Alexa Fluor 488 o las células teñidas con FITC (la excitación y los máximos de emisión son 505 nm y 515 nm, respectivamente).

El tamaño (o rango de tamaño) de las biopartículas en una muestra experimental puede estimarse comparando su FSC con las de las microesferas de referencia (Figura 5) . Las microesferas de cada componente funcionan como marcadores de tamaño reproducibles y se pueden usar individualmente (un tamaño), premezcladas (dos a seis tamaños), entremezcladas con la muestra experimental o en series paralelas. Este kit se puede usar para verificar el rendimiento del instrumento y establecer parámetros que sean adecuados para analizar partículas de submicrón. Por ejemplo, el kit se puede utilizar para comprobar:

• Límite de resolución y rango dinámico de medición de tamaño de partícula
• Sensibilidad de los tubos fotomultiplicadores de dispersión lateral y frontal.
• Nivel de ruido del valor inicial del instrumento
• Alineación y estabilidad ópticas y por láser
• stabilidad del sistema de fluídica

• Leer el Manual del kit de referencia de tamaño de partículas submicrométrico

Los gránulos de clasificación de células Invitrogen son estándares confiables para la configuración y calibración de instrumentos de clasificación de citometría de flujo. Los gránulos tienen un diámetro de 6 μm (± 10%) y, por lo tanto, aproximan el tamaño, la longitud de onda de emisión y la intensidad de muchas muestras biológicas. En consecuencia, los gránulos se pueden usar para verificar los ajustes del clasificador de células, como el retraso de la caída y la eficiencia (pérdida de células durante la clasificación). Los gránulos también se pueden usar para calibrar la fuente láser, la óptica y el flujo de un citómetro de flujo sin desperdiciar material experimental valioso y sensible.