Search Thermo Fisher Scientific
Extracción de ARN por tipo de muestra
Independientemente de que esté empezando con células cultivadas o muestras de tejido, o trabajando con plantas, bacterias o células de mamíferos, los kits y reactivos de extracción de ARN Ambion ofrecen el producto adecuado para su investigación. La marca Ambion incluye productos Invitrogen existentes, tales como los fiables reactivos TRIzol y kits de purificación PureLink, junto con los principales productos Ambion, tales como kits y reactivos Cells-to-CT, MagMAX y RNAlater.
¿Qué kit de extracción de ARN de muestra de sangre es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Optimizado para muestras líquidas | Kit especializado agota eritrocitos no nucleados | Formato de placas de filtración con 96 columnas, para necesidades HTP | HTP optimizado para la purificación de muestras de sangre estabilizadas | Formato HTP, capaz de recuperar ARN de todos los tamaños (incluidos microARN) | Alta producción de ARN directamente de sangre completa, sin necesidad de aislar leucocitos | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| TRIzol LS | Kit de sangre de ARN total PureLink | Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96 | Kit MagMAX para aislamiento de ARN de tubos de sangre estabilizados | Aislamiento de ARN total MagMAX mirVana | Kit de sangre RiboPure | |
| El más vendido | ✓ | |||||
| Reactivos de estabilización compatibles | EDTA, heparina, citrato, RNAlater | EDTA, heparina, citrato | EDTA, heparina, citrato | Tubos Tempus o PaxGene | EDTA o citrato | EDTA, heparina, citrato, RNAlater |
| Incluye reactivo de estabilización | ✓ RNAlater | |||||
| Método de aislamiento | Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol) | Columna de sílice rápida y cómoda | Columnas de sílice rápidas y cómodas en formato de placas | Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos | Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos | Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación) |
| Tiempo de preparación | 1 hora | 20 minutos | 12 tubos en 2 horas | ≥ 96 muestras en < 1 h | 30 minutos | |
| Compatible con alto rendimiento | ✓ | ✓ | ✓ |
Para obtener más información sobre cómo trabajar con sangre, consulte nuestros artículos técnicos:
Protocolos adicionales
- Protocolo de fraccionamiento de sangre para la recogida de glóbulos blancos
- Aislamiento de ARN pequeños con el kit de sangre RiboPure
Consejos desde la mesa de trabajo
Artículos de notas técnicas
- Consejos y trucos para trabajar con muestras de sangre
- Extracción de microARN de muestras de sangre - Notas técnicas 13(1)
- Recuperación de ARN de alto rendimiento de muestras de mamíferos, plantas y víricas - Notas técnicas 13(1)
- Mejore el aislamiento de ARN para análisis de matriz y mucho más - Notas técnicas 10(3)
- Perfiles de expresión génica mejorados con muestras de sangre de ratón - Notas técnicas 13(4)
- Métodos mejorados para la creación de perfiles de expresión génica de muestras de sangre - Notas técnicas 13(3)
- Sensibilidad de la micromatriz mejorada mediante muestras de ARN de sangre completa - Notas técnicas 12(3)
- Aislamiento de ARN de glóbulos blancos capturados por un sistema de filtrado Novel - Notas técnicas 12(4)
- Aislamiento de ARN de alto y bajo rendimiento de tejidos, muestras sin células y sangre - Notas técnicas 13(2)
- Expresión de miARN en glóbulos blancos - Notas técnicas 11(3)
- Obtención del ARN de mayor calidad de muestras de sangre - Notas técnicas 16(1)
- Purificación de ARN directamente de sangre completa - Notas técnicas 11(4)
- Cuantificación de miARN de una pocas gotas de sangre de ratón - Notas técnicas 14(4)
- Aspectos destacados de la investigación: Datos de micromatrices superiores de muestras de sangre - Notas técnicas 14(4)
- Extracción de ARN de sangre: Cómo elegir el mejor sistema para sus estudios de expresión génica - Notas técnicas 14(2)
- ARN de sangre completa de ratón para perfiles de expresión - Notas técnicas 13(3)
- Aislamiento robusto de ARN de alto rendimiento de muestras de sangre - Notas técnicas 12(3)
- Perfiles de expresión génica superiores con muestras de sangre completa humana - Notas técnicas 14(3)
- ARN total de sangre completa para perfiles de expresión - Notas técnicas 12(2)
La purificación de ARN de células cultivadas tradicionalmente ha sido un procedimiento altamente repetitivo, que requiere mucho tiempo y trabajo, y que a menudo implica el uso de productos químicos orgánicos tóxicos. Los productos desarrollados por nuestros expertos en ARN permiten aislar ARN de máximo rendimiento, pureza e integridad utilizando diversas tecnologías (extracción orgánica, columnas de fibra de vidrio, gránulos magnéticos y combinaciones de estas tecnologías).
También puede analizar lisados de células cultivadas sin aislar primero el ARN. En un tiempo significativamente menor, obtendrá resultados de qPCR equivalentes a los de ARN purificado o, en algunos casos, mejores. Los productos Invitrogen como, por ejemplo, la línea de productos Cells-to-CT y Single Cell-to-CT, ofrecen enormes ventajas de rendimiento y manipulación.
¿Qué kit de aislamiento de ARN de células cultivadas es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| ARN intacto y altamente puro | Formato basado en columnas rápido y cómodo para ARN (> 200 nt) | Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt) | Método basado en columnas rápido y cómodo de una entrada de muestras limitada (ARN > 200 nt) | Método rápido y cómodo para especies de ARN pequeño | Sistema completo para células a qRT-PCR sin purificación de ARN | |
| Reactivo TRIzol | Minikit de ARN PureLink | Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96 | Kit de micromuestras de ARN PureLink | Kit de aislamiento de miARN MirVana | Kits Cells-to-CT | |
| El más vendido | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||
| Tiempo de preparación | 1 hora | 20 minutos | 20 minutos | 20 minutos | 30 minutos | < 10 minutos |
| Método de lisis celular | Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol) | Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad | Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad | Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad | Extracción orgánica seguida de precipitación de alcohol | Lisis Cells-to-CT |
| Cantidad de material de partida | Hasta 1 x 107 células | De 5 x 106 a 1 x 108 células | De 5 x 106 a 1 x 108 células | Hasta 5 x 105 células | 102-107 células cultivadas | 10-100 000 células |
| Aplicación | Todos los métodos de expresión de ARN | qRT-PCR, NGS | qRT-PCR, NGS | qRT-PCR, NGS | Análisis de micro ARN | qRT-PCR |
Preservar y estabilizar su ARN
La solución RNAlater se usa ampliamente para la preservación del ARN en tejidos, órganos, células de animales intactos y bacterias. Elimina la necesidad de procesar inmediatamente las muestras para el aislamiento de ARN o de congelarlas en nitrógeno líquido para su posterior procesamiento.
Recursos técnicos
¿Qué kit de extracción de ARN de muestras de FFPE es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Aislamiento de bajo rendimiento de ARN y ADN de la misma sección de FFPE | Aislamiento ampliable de ARN y ADN de la misma sección de FFPE | |
|---|---|---|
| Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales RecoverAll para FFPE | Kit MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra | |
| Tiempo de preparación | 4,5 horas (tiempo total para 16 muestras) 2,5 horas de tiempo de manipulación | 4 horas (tiempo total para 96 preparaciones) 1 hora de tiempo de manipulación |
| Producto final extraído | ARN total, microARN y ADNg | ARN total, microARN y ADNg |
| Método de aislamiento | purificación de columnas | purificación de gránulos magnéticos |
| Requiere desparafinación | ✓ | ✓ |
| Compatible con automatización (posdesparafinización) | ✓ (guiones para KF Flex y Duo Prime) | |
| Intervalo de muestras de FFPE compatible | Secciones de hasta 4 x 20 micras (tejido de 300 mm2) | Secciones de hasta 2 x 20 micras (tejido de 300 mm2) |
| Volumen de muestra | ~ 50 µl de ADN purificado ~ 50 µl de ARN purificado | ~ 50 µl de ADN purificado ~ 50 µl de ARN purificado |
| Compatible con paneles de ADN Ion AmpliSeq (p. ej., Cancer Hotspot Panel v2) | ✓ | ✓ |
| Compatible con paneles de ARN Ion AmpliSeq (p. ej., RNA cancer y RNA fusion) | ✓ | ✓ |
¿Por qué el aislamiento de ARN de FFPE supone un desafío?
La recuperación de ARN de calidad de muestras de FFPE puede ser bastante difícil. El proceso de fijación provoca un enlace cruzado entre los ácidos nucleicos y las proteínas, y modifica de forma covalente el ARN mediante la adición de grupos monometílicos a las bases. Como resultado, las moléculas se vuelven rígidas y susceptibles al cizallamiento mecánico, y los enlaces cruzados pueden poner en peligro el uso del ARN como sustrato para la transcripción inversa. Por tanto, a fin de utilizar tejidos de FFPE como origen para el análisis de la expresión génica, se requiere un método fiable para la extracción de ARN de la matriz entrecruzada.
¿Cómo puede aumentar sus posibilidades de éxito con FFPE?
Existen una serie de factores que pueden afectar a la calidad y al rendimiento generales del ARN aislado de tejidos de FFPE. A continuación se presentan recomendaciones para abordar varios factores clave:
- Obtención de tejidos y preparación de muestras de tejidos en fases anteriores: si es posible, los tejidos se deben fijar en el plazo de una hora después de la resección quirúrgica. Se puede producir una gran degradación del ARN antes de completar el proceso de fijación. El tiempo de fijación óptimo es de entre 12 y 24 horas, utilizando formalina tamponada neutra o paraformaldehído. Los tejidos fijados se deben deshidratar completamente antes del proceso de inclusión.
- Almacenamiento de bloques: el almacenamiento de bloques sin caras cortadas, cuando sea posible, previene daños continuos por exposición al oxígeno atmosférico, al agua y a otros factores ambientales, tales como la luz y la infestación (hongos, insectos, etc.).
- Tipo, tamaño y cantidad de tejido que se va a utilizar para el aislamiento de ARN: el grosor de tejido recomendado es de 10-20 µm. El número de secciones utilizadas se determina por el tipo de tejido (que afecta a la densidad celular) y el área de superficie (tamaño recomendado: 50-300 mm2). El exceso de material de partida puede causar la obstrucción del filtro, lo que da como resultado una baja producción.
- Cantidad excesiva de parafina utilizada para la inclusión de tejidos: cuando sea posible, se debe eliminar el exceso de parafina antes de iniciar el protocolo de purificación. Para los métodos de purificación basados en xileno, deberían ser suficientes dos tratamientos de xileno a temperatura ambiente para una desparafinización completa. Si se desea, se puede realizar un tratamiento más riguroso de 37-55 °C durante 30 minutos. Después de la desparafinización del xileno, es crucial que se retire completamente el etanol al 100 % y que los sedimentos estén secos después de los dos lavados de etanol al 100 %. El método de gránulos magnéticos emplea novedosas sustancias químicas para tratar la parafina que limita la entrada a secciones de 20 µm.
Los kits MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra están diseñados para un aislamiento rápido, eficiente y automatizado del ARN total y el ADN de muestras de FFPE utilizando partículas magnéticas Invitrogen MagMAX. Los kits Invitrogen MagMAX FFPE NA ofrecen flujos de trabajo más rápidos y utilizan reactivos menos tóxicos, sin sacrificar la calidad. Estos kits ayudan a ofrecer una producción y una pureza de ácidos nucleicos comparables a las del mejor sistema basado en filtros RecoverAll de su clase. Los kits MagMAX FFPE NA superan el rendimiento de productos con protocolos similares y logran producciones de ARN y ADN comparables a las de protocolos más largos, más peligrosos y de menor rendimiento.
El procedimiento del kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales RecoverAll requiere unos 45 minutos de manipulación y se puede completar fácilmente en menos de un día cuando se aísla ARN. Las muestras FFPE se desparafinan con una serie de lavados de etanol y xileno. A continuación, se las somete a una rigurosa digestión de proteasas con un tiempo de incubación adaptado a la recuperación de ARN o ADN. Los ácidos nucleicos se purifican con un método rápido de filtrado con vidrio que incluye un tratamiento de nucleasa en el filtro y se eluyen en agua o en el tampón bajo en sal proporcionado.
Recursos técnicos
Artículos de notas técnicas
- Extracción de ácidos nucleicos de muestras de FFPE
- Cuantificación exacta y sensible de microARN de tejidos de FFPE - Notas técnicas 16(1): Este estudio describe el aislamiento con éxito y la medición precisa de la expresión de miARN de muestras fijadas en formol incluido en parafina (FFPE) o en paraformol incluido en parafina.
- Aislamiento más rápido de ácidos nucleicos de tejidos de FFPE - Notas técnicas 16(1): Applied Biosystems ha mejorado el protocolo para el kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales Invitrogen Ambion RecoverAll para tejidos de FFPE, lo que ha reducido significativamente el tiempo de procesamiento.
- Análisis de expresiones genéticas optimizadas de muestras de FFPE - Notas técnicas 14(3): El protocolo optimizado presentado aquí se puede utilizar para cuantificar de manera fiable niveles de expresión de ARNm utilizando ARN aislado de muestras de FFPE y RT-PCR en tiempo real.
- Recuperar producciones elevadas de ácidos nucleicos totales de tejidos fijados en formol incluido en parafina (FFPE) - Notas técnicas 12(3): El nuevo kit RecoverAll de Ambion permite a los investigadores aislar ADN o ARN (incluido microARN) de muestras de FFPE. Los ácidos nucleicos recuperados son ideales para diversas aplicaciones posteriores, tales como el análisis de micromatrices, qRT-PCR y detección de mutaciones.
- Análisis de microARN con ARN extraído de muestras emparejadas fijadas en formol incluido en parafina (FFPE) y frescas congeladas
- Alta correlación de datos de cuantificación de miARN de tejidos congelados instantáneamente y FFPE emparejado con ensayos MicroRNA TaqMan
- Identificación de genotipos de ADN de muestras de FFPE humanas - Fiable y Reproducible: Nota de aplicación
- Extracción y cuantificación optimizadas de ARN de muestras de FFPE para análisis de expresión génica
- Protocolo: Preparación de bibliotecas de ARN pequeño de FFPE para secuenciación SOLiD
- Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales RecoverAll™
Consejos desde la mesa de trabajo
Sus datos
- Identificación de firmas de ARNm relacionadas con el cáncer en muestras de pacientes de FFPE: El laboratorio Yeatman del H. Lee Moffitt Cancer Center and Research Institute (Tampa, Florida) investiga las firmas de expresión génica que definen el cáncer de colon, cáncer de mama y otros tipos de cáncer.
- Efectos de la tinción LCM sobre la RT-PCR en tiempo real: La investigación demuestra que el kit de tinción Ambion LCM se puede utilizar con éxito en tejidos fijados en formol incluido en parafina (FFPE) sin poner en riesgo ni la producción ni la calidad del ARN extraído.
Nota de aplicación
- Extracción y cuantificación optimizadas de ARN de muestras de FFPE para análisis de expresión génica
Boletín de producto
¿Qué kit de aislamiento de ARN vegetal es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Excelente para muestras complicadas (semillas y tejidos de coníferas) | Rápido y fácil de utilizar | Recuperación eficaz de ARN pequeño y microARN | Rápido y totalmente automático | |
|---|---|---|---|---|
| Reactivo de ARN de plantas | Minikit de ARN PureLink | Kit de aislamiento de miARN mirVana | Kit de aislamiento de ARN total MagMAX-96 | |
| El más vendido | ✓ | |||
| Tipos de ARN aislado | solo moléculas de ARN grandes | solo moléculas de ARN grandes | Moléculas de ARN grandes y pequeñas | solo moléculas de ARN grandes |
| Tiempo de preparación | 60 minutos | <20 minutos | 30 minutos | < 45 minutos |
| Cantidad de material de partida | Hasta 1 g | <250 mg | De 0,5 a 250 mg | Hasta 10 mg |
| Método de aislamiento | Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol) | Columna de sílice rápida y cómoda | Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación) | Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos |
| Compatible con alto rendimiento | ✓ | |||
| Productos compatibles | Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes | Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes | Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes |
Eliminar polisacáridos
Uno de los principales problemas relacionados con el aislamiento de ARN vegetal es la presencia de biomoléculas problemáticas, como compuestos polifenólicos y polisacáridos. El medio a aislamiento de ARN vegetal Ambion minimiza muchos de estos contaminantes con la adición de polivinilpirrolidona, un polímero de alto peso molecular que se une a polifenolicos y polisacáridos, y con un paso de centrifugación previo a la extracción.
Preservar y estabilizar su ARN
La solución RNAlater se usa ampliamente para la preservación del ARN en tejidos, órganos, células de animales intactos y bacterias. Minimiza la necesidad de procesar inmediatamente las muestras para el aislamiento de ARN o de congelarlas en nitrógeno líquido para su posterior procesamiento.
Recursos técnicos
¿Qué kit de extracción de ARN de tejidos es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Criterio de referencia para ARN intacto y altamente puro | Método sencillo, fiable y rápido | Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt) | Método basado en columnas rápido y cómodo de una entrada de muestras limitada (ARN > 200 nt) | Método rápido y cómodo para especies de ARN pequeño | TRIzol de máxima pureza + purificación de columnas, no se requiere precipitación | Formato HTP, capaz de recuperar ARN de todos los tamaños (incluidos microARN) | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Reactivo TRIzol | Minikit de ARN PureLink | Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96 | Kit de micromuestras de ARN PureLink | Kit de aislamiento de miARN mirVana | Sistema de purificación de ARN TRIZol Plus | Aislamiento de ARN total MagMAX mirVana | |
| El más vendido | ✓ | ||||||
| Método de aislamiento | Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol) | Columna de sílice rápida y cómoda | Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración | Columnas de sílice rápidas y cómodas | Extracción orgánica combinada con prácticas columnas de sílice | Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación) | Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos |
| Tiempo de preparación | 1 hora | 20 minutos | 20 minutos | 20 minutos | 30 minutos | 1 hora | < 1 hora |
| Cantidad de material de partida | Hasta 100 mg | De 10 mg a 100 mg | De 10 células a 10 mg | Hasta 10 mg | Hasta tejido de 250 mg | Hasta 100 mg | Hasta 50 mg |
| Compatible con alto rendimiento | ✓ | ✓ | |||||
| Tamaño de preparación | 100 preparaciones | 50 preparaciones | 96 preparaciones | 50 preparaciones | 96 preparaciones | 50 preparaciones | 96 preparaciones |
Producción de ARN de tejidos animales
El contenido de ARN puede variar ampliamente entre tejidos, tipos de células, estados fisiológicos, etc. En esta tabla se proporcionan directrices generales para estimar las producciones de ARN de una variedad de células y tejidos.
Tabla 1. Producción de ARN total habitual de 1 mg de varios tejidos.
Preservar y estabilizar su ARN
La solución RNAlater se usa ampliamente para la preservación del ARN en tejidos, órganos, células de animales intactos y bacterias. Elimina la necesidad de procesar inmediatamente las muestras para el aislamiento de ARN o de congelarlas en nitrógeno líquido para su posterior procesamiento.
Recursos técnicos
- Conceptos básicos: Aislamiento de ARN
- Aislamiento de ARN total de tejidos difíciles
- Consejos desde la mesa de trabajo: Efecto de los ciclos de congelación y descongelación de tejido sobre la integridad del ARN
- Interrupción del tejido sin manos
- Aumento de la recuperación de ARN durante la extracción de tejidos o células
¿Qué kit de extracción de ADN de levadura es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Rápido y totalmente automático | Rápido y fácil de utilizar | Diseñado para paredes celulares rígidas de levadura manteniendo los perfiles de expresión | Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt) | |
|---|---|---|---|---|
| Kit Platinum Taq MagMAX de aislamiento de ARN total para micromatrices | Minikit de ARN PureLink | Kit RiboPure-Yeast | Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96 | |
| El más vendido | ✓ | |||
| Incluye gránulos especializados para lisis celular | No | No | Gránulos de circón | No |
| Método de aislamiento | Formato ampliable y flexible para la máxima pureza; incluye extracción orgánica y gránulos magnéticos | Columna de sílice rápida y cómoda | Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica | Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración de 96 pocillos |
| Tiempo de preparación | < 1 hora | 20 minutos | 90 minutos (incluye tratamiento de ADNasa) | 20 minutos |
| Cantidad de material de partida | Hasta 5 x 106 células | Hasta 5 x 108 células | Hasta 3 x 108 células | 1,8 ml de células de levadura frescas en fase logarítmica (OD660=0,6-0,8) |
| Compatible con alto rendimiento | ✓ | |||
| Tamaño del kit | 96 preparaciones | 50 preparaciones | 50 preparaciones | 96 preparaciones |
Recursos técnicos
A diferencia de las células eucariotas, la levadura y muchas cepas bacterianas están protegidas por paredes celulares que pueden ser difíciles de alterar. Como primer paso, se requiere una lisis celular efectiva (normalmente mediante interrupción mecánica o pretratamiento enzimático) antes de cualquier procedimiento de aislamiento de ARN.
Una gama de productos desarrollados por los expertos en ARN de Ambion le ayudará a aislar una elevada producción de ARN puro e intacto de bacterias y levadura.
¿Qué kit de aislamiento de ARN bacteriano es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Sin procedimientos de lisis | Rápido y fácil, 20 min | Formato de placas de filtración basado en columna de sílice rápida y cómoda | HTP, 45 min | Ideal para bacterias + gram difíciles de lisar | |
|---|---|---|---|---|---|
| Kit de aislamiento de ARN bacteriano TRIzol Max con reactivo de mejora bacteriana TRIZol & Max | Minikit de ARN PureLink | Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96 | Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales MagMAX | Kit RiboPure-Bacteria | |
| El más vendido | ✓ | ||||
| Incluye gránulos especializados para lisis celular | No | No | No | Gránulos de circón | Gránulos de circón |
| Método de aislamiento | Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol) | Columna de sílice rápida y cómoda | Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración de 96 pocillos | Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos | Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación) |
| Tiempo de preparación | 1 hora | 20 minutos | 20 minutos | 45 minutos | 1 hora |
| Cantidad de material de partida | Hasta 1 x 108 células | Hasta 1 x 109 células | Hasta 1 x 109 células | Hasta 0,3 g de muestras sólidas o 175 µl de muestras líquidas | Hasta 109 células |
| Compatible con alto rendimiento | ✓ | ✓ | |||
| Tamaño del kit | 100 preparaciones | 50 preparaciones | 96 preparaciones | 100 preparaciones | 50 preparaciones |
Recursos técnicos
El análisis vírico de muestras biológicas (animales, insectos, plantas, hongos, bacterias) y ambientales (agua, aire, alimentos) se realiza cada vez más utilizando estrategias de análisis molecular que requieren ARN o ADN vírico de las muestras que se están analizando. La purificación de ARN vírico plantea desafíos únicos para la obtención de una buena sensibilidad de recuperación y detección. Los expertos en ARN de Ambion han desarrollado productos de purificación de ARN optimizados para proporcionar la máxima producción, pureza e integridad de ARN vírico de una amplia gama de tipos de muestras en varias opciones de formato.
«El ARN vírico altamente concentrado del minikit de ADN/ARN vírico PureLink proporciona una herramienta para un análisis posterior más sensible y delicado de genomas víricos»
Dr. Dongning Wang, en el laboratorio de Feng Gao, MD, Duke Human Vaccine Institute, Universidad de Duke
Especificaciones del producto
| Aplicación posterior más adecuada | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Producto | Formato | RT-PCR en tiempo real | Análisis de micromatrices | Secuenciación | Northern blot | Clonación |
ARN total | ||||||
| Minikit de ADN/ARN vírico PureLink | Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice | ✓ | ✓ | |||
| Kit RNAqueous | Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice | ✓ | ✓ | ✓ | ||
| Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX AI⁄ND | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas | ✓ | ✓ | |||
| Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96 AI⁄ND | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización | ✓ | ✓ | |||
ADN/ARN | ||||||
| Kit de purificación de ADN/ARN vírico PureLink Pro 96 | Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización | ✓ | ||||
| Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales MagMAX | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización | ✓ | ✓ | |||
| Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96 | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización | ✓ | ✓ | |||
| AN vírico Dynabeads SILANE | Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos, compatible con automatización | |||||
| Kit de virus iPrep PureLink | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, compatible con automatización | ✓ | ||||
| Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas | ✓ | ||||
| Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96 (5 x 96 reacciones) | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización | ✓ | ||||
Micro ARN | ||||||
| Kit de aislamiento de miARN mirVana | Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice | ✓ | ||||
| Kit de aislamiento mirVana miRNA (sin fenol - se debe adquirir por separado) | Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice | ✓ | ||||
| Reactivo TRIzol LS | Lisis en reactivo TRIzol, reactivo de un paso | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | |
ARNm | ||||||
| Kit Dynabeads mRNA DIRECT | Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos | ✓ | ✓ | |||
| Microkit Dynabeads mRNA DIRECT | Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos | ✓ | ✓ | |||
Resources
Nucleic Acid Purification and Analysis Support Center
Find tips, troubleshooting help, and resources for your nucleic acid purification & analysis applications.
- Protocol Videos—Videos to help you isolate nucleic acids using a variety of techniques.
- DNA & RNA Selection Guide—Find the right purification products.
- Videos—View our library of DNA & RNA purification and analysis videos.
- Application Notes—Explore our application notes from scientists sharing data for isolation products
¿Qué kit de extracción de ARN de muestra de sangre es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Optimizado para muestras líquidas | Kit especializado agota eritrocitos no nucleados | Formato de placas de filtración con 96 columnas, para necesidades HTP | HTP optimizado para la purificación de muestras de sangre estabilizadas | Formato HTP, capaz de recuperar ARN de todos los tamaños (incluidos microARN) | Alta producción de ARN directamente de sangre completa, sin necesidad de aislar leucocitos | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| TRIzol LS | Kit de sangre de ARN total PureLink | Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96 | Kit MagMAX para aislamiento de ARN de tubos de sangre estabilizados | Aislamiento de ARN total MagMAX mirVana | Kit de sangre RiboPure | |
| El más vendido | ✓ | |||||
| Reactivos de estabilización compatibles | EDTA, heparina, citrato, RNAlater | EDTA, heparina, citrato | EDTA, heparina, citrato | Tubos Tempus o PaxGene | EDTA o citrato | EDTA, heparina, citrato, RNAlater |
| Incluye reactivo de estabilización | ✓ RNAlater | |||||
| Método de aislamiento | Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol) | Columna de sílice rápida y cómoda | Columnas de sílice rápidas y cómodas en formato de placas | Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos | Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos | Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación) |
| Tiempo de preparación | 1 hora | 20 minutos | 12 tubos en 2 horas | ≥ 96 muestras en < 1 h | 30 minutos | |
| Compatible con alto rendimiento | ✓ | ✓ | ✓ |
Para obtener más información sobre cómo trabajar con sangre, consulte nuestros artículos técnicos:
Protocolos adicionales
- Protocolo de fraccionamiento de sangre para la recogida de glóbulos blancos
- Aislamiento de ARN pequeños con el kit de sangre RiboPure
Consejos desde la mesa de trabajo
Artículos de notas técnicas
- Consejos y trucos para trabajar con muestras de sangre
- Extracción de microARN de muestras de sangre - Notas técnicas 13(1)
- Recuperación de ARN de alto rendimiento de muestras de mamíferos, plantas y víricas - Notas técnicas 13(1)
- Mejore el aislamiento de ARN para análisis de matriz y mucho más - Notas técnicas 10(3)
- Perfiles de expresión génica mejorados con muestras de sangre de ratón - Notas técnicas 13(4)
- Métodos mejorados para la creación de perfiles de expresión génica de muestras de sangre - Notas técnicas 13(3)
- Sensibilidad de la micromatriz mejorada mediante muestras de ARN de sangre completa - Notas técnicas 12(3)
- Aislamiento de ARN de glóbulos blancos capturados por un sistema de filtrado Novel - Notas técnicas 12(4)
- Aislamiento de ARN de alto y bajo rendimiento de tejidos, muestras sin células y sangre - Notas técnicas 13(2)
- Expresión de miARN en glóbulos blancos - Notas técnicas 11(3)
- Obtención del ARN de mayor calidad de muestras de sangre - Notas técnicas 16(1)
- Purificación de ARN directamente de sangre completa - Notas técnicas 11(4)
- Cuantificación de miARN de una pocas gotas de sangre de ratón - Notas técnicas 14(4)
- Aspectos destacados de la investigación: Datos de micromatrices superiores de muestras de sangre - Notas técnicas 14(4)
- Extracción de ARN de sangre: Cómo elegir el mejor sistema para sus estudios de expresión génica - Notas técnicas 14(2)
- ARN de sangre completa de ratón para perfiles de expresión - Notas técnicas 13(3)
- Aislamiento robusto de ARN de alto rendimiento de muestras de sangre - Notas técnicas 12(3)
- Perfiles de expresión génica superiores con muestras de sangre completa humana - Notas técnicas 14(3)
- ARN total de sangre completa para perfiles de expresión - Notas técnicas 12(2)
La purificación de ARN de células cultivadas tradicionalmente ha sido un procedimiento altamente repetitivo, que requiere mucho tiempo y trabajo, y que a menudo implica el uso de productos químicos orgánicos tóxicos. Los productos desarrollados por nuestros expertos en ARN permiten aislar ARN de máximo rendimiento, pureza e integridad utilizando diversas tecnologías (extracción orgánica, columnas de fibra de vidrio, gránulos magnéticos y combinaciones de estas tecnologías).
También puede analizar lisados de células cultivadas sin aislar primero el ARN. En un tiempo significativamente menor, obtendrá resultados de qPCR equivalentes a los de ARN purificado o, en algunos casos, mejores. Los productos Invitrogen como, por ejemplo, la línea de productos Cells-to-CT y Single Cell-to-CT, ofrecen enormes ventajas de rendimiento y manipulación.
¿Qué kit de aislamiento de ARN de células cultivadas es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| ARN intacto y altamente puro | Formato basado en columnas rápido y cómodo para ARN (> 200 nt) | Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt) | Método basado en columnas rápido y cómodo de una entrada de muestras limitada (ARN > 200 nt) | Método rápido y cómodo para especies de ARN pequeño | Sistema completo para células a qRT-PCR sin purificación de ARN | |
| Reactivo TRIzol | Minikit de ARN PureLink | Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96 | Kit de micromuestras de ARN PureLink | Kit de aislamiento de miARN MirVana | Kits Cells-to-CT | |
| El más vendido | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||
| Tiempo de preparación | 1 hora | 20 minutos | 20 minutos | 20 minutos | 30 minutos | < 10 minutos |
| Método de lisis celular | Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol) | Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad | Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad | Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad | Extracción orgánica seguida de precipitación de alcohol | Lisis Cells-to-CT |
| Cantidad de material de partida | Hasta 1 x 107 células | De 5 x 106 a 1 x 108 células | De 5 x 106 a 1 x 108 células | Hasta 5 x 105 células | 102-107 células cultivadas | 10-100 000 células |
| Aplicación | Todos los métodos de expresión de ARN | qRT-PCR, NGS | qRT-PCR, NGS | qRT-PCR, NGS | Análisis de micro ARN | qRT-PCR |
Preservar y estabilizar su ARN
La solución RNAlater se usa ampliamente para la preservación del ARN en tejidos, órganos, células de animales intactos y bacterias. Elimina la necesidad de procesar inmediatamente las muestras para el aislamiento de ARN o de congelarlas en nitrógeno líquido para su posterior procesamiento.
Recursos técnicos
¿Qué kit de extracción de ARN de muestras de FFPE es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Aislamiento de bajo rendimiento de ARN y ADN de la misma sección de FFPE | Aislamiento ampliable de ARN y ADN de la misma sección de FFPE | |
|---|---|---|
| Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales RecoverAll para FFPE | Kit MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra | |
| Tiempo de preparación | 4,5 horas (tiempo total para 16 muestras) 2,5 horas de tiempo de manipulación | 4 horas (tiempo total para 96 preparaciones) 1 hora de tiempo de manipulación |
| Producto final extraído | ARN total, microARN y ADNg | ARN total, microARN y ADNg |
| Método de aislamiento | purificación de columnas | purificación de gránulos magnéticos |
| Requiere desparafinación | ✓ | ✓ |
| Compatible con automatización (posdesparafinización) | ✓ (guiones para KF Flex y Duo Prime) | |
| Intervalo de muestras de FFPE compatible | Secciones de hasta 4 x 20 micras (tejido de 300 mm2) | Secciones de hasta 2 x 20 micras (tejido de 300 mm2) |
| Volumen de muestra | ~ 50 µl de ADN purificado ~ 50 µl de ARN purificado | ~ 50 µl de ADN purificado ~ 50 µl de ARN purificado |
| Compatible con paneles de ADN Ion AmpliSeq (p. ej., Cancer Hotspot Panel v2) | ✓ | ✓ |
| Compatible con paneles de ARN Ion AmpliSeq (p. ej., RNA cancer y RNA fusion) | ✓ | ✓ |
¿Por qué el aislamiento de ARN de FFPE supone un desafío?
La recuperación de ARN de calidad de muestras de FFPE puede ser bastante difícil. El proceso de fijación provoca un enlace cruzado entre los ácidos nucleicos y las proteínas, y modifica de forma covalente el ARN mediante la adición de grupos monometílicos a las bases. Como resultado, las moléculas se vuelven rígidas y susceptibles al cizallamiento mecánico, y los enlaces cruzados pueden poner en peligro el uso del ARN como sustrato para la transcripción inversa. Por tanto, a fin de utilizar tejidos de FFPE como origen para el análisis de la expresión génica, se requiere un método fiable para la extracción de ARN de la matriz entrecruzada.
¿Cómo puede aumentar sus posibilidades de éxito con FFPE?
Existen una serie de factores que pueden afectar a la calidad y al rendimiento generales del ARN aislado de tejidos de FFPE. A continuación se presentan recomendaciones para abordar varios factores clave:
- Obtención de tejidos y preparación de muestras de tejidos en fases anteriores: si es posible, los tejidos se deben fijar en el plazo de una hora después de la resección quirúrgica. Se puede producir una gran degradación del ARN antes de completar el proceso de fijación. El tiempo de fijación óptimo es de entre 12 y 24 horas, utilizando formalina tamponada neutra o paraformaldehído. Los tejidos fijados se deben deshidratar completamente antes del proceso de inclusión.
- Almacenamiento de bloques: el almacenamiento de bloques sin caras cortadas, cuando sea posible, previene daños continuos por exposición al oxígeno atmosférico, al agua y a otros factores ambientales, tales como la luz y la infestación (hongos, insectos, etc.).
- Tipo, tamaño y cantidad de tejido que se va a utilizar para el aislamiento de ARN: el grosor de tejido recomendado es de 10-20 µm. El número de secciones utilizadas se determina por el tipo de tejido (que afecta a la densidad celular) y el área de superficie (tamaño recomendado: 50-300 mm2). El exceso de material de partida puede causar la obstrucción del filtro, lo que da como resultado una baja producción.
- Cantidad excesiva de parafina utilizada para la inclusión de tejidos: cuando sea posible, se debe eliminar el exceso de parafina antes de iniciar el protocolo de purificación. Para los métodos de purificación basados en xileno, deberían ser suficientes dos tratamientos de xileno a temperatura ambiente para una desparafinización completa. Si se desea, se puede realizar un tratamiento más riguroso de 37-55 °C durante 30 minutos. Después de la desparafinización del xileno, es crucial que se retire completamente el etanol al 100 % y que los sedimentos estén secos después de los dos lavados de etanol al 100 %. El método de gránulos magnéticos emplea novedosas sustancias químicas para tratar la parafina que limita la entrada a secciones de 20 µm.
Los kits MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra están diseñados para un aislamiento rápido, eficiente y automatizado del ARN total y el ADN de muestras de FFPE utilizando partículas magnéticas Invitrogen MagMAX. Los kits Invitrogen MagMAX FFPE NA ofrecen flujos de trabajo más rápidos y utilizan reactivos menos tóxicos, sin sacrificar la calidad. Estos kits ayudan a ofrecer una producción y una pureza de ácidos nucleicos comparables a las del mejor sistema basado en filtros RecoverAll de su clase. Los kits MagMAX FFPE NA superan el rendimiento de productos con protocolos similares y logran producciones de ARN y ADN comparables a las de protocolos más largos, más peligrosos y de menor rendimiento.
El procedimiento del kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales RecoverAll requiere unos 45 minutos de manipulación y se puede completar fácilmente en menos de un día cuando se aísla ARN. Las muestras FFPE se desparafinan con una serie de lavados de etanol y xileno. A continuación, se las somete a una rigurosa digestión de proteasas con un tiempo de incubación adaptado a la recuperación de ARN o ADN. Los ácidos nucleicos se purifican con un método rápido de filtrado con vidrio que incluye un tratamiento de nucleasa en el filtro y se eluyen en agua o en el tampón bajo en sal proporcionado.
Recursos técnicos
Artículos de notas técnicas
- Extracción de ácidos nucleicos de muestras de FFPE
- Cuantificación exacta y sensible de microARN de tejidos de FFPE - Notas técnicas 16(1): Este estudio describe el aislamiento con éxito y la medición precisa de la expresión de miARN de muestras fijadas en formol incluido en parafina (FFPE) o en paraformol incluido en parafina.
- Aislamiento más rápido de ácidos nucleicos de tejidos de FFPE - Notas técnicas 16(1): Applied Biosystems ha mejorado el protocolo para el kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales Invitrogen Ambion RecoverAll para tejidos de FFPE, lo que ha reducido significativamente el tiempo de procesamiento.
- Análisis de expresiones genéticas optimizadas de muestras de FFPE - Notas técnicas 14(3): El protocolo optimizado presentado aquí se puede utilizar para cuantificar de manera fiable niveles de expresión de ARNm utilizando ARN aislado de muestras de FFPE y RT-PCR en tiempo real.
- Recuperar producciones elevadas de ácidos nucleicos totales de tejidos fijados en formol incluido en parafina (FFPE) - Notas técnicas 12(3): El nuevo kit RecoverAll de Ambion permite a los investigadores aislar ADN o ARN (incluido microARN) de muestras de FFPE. Los ácidos nucleicos recuperados son ideales para diversas aplicaciones posteriores, tales como el análisis de micromatrices, qRT-PCR y detección de mutaciones.
- Análisis de microARN con ARN extraído de muestras emparejadas fijadas en formol incluido en parafina (FFPE) y frescas congeladas
- Alta correlación de datos de cuantificación de miARN de tejidos congelados instantáneamente y FFPE emparejado con ensayos MicroRNA TaqMan
- Identificación de genotipos de ADN de muestras de FFPE humanas - Fiable y Reproducible: Nota de aplicación
- Extracción y cuantificación optimizadas de ARN de muestras de FFPE para análisis de expresión génica
- Protocolo: Preparación de bibliotecas de ARN pequeño de FFPE para secuenciación SOLiD
- Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales RecoverAll™
Consejos desde la mesa de trabajo
Sus datos
- Identificación de firmas de ARNm relacionadas con el cáncer en muestras de pacientes de FFPE: El laboratorio Yeatman del H. Lee Moffitt Cancer Center and Research Institute (Tampa, Florida) investiga las firmas de expresión génica que definen el cáncer de colon, cáncer de mama y otros tipos de cáncer.
- Efectos de la tinción LCM sobre la RT-PCR en tiempo real: La investigación demuestra que el kit de tinción Ambion LCM se puede utilizar con éxito en tejidos fijados en formol incluido en parafina (FFPE) sin poner en riesgo ni la producción ni la calidad del ARN extraído.
Nota de aplicación
- Extracción y cuantificación optimizadas de ARN de muestras de FFPE para análisis de expresión génica
Boletín de producto
¿Qué kit de aislamiento de ARN vegetal es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Excelente para muestras complicadas (semillas y tejidos de coníferas) | Rápido y fácil de utilizar | Recuperación eficaz de ARN pequeño y microARN | Rápido y totalmente automático | |
|---|---|---|---|---|
| Reactivo de ARN de plantas | Minikit de ARN PureLink | Kit de aislamiento de miARN mirVana | Kit de aislamiento de ARN total MagMAX-96 | |
| El más vendido | ✓ | |||
| Tipos de ARN aislado | solo moléculas de ARN grandes | solo moléculas de ARN grandes | Moléculas de ARN grandes y pequeñas | solo moléculas de ARN grandes |
| Tiempo de preparación | 60 minutos | <20 minutos | 30 minutos | < 45 minutos |
| Cantidad de material de partida | Hasta 1 g | <250 mg | De 0,5 a 250 mg | Hasta 10 mg |
| Método de aislamiento | Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol) | Columna de sílice rápida y cómoda | Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación) | Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos |
| Compatible con alto rendimiento | ✓ | |||
| Productos compatibles | Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes | Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes | Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes |
Eliminar polisacáridos
Uno de los principales problemas relacionados con el aislamiento de ARN vegetal es la presencia de biomoléculas problemáticas, como compuestos polifenólicos y polisacáridos. El medio a aislamiento de ARN vegetal Ambion minimiza muchos de estos contaminantes con la adición de polivinilpirrolidona, un polímero de alto peso molecular que se une a polifenolicos y polisacáridos, y con un paso de centrifugación previo a la extracción.
Preservar y estabilizar su ARN
La solución RNAlater se usa ampliamente para la preservación del ARN en tejidos, órganos, células de animales intactos y bacterias. Minimiza la necesidad de procesar inmediatamente las muestras para el aislamiento de ARN o de congelarlas en nitrógeno líquido para su posterior procesamiento.
Recursos técnicos
¿Qué kit de extracción de ARN de tejidos es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Criterio de referencia para ARN intacto y altamente puro | Método sencillo, fiable y rápido | Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt) | Método basado en columnas rápido y cómodo de una entrada de muestras limitada (ARN > 200 nt) | Método rápido y cómodo para especies de ARN pequeño | TRIzol de máxima pureza + purificación de columnas, no se requiere precipitación | Formato HTP, capaz de recuperar ARN de todos los tamaños (incluidos microARN) | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Reactivo TRIzol | Minikit de ARN PureLink | Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96 | Kit de micromuestras de ARN PureLink | Kit de aislamiento de miARN mirVana | Sistema de purificación de ARN TRIZol Plus | Aislamiento de ARN total MagMAX mirVana | |
| El más vendido | ✓ | ||||||
| Método de aislamiento | Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol) | Columna de sílice rápida y cómoda | Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración | Columnas de sílice rápidas y cómodas | Extracción orgánica combinada con prácticas columnas de sílice | Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación) | Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos |
| Tiempo de preparación | 1 hora | 20 minutos | 20 minutos | 20 minutos | 30 minutos | 1 hora | < 1 hora |
| Cantidad de material de partida | Hasta 100 mg | De 10 mg a 100 mg | De 10 células a 10 mg | Hasta 10 mg | Hasta tejido de 250 mg | Hasta 100 mg | Hasta 50 mg |
| Compatible con alto rendimiento | ✓ | ✓ | |||||
| Tamaño de preparación | 100 preparaciones | 50 preparaciones | 96 preparaciones | 50 preparaciones | 96 preparaciones | 50 preparaciones | 96 preparaciones |
Producción de ARN de tejidos animales
El contenido de ARN puede variar ampliamente entre tejidos, tipos de células, estados fisiológicos, etc. En esta tabla se proporcionan directrices generales para estimar las producciones de ARN de una variedad de células y tejidos.
Tabla 1. Producción de ARN total habitual de 1 mg de varios tejidos.
Preservar y estabilizar su ARN
La solución RNAlater se usa ampliamente para la preservación del ARN en tejidos, órganos, células de animales intactos y bacterias. Elimina la necesidad de procesar inmediatamente las muestras para el aislamiento de ARN o de congelarlas en nitrógeno líquido para su posterior procesamiento.
Recursos técnicos
- Conceptos básicos: Aislamiento de ARN
- Aislamiento de ARN total de tejidos difíciles
- Consejos desde la mesa de trabajo: Efecto de los ciclos de congelación y descongelación de tejido sobre la integridad del ARN
- Interrupción del tejido sin manos
- Aumento de la recuperación de ARN durante la extracción de tejidos o células
¿Qué kit de extracción de ADN de levadura es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Rápido y totalmente automático | Rápido y fácil de utilizar | Diseñado para paredes celulares rígidas de levadura manteniendo los perfiles de expresión | Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt) | |
|---|---|---|---|---|
| Kit Platinum Taq MagMAX de aislamiento de ARN total para micromatrices | Minikit de ARN PureLink | Kit RiboPure-Yeast | Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96 | |
| El más vendido | ✓ | |||
| Incluye gránulos especializados para lisis celular | No | No | Gránulos de circón | No |
| Método de aislamiento | Formato ampliable y flexible para la máxima pureza; incluye extracción orgánica y gránulos magnéticos | Columna de sílice rápida y cómoda | Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica | Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración de 96 pocillos |
| Tiempo de preparación | < 1 hora | 20 minutos | 90 minutos (incluye tratamiento de ADNasa) | 20 minutos |
| Cantidad de material de partida | Hasta 5 x 106 células | Hasta 5 x 108 células | Hasta 3 x 108 células | 1,8 ml de células de levadura frescas en fase logarítmica (OD660=0,6-0,8) |
| Compatible con alto rendimiento | ✓ | |||
| Tamaño del kit | 96 preparaciones | 50 preparaciones | 50 preparaciones | 96 preparaciones |
Recursos técnicos
A diferencia de las células eucariotas, la levadura y muchas cepas bacterianas están protegidas por paredes celulares que pueden ser difíciles de alterar. Como primer paso, se requiere una lisis celular efectiva (normalmente mediante interrupción mecánica o pretratamiento enzimático) antes de cualquier procedimiento de aislamiento de ARN.
Una gama de productos desarrollados por los expertos en ARN de Ambion le ayudará a aislar una elevada producción de ARN puro e intacto de bacterias y levadura.
¿Qué kit de aislamiento de ARN bacteriano es adecuado para usted?
| Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | Pedir ahora | |
| Sin procedimientos de lisis | Rápido y fácil, 20 min | Formato de placas de filtración basado en columna de sílice rápida y cómoda | HTP, 45 min | Ideal para bacterias + gram difíciles de lisar | |
|---|---|---|---|---|---|
| Kit de aislamiento de ARN bacteriano TRIzol Max con reactivo de mejora bacteriana TRIZol & Max | Minikit de ARN PureLink | Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96 | Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales MagMAX | Kit RiboPure-Bacteria | |
| El más vendido | ✓ | ||||
| Incluye gránulos especializados para lisis celular | No | No | No | Gránulos de circón | Gránulos de circón |
| Método de aislamiento | Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol) | Columna de sílice rápida y cómoda | Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración de 96 pocillos | Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos | Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación) |
| Tiempo de preparación | 1 hora | 20 minutos | 20 minutos | 45 minutos | 1 hora |
| Cantidad de material de partida | Hasta 1 x 108 células | Hasta 1 x 109 células | Hasta 1 x 109 células | Hasta 0,3 g de muestras sólidas o 175 µl de muestras líquidas | Hasta 109 células |
| Compatible con alto rendimiento | ✓ | ✓ | |||
| Tamaño del kit | 100 preparaciones | 50 preparaciones | 96 preparaciones | 100 preparaciones | 50 preparaciones |
Recursos técnicos
El análisis vírico de muestras biológicas (animales, insectos, plantas, hongos, bacterias) y ambientales (agua, aire, alimentos) se realiza cada vez más utilizando estrategias de análisis molecular que requieren ARN o ADN vírico de las muestras que se están analizando. La purificación de ARN vírico plantea desafíos únicos para la obtención de una buena sensibilidad de recuperación y detección. Los expertos en ARN de Ambion han desarrollado productos de purificación de ARN optimizados para proporcionar la máxima producción, pureza e integridad de ARN vírico de una amplia gama de tipos de muestras en varias opciones de formato.
«El ARN vírico altamente concentrado del minikit de ADN/ARN vírico PureLink proporciona una herramienta para un análisis posterior más sensible y delicado de genomas víricos»
Dr. Dongning Wang, en el laboratorio de Feng Gao, MD, Duke Human Vaccine Institute, Universidad de Duke
Especificaciones del producto
| Aplicación posterior más adecuada | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Producto | Formato | RT-PCR en tiempo real | Análisis de micromatrices | Secuenciación | Northern blot | Clonación |
ARN total | ||||||
| Minikit de ADN/ARN vírico PureLink | Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice | ✓ | ✓ | |||
| Kit RNAqueous | Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice | ✓ | ✓ | ✓ | ||
| Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX AI⁄ND | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas | ✓ | ✓ | |||
| Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96 AI⁄ND | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización | ✓ | ✓ | |||
ADN/ARN | ||||||
| Kit de purificación de ADN/ARN vírico PureLink Pro 96 | Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización | ✓ | ||||
| Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales MagMAX | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización | ✓ | ✓ | |||
| Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96 | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización | ✓ | ✓ | |||
| AN vírico Dynabeads SILANE | Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos, compatible con automatización | |||||
| Kit de virus iPrep PureLink | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, compatible con automatización | ✓ | ||||
| Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas | ✓ | ||||
| Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96 (5 x 96 reacciones) | Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización | ✓ | ||||
Micro ARN | ||||||
| Kit de aislamiento de miARN mirVana | Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice | ✓ | ||||
| Kit de aislamiento mirVana miRNA (sin fenol - se debe adquirir por separado) | Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice | ✓ | ||||
| Reactivo TRIzol LS | Lisis en reactivo TRIzol, reactivo de un paso | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | |
ARNm | ||||||
| Kit Dynabeads mRNA DIRECT | Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos | ✓ | ✓ | |||
| Microkit Dynabeads mRNA DIRECT | Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos | ✓ | ✓ | |||
Proteja su ARN y manténgalo a salvo
Explore cómo puede evitar, detectar e inhibir las ARNasas.