方法轉移
梯度延遲
加熱模式
管柱外體積
資源
聯絡我們

方法轉移為將分析方法調整到不同的 HPLC 系統。兩種儀器越相似，這個過程就越簡單。

常見的方法轉移類型包括將 HPLC 方法轉換為 UHPLC 方法以最佳化速度和通量。其他情況包括將經驗證的方法從一個實驗室轉移到另一個實驗室，例如研發轉移到營運或臨床實驗室。

無論系統相似性如何，儀器到儀器的轉移通常會因硬體和軟體技術的差異而造成變異性，特別是對於來自不同製造商的系統。 

影響方法轉移的硬體參數

諸如梯度延遲體積、幫浦類型、管柱加熱模式、偵測器分析槽體積、偵測器設定和管柱外體積等參數，會影響轉移之方法的再現性。 在方法轉移期間克服挑戰並達到相等結果的最佳方法，是在轉移期間考量系統的完整參數。

梯度延遲體積 (GDV)    

梯度延遲體積是從洗脫液混合點到管柱頭的體積。

  • 儀器 GDV 在成功的 HPLC 或 UHPLC 方法轉移中扮演核心角色。 深入瞭解 ›
  • 修改不同儀器的 GDV 可能會改變解析度和滯留時間，因此變更 GDV 是方法轉移的標準解決方案。深入瞭解 ›

由於所有儀器的 GDV 都是不同的，因此匹配體積差異並不一定是個簡單的工作。

影響梯度延遲體積的因素

GDV 會受到移動相混合點與管柱頭之間所有體積影響，但幫浦通常影響最大。除了混合器容積外，由於低壓混合幫浦的 GDV 明顯高於高壓混合幫浦，因此幫浦類型是極為重要的。

樣本體積和周圍移動相的混合效應也與新系統的峰形重建有關。小的管道尺寸有助於減少管柱前後的峰擴散。體積較大可改善樣本塞的管柱前混合，如果樣本溶劑的洗脫強度較高，則產生正面影響，尤其是早期的洗脫峰。

轉移方法時，偵測器分析槽體積值得注意，因為所有體積都會影響偵測前峰擴散。分析槽體積應較峰體積小，且偵測器設定必須一致且能夠投射出正確的形狀。    

加熱模式的影響

在方法轉移過程中，恆溫或加熱管柱和移動相的作用常常被低估。

不同的管柱加熱模式 (如靜止空氣和加壓空氣) 以及管柱前加熱，會因徑向或軸向溫度梯度而對分離選擇性產生不同影響。在超過 400 巴的壓力中進行分離時，柱體材料會摩擦生熱，此種影響尤其明顯。

管柱外體積影響

確保新儀器的管柱外體積 (ECV) 與原始系統相符，可讓您成功轉移方法，而無需重新驗證。

管柱前體積會擴大樣本塞並柔化梯度。管柱後體積只會影響分析物條帶加寬。管柱前後的體積都會影響分析物的滯留時間。

值得注意的是，與 HPLC 方法相比，UHPLC 方法中的資料變異性較為明顯。在方法轉移期間，請務必考量 ECV 的變化，尤其是在不同系統型號和製造商之間轉移既定方法時。 

不可忽略在方法轉移中遇到滯留時間再現性和其他問題的複雜性和可能性。為避免程序中的挫折，您應仔細分析方法參數、系統功能和相容性。以下是一些專家資源，可協助您準備轉移方法，並疑難排解任何問題。

將 HPLC 或 UHPLC 方法從一台儀器移轉到另一台儀器，不必有壓力。這段影片將傳授各種專家秘訣以及最佳做法，可用來協助使 LC 方法轉移過程順利。

 
 
 
常見問題

HPLC 的方法轉移是什麼？

方法轉移為將分析方法調整到不同的 LC 系統。常見的情況包括將 HPLC 方法轉換為 UHPLC 方法，以最佳化速度和通量。其他情況包括將經驗證的方法從 R&D 部門轉移至營運或臨床實驗室。 

* 必填欄位

Style Sheet for Global Design System
CMD Wide-format style fixes
Style Sheet for Global Design System
Style Sheet for Komodo Tabs
CMD SchemaApp code