Search Thermo Fisher Scientific
HPLC 管柱
樣本進入流路後，移動相會將樣本帶到管柱，並於此發生分離。
層析管柱可在環境空氣中運作，但通常為恆溫並安裝在有溫控的管柱隔間內運作。 適當的管柱溫度控制對於保持滯留時間精準度、選擇性和分離效率至關重要。
應記住的通則是，當管柱溫度升高時，會降低分析物滯留，導致更快的分離。
HPLC 系統組件
相關資源
HPLC 管柱如何運作
樣本混合物以不同速率在管柱上洗脫和分離的示意圖。
HPLC 管柱包含與支撐材料 (通常是多孔二氧化矽顆粒) 結合的固定相，以提供較大的表面積。固定相提供分離樣本成分的基底。
當移動相將樣本移動通過管柱時，固定相的化學組成決定樣本成份粘附或滯留在管柱上的親和力。因此，樣本成份會以不同的速率穿越管柱及洗脫。
例如，您可以觀察到含多種成分的混合物 (A)，其呈現為管柱正面或頭部的灰色帶狀。
當移動相將混合物移動通過管柱時，紅色成分 (B) 滯留的強度超過紫色。因此，紫色和藍色成分在管柱中移動較快，也是從管柱中洗出的最初幾個條帶 (C)。綠、黃和紅色帶會滯留較久，並較晚洗出 (D)。
如何選擇正確的 HPLC 管柱
樣本的物理化學特性、固定相化學特性、移動相組成、流速和管柱溫度會決定成分穿過層析管柱的速率。有多種固定相化學特性與管柱規格 (例如長度、內徑與支撐顆粒大小) 供研究人員選擇。
管柱類型 | 固定相 | 移動相 | 應用 |
逆相 (RP) | 非極性，例如 C18 或苯基 | 水與極性有機溶劑的混合物 | 大部分 HPLC 分離都適用 |
正相 (NP) | 極性，如未結合的二氧化矽 | 弱極性的有機溶劑混合物 | 非水溶性樣本和異構物 |
親水性交互作用 (HILIC) | 極性，如二氧化矽或醯胺結合相 | 水與非極性有機溶劑的混合物 | 逆相液相層析難以滯留的高極性樣本 |
離子交換 (IEX) | 可電離化學基 | 通常是鹽加緩衝液的水溶液 | 可離子化的樣本和大型生物分子 |
離子對 | 非極性逆相管柱 | 非極性條件加上離子配對試劑 | 逆相不易滯留的酸或鹼 |
掌性 | 掌性化學基，例如多醣或環糊精 | 分析物和 SP 依存，可以是 RP、NP、極性有機物等 | 鏡像異構物的分離/純化，例如外消旋藥物混合物 |
疏水性交互作用 (HIC) | 非極性，短烷基鏈或苯基 | 高鹽緩衝液梯度，非變性條件 | 蛋白質，通常是抗體 |
大小排阻 (SEC) | 惰性管柱，例如右旋糖酐聚合物 | 可與水性或有機移動相搭配使用 | 大型生物分子或合成聚合物 |
利用我們的數位 LC 管柱選擇指南，輕鬆找到正確的管柱 ›
常見問題
大多數常見的 HPLC 管柱由不銹鋼製成，並填充有通常經過修飾的多孔二氧化矽顆粒，例如，C18 鍵結是逆相 HPLC 中的常見類型。然而，HPLC 管柱硬體和填料種類繁多。
在開始新分析之前，請考慮分析物的物理和化學特性、分析模式，以及分析物與層析相表面的交互作用方式。
聯絡我們
* 必填欄位
Style Sheet for Komodo Tabs
Style Sheet for Global Design System
CMD Wide-format style fixes
Style Sheet for Global Design System
Style Sheet for Komodo Tabs
CMD SchemaApp code