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反轉錄 |
反轉錄是將RNA分子轉錄成互補DNA的過程。這種cDNA合成反應是由稱為反轉錄酶（簡稱RTs）的酵素所調控。小鼠白血病病毒（Moloney murine leukemia virus, M-MLV）反轉錄酶是分子生物學實驗流程中常用的反轉錄酶之一。為了獲得更佳的效率、增強的熱穩定性和更高的cDNA產量，現今經基因工程改造的新型反轉錄酶則更受矚目。
反轉錄酶的工作原理？
反轉錄反應需透過多個步驟來合成cDNA。反轉錄酶表現出多種不同的生化活性，主要是RNA依賴性DNA聚合酶活性，和RNase H活性。首先，在有黏合引子的情況下，反轉錄酶與RNA模板相結合。下一步，RNA依賴性DNA聚合酶活性透過摻入反應混合物中的dNTP來合成cDNA。反應生成得到cDNA:RNA雜交體，此過程稱為第一鏈cDNA合成。如果反轉錄酶具有RNase H活性（如原生型M-MLV反轉錄酶），則cDNA:RNA雜交體中的RNA模板會在第一鏈合成過程中被降解。經過基因工程改造的反轉錄酶，通常具有更低的RNase H活性，以防止RNA模板過早被降解。
反轉錄酶和cDNA合成試劑盒
根據您的實驗應用需求，從各種反轉錄單酶、預混液、cDNA合成試劑盒、引子和dNTP溶液中進行選擇。Invitrogen SuperScript IV系列產品，可幫助您於從任何類型的模板RNA中合成出色的cDNA。
使用選擇工具指南，選擇合適的產品來滿足您的cDNA合成需求。
Invitrogen SuperScript系列產品是所有cDNA合成實驗的理想選擇。SuperScript IV反轉錄酶提供一流的性能，包括熱穩定性、高持續合成能力和優異的cDNA產量，且有多種規格可供選擇。
採用VILO（Variable Input, Linear Output, 可變性輸入、線性輸出）技術製作的第一鏈cDNA合成預混液，是兩步法RT-qPCR實驗應用的理想選擇。這款預混液以其卓越的靈敏度、出色的線性度和較短的反應時間而聞名。
一步法RT-PCR試劑盒經過優化，可在一個步驟中完成cDNA合成和擴增。這種一步法實驗方案通常更快、流程更簡單，且適合高通量實驗應用。
省略RNA分離步驟，加快cDNA合成。直接反轉錄產品可針對使用最少單個細胞樣品，在單一反應管中完成細胞裂解和cDNA合成。
引子和核苷酸對於每個cDNA合成實驗都至關重要。因此我們提供預先設計和客製化的引子。
經濟實惠的第一鏈cDNA合成試劑盒，是RT-PCR、RT-qPCR和微陣列應用的首選。
Thermo Scientific提供一系列反轉錄試劑，實驗結果可靠，價格最超值。
探索多種級別的無核酸酶水— DEPC水、無核酸酶水（未經DEPC處理）和RT-PCR級別的水。
相關資源
技術支援
PCR和cDNA合成支援中心
為cDNA合成實驗的每個步驟提供支援。
Tm 計算器
計算引子的Tm （熔解溫度）和黏合溫度的便捷工具。
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OEM和客製化解決方案
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僅供研究用途。不得用於診斷程序。