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O conhecimento da arquitetura 3D complexa de células e tecidos em seu contexto nativo é essencial para entender as relações biológicas entre função e estrutura. A Thermo Fisher Scientific oferece uma nova solução de imagens de face de bloco seriais (SBFI) com excelente resolução Z que combina microscopia eletrônica de varredura de deconvolução de várias energias (MED-SEM) com seccionamento in situ. A automação e a facilidade de uso aumentam a produtividade, independentemente do nível de experiência, garantindo resolução isotrópica às amostras de grande volume.
Até agora, a resolução axial na imagem serial de face de bloco limitava-se à espessura mínima do seccionamento físico de um micrótomo em câmara. No entanto, com a adição da SEM de deconvolução de várias energias (MED-SEM), o nosso novo método de análise de grande volume agora permite a formação de imagens com resolução 3D verdadeiramente isotrópica. O seccionamento mecânico e o óptico são combinados; os dados são adquiridos a partir de várias camadas da amostra pela aplicação de diferentes energias de feixe entre cortes físicos. Detectores otimizados e operação em baixo vácuo garantem imagens de alta qualidade. Além disso, o software de aquisição fornece automação de processos que variam desde a configuração e o alinhamento de baixo nível até a aquisição de uma série de imagens completa. Essa abordagem inclui um fluxo de trabalho completo, desde a configuração inicial até os resultados finais, fornecendo soluções de software para análise de grande área/volume, sobreposição de imagem de microscopia de luz, reconstrução, visualização e segmentação.
Isotropic 3D data from large sample volumes with serial block-face imaging or FIB milling.
Zebrafish embryo head imaged with large volume analysis.
Imagem de retina de camundongo com análise de grande volume. Dimensões: 9,65 x 10 x 25 µm; resolução isotrópica de 10 nm no modo HiVac; 1,18/1,78/2,27 kV, 100 pA; tempo de permanência de 1 µs; 250 imagens.
Imagem da cabeça de embrião de peixe zebra feita com análise de grande volume. Dimensões: 350 x 350 x 82,9 µm. 42 x 42 nm pixels no modo LoVac, 2 kV, 100 pA, tempo de permanência de 3 µs, 829 imagens a 100 nm. Amostra de cortesia da Robbert Creton, Universidade de Brown.
Cérebro de rato: volume 85 x 85 x 123 µm; 2,7 kV, 400 pA, tempo de permanência de 2 µs, 15 x 15 x 40 nm, 2133 imagens em LoVac. Amostra de cortesia de Grahame Knott, EPFL Lausanne. Segmentação e visualização de dados pelo software Amira da Thermo Scientific.
Como funciona
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Imagem de retina de camundongo com análise de grande volume. Dimensões: 9,65 x 10 x 25 µm; resolução isotrópica de 10 nm no modo HiVac; 1,18/1,78/2,27 kV, 100 pA; tempo de permanência de 1 µs; 250 imagens.
Imagem da cabeça de embrião de peixe zebra feita com análise de grande volume. Dimensões: 350 x 350 x 82,9 µm. 42 x 42 nm pixels no modo LoVac, 2 kV, 100 pA, tempo de permanência de 3 µs, 829 imagens a 100 nm. Amostra de cortesia da Robbert Creton, Universidade de Brown.
Cérebro de rato: volume 85 x 85 x 123 µm; 2,7 kV, 400 pA, tempo de permanência de 2 µs, 15 x 15 x 40 nm, 2133 imagens em LoVac. Amostra de cortesia de Grahame Knott, EPFL Lausanne. Segmentação e visualização de dados pelo software Amira da Thermo Scientific.
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A microscopia eletrônica de transmissão (TEM) é usada quando a natureza da doença não pode ser estabelecida por métodos alternativos. Com a geração de imagens nanobiológicas, a TEM fornece informações precisas e confiáveis para determinadas patologias.
Pesquisa de biologia vegetal
A pesquisa fundamental da biologia vegetal é possível devido à microscopia crioeletrônica. Ela fornece informações sobre proteínas (com análise de partículas únicas), sobre seu contexto celular (com tomografia), até a estrutura geral da planta (análise de volume grande).
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