Produtos para pesquisa de Exossomos

O que são exossomos?

Exossomos são pequenas vesículas (30 a 150 nm) com conteúdo sofisticado de RNA e proteínas, quesão constantemente secretados por todas as células in vitro e in vivo. Os exossomos têm muitas funções intrigantes dentro do corpo humano, incluindo comunicação e sinalização intercelular. Essas vesículas extracelulares têm se tornado o foco de interesse exponencialmente crescente, direcionado a entendersuas funções biológicas e usá-los em aplicações práticas, como desenvolvimento de diagnósticos não invasivos e terapias avançadas. Oferecemos uma gama de produtos e ferramentas para isolamento, caracterização e análise de exossomos e seu conteúdo de RNA e proteínas, bem como para monitoramento in vitro e in vivo, para ajudar você a aprofundar a compreensão sobre essas entidades fascinantes.

Isolamento de exossomo total

Protocolos de ultracentrifugação podem ser tediosos e demorados. Agora, você pode isolar facilmente exossomos intactos, a partir de meios de cultura de células ou qualquer fluido do corpo, usando os reagentes de Isolamento de Exossomo Total flexíveis e escalonáveis. Esses produtos e protocolos que os acompanham são ideais para uma grande variedade de experimentos, incluindo processamento de volumes baixos de amostras e manipulação de amostras múltiplas.

Exosomes isolation flow from incubation to assays and analysis

Isolamento de subpopulações de exossomos

Exossomos totais enriquecidos a partir da cultura de células (utilizando os reagentes de Isolamento de Exossomo Total ou ultracentrifugação) podem ser ainda mais purificados em subpopulações específicas por meio de captura imunomagnética. Use os reagentes da Dynabeads específicos de CD9, CD63, CD81, ou EpCam ou combine Reagente estreptavidina com o anticorpo biotinilado de sua escolha, para purificar qualquer população com base num antígeno da superfície.

Isolation of exosome subpopulations flow from sample to analysis

Análise intacta do exossomo

A análise de exossomos é muito desafiadora devido ao seu pequeno tamanho de 30-150 nm. Existem alguns métodos, no entanto, que podem ser usados para análise.

Instrumento NanoSight - Os exossomos recuperados com o reagente Total Exosome Isolation podem ser dimensionados e contados usando um instrumento NanoSight. Ferramentas alternativas estão disponíveis na ParticleMetrix, Izon e Malvern.
Microscopia de luz - RNA exossômico ou componentes de membrana podem ser marcados, permitindo a visualização de exossomos ao microscópio. As colunas de rotação especializadas da Invitrogen estão disponíveis para remover corantes não incorporados. Essas colunas também permitem troca rápida de tampão, dessalinização ou remoção de contaminantes de baixo peso molecular (<MW 3000).
Microscopia eletrônica (EM) - Uma das vantagens de usar a tecnologia de separação magnética Invitrogen Dynabeads para extrair subpopulações exossômicas puras é que você pode executar diretamente a análise EM. Você pode analisar subconjuntos de exossomos totais enriquecidos em cultura de células usando Invitrogen CD9, CD63, CD81, ou EpCam-reagente específico ou use o reagente Invitrogen Streptavidin em combinação com a sua escolha de anticorpo biotinilado.
Citometria de fluxo - A captura imunomagnética de exossomos na superfície das Dynabeads permite uma detecção clara e definida de FFC / SSC, normalmente em menos de uma hora. Você pode analisar subconjuntos de exossomos totais enriquecidos em cultura de células usando o reagente específico para CD63 ou usar o reagente estreptavidina em combinação com a sua escolha de anticorpo biotinilado.

Isolamento e análise de cargas exossômicas

Demonstrou-se que os exossomos transportam uma gama de moléculas entre diferentes tipos de células. Sua carga inclui várias proteínas, mRNA (fragmentos e comprimento total), rRNA, tRNA, miRNA e ncRNA.

Isolamento de RNA e proteínas - A purificação do RNA total ou a recuperação de proteínas e RNA da mesma amostra de exossomos pré-enriquecidos pode ser alcançada usando o RNA do exossoma total da Invitrogen e o kit de isolamento de proteínas. O kit é compatível com todos os protocolos para isolamento de exossomos.
Análise de proteínas - Anticorpos monoclonais específicos (CD9, CD63 e CD81) permitem a detecção de antígenos celulares e exossômicos por análise de Western blot. Se você deseja comparar várias amostras de proteínas no mesmo gel e deseja manter intactos os complexos de proteínas exossômicas, verifique o método rápido e suave de imunoprecipitação à base de Dynabeads, usando a proteína A do Invitrogen ou a proteína G em combinação com o anticorpo primário de sua escolha.
Análise de RNA - O RNA exossômico e os componentes da membrana podem ser marcados com corantes fluorescentes, enquanto o corante não incorporado pode ser facilmente eliminado com as colunas de centrifugação Invitrogen. O RNA exossômico recuperado usando o RNA total do exossomo e o Kit de isolamento de proteínas pode ser analisado por qRT-PCR usando os ensaios TaqMan da Applied Biosystems, sequenciamento de RNA ou ferramentas de sequenciamento de última geração. O RNA exossômico e os componentes da membrana podem ser marcados com corantes fluorescentes, enquanto o corante não incorporado pode ser removido usando colunas de centrifugação Invitrogen.

Gibco Exosome-Depleted FBS significantly outperforms existing exosome-depleted FBS products on the market.

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Isolação de exossomos

Isolamento de exossomo total

Isolamento de subpopulações de exossomos

Intact exosome analysis

Análise intacta do exossomo

A análise de exossomos é muito desafiadora devido ao seu pequeno tamanho de 30-150 nm. Existem alguns métodos, no entanto, que podem ser usados para análise.

Instrumento NanoSight - Os exossomos recuperados com o reagente Total Exosome Isolation podem ser dimensionados e contados usando um instrumento NanoSight. Ferramentas alternativas estão disponíveis na ParticleMetrix, Izon e Malvern.
Microscopia de luz - RNA exossômico ou componentes de membrana podem ser marcados, permitindo a visualização de exossomos ao microscópio. As colunas de rotação especializadas da Invitrogen estão disponíveis para remover corantes não incorporados. Essas colunas também permitem troca rápida de tampão, dessalinização ou remoção de contaminantes de baixo peso molecular (<MW 3000).
Microscopia eletrônica (EM) - Uma das vantagens de usar a tecnologia de separação magnética Invitrogen Dynabeads para extrair subpopulações exossômicas puras é que você pode executar diretamente a análise EM. Você pode analisar subconjuntos de exossomos totais enriquecidos em cultura de células usando Invitrogen CD9, CD63, CD81, ou EpCam-reagente específico ou use o reagente Invitrogen Streptavidin em combinação com a sua escolha de anticorpo biotinilado.
Citometria de fluxo - A captura imunomagnética de exossomos na superfície das Dynabeads permite uma detecção clara e definida de FFC / SSC, normalmente em menos de uma hora. Você pode analisar subconjuntos de exossomos totais enriquecidos em cultura de células usando o reagente específico para CD63 ou usar o reagente estreptavidina em combinação com a sua escolha de anticorpo biotinilado.

Cargo isolation & analysis

Isolamento e análise de cargas exossômicas

Isolamento de RNA e proteínas - A purificação do RNA total ou a recuperação de proteínas e RNA da mesma amostra de exossomos pré-enriquecidos pode ser alcançada usando o RNA do exossoma total da Invitrogen e o kit de isolamento de proteínas. O kit é compatível com todos os protocolos para isolamento de exossomos.
Análise de proteínas - Anticorpos monoclonais específicos (CD9, CD63 e CD81) permitem a detecção de antígenos celulares e exossômicos por análise de Western blot. Se você deseja comparar várias amostras de proteínas no mesmo gel e deseja manter intactos os complexos de proteínas exossômicas, verifique o método rápido e suave de imunoprecipitação à base de Dynabeads, usando a proteína A do Invitrogen ou a proteína G em combinação com o anticorpo primário de sua escolha.
Análise de RNA - O RNA exossômico e os componentes da membrana podem ser marcados com corantes fluorescentes, enquanto o corante não incorporado pode ser facilmente eliminado com as colunas de centrifugação Invitrogen. O RNA exossômico recuperado usando o RNA total do exossomo e o Kit de isolamento de proteínas pode ser analisado por qRT-PCR usando os ensaios TaqMan da Applied Biosystems, sequenciamento de RNA ou ferramentas de sequenciamento de última geração. O RNA exossômico e os componentes da membrana podem ser marcados com corantes fluorescentes, enquanto o corante não incorporado pode ser removido usando colunas de centrifugação Invitrogen.

Exosome-depleted FBS