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Purificação do vírus SARS-COV-2 íntegro.
Para estudos funcionais do SARS-COV-2, como taxa de crescimento e infectividade, é necessário vírus vivo íntegro. Os vírus podem estar presentes em concentrações muito baixas em amostras como meios de cultura de células e águas residuais. Para realizar análises downstream, muitas vezes é necessário purificar e concentrar o vírus da matriz de amostras.
Métodos de purificação de vírus íntegro
Os coronavírus, como o SARS-COV-2, podem ser facilmente purificados e concentrados em um volume menor por precipitação seguida de centrifugação, ou usando-se esferas magnéticas. Cada método de purificação de vírus tem benefícios específicos e, portanto, sua escolha dependerá de suas necessidades.
Purificação de vírus por precipitação
A adição do Invitrogen Virus Precipitation Reagent a uma amostra diluída resulta na saída forçada de componentes menos solúveis (ou seja, o vírus) para fora da solução. O vírus precipitado é coletado depois de uma breve centrifugação. Não é necessário usar ultracentrifugação. Esse processo de purificação de vírus é simples e adequado para um grande volume de material de partida e requer apenas cerca de três horas com tempo mínimo de operação manual.
Purificação de vírus por esferas magnéticas
Métodos baseados em esferas magnéticas envolvem expor a amostra contendo vírus a esferas magnéticas de tamanho mícron que têm uma superfície de troca de ânions forte. Depois de misturar por dez minutos, as esferas ligadas ao vírus são coletadas por meio de ímã, lavadas e eluídas em um pequeno volume, para produzir vírus concentrado. A purificação de vírus por esferas magnéticas através do Dynabeads Intact Virus Enrichment magnetic é uma maneira rápida, conveniente e automatizável de concentrar soluções que contêm vírus.
Kits de concentração de vírus para pesquisa de SARS-COV-2
A Thermo Fisher Scientific oferece dois produtos otimizados para purificação de vírus SARS-COV-2.
Os dois métodos de purificação de vírus são adequados para vírus SARS-COV-2 vivo ou inativado, partículas semelhantes ao vírus SARS-COV-2 (VLPs), outros vírus envelopados e vesículas presentes em meios de cultura celular, meios de transporte de vírus e amostras de águas residuais.
O vírus SARS-COV-2 purificado pode ser usado em:
- Estudos funcionais
- Análise de proteínas (por exemplo, western blot)
- Pesquisa de ácido nucleico (por exemplo, RT-qPCR)
Métodos de purificação de vírus íntegro
 Intact Virus Precipitation Reagent (otimizado para SARS-COV-2) |  Enriquecimento de vírus íntegropor dynabeds (otimizado para SARS-COV-2) | |
| Benefícios |
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| Ideal para | Amostras de grande volume |
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| No de amostras/execução | 1 a 24 (determinado pelo tamanho/capacidade da centrífuga) |
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| Tempo total de processamento | Aproximadamente 3 horas (ou incubação overnight, se preferir) | 20 a 30 minutos |
| Compatível com automação | Não | Sim |
| No. Cat | 10720D | 10700D |
Vídeos sobre purificação de vírus
Purificação de vírus usando Invitrogen Intact Virus Precipitation Reagent
Purificação de vírus usando Invitrogen Dynabeads Intact Virus Enrichment
Protocolos de concentração de vírus KingFisher otimizados para SARS-COV-2
Faça o download dos protocolos KingFisher aqui:
- Arquivo de protocolo de enriquecimento de vírus íntegrocom dynabeds KingFisher Duo Prime (.bdz)
- Arquivo de protocolo de enriquecimento de vírus íntegro com dynabeds KingFisher Flex (.bdz)
Informações sobre encomenda de produtos para purificação de vírus
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Recursos para purificação e testes de SARS-COV-2
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.