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O qPCR multiplex é uma solução simples, eficiente e eficaz para superar os desafios de amostras limitadas e análise cara. O qPCR multiplex bem-sucedido permite a amplificação de mais de um alvo em uma única reação, usando diferentes reporters com espectros de fluoresnência distintos e possibilitando menos uso de suas amostras preciosas em cada experimento.
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Temos orgulho de oferecer uma solução qPCR completa multiplex que permite executar uma reação de até 4 plex para expressão do gene e uma reação duplex para análise de genotipagem. Nossa solução inclui até quatro fluoróforos otimizados para trabalhar juntos com sobreposição espectral mínima, uma sonda TaqMan customizada com o novo quencher QSY, uma gama de master mixes para qPCR e placas de calibração espectral. Isso tudo, em combinação com nossos serviços e instrumentos e software de PCR em tempo real, reduzem o tempo necessário para otimizar seu qPCR multiplex.
Saiba mais sobre o quencherQSY não fluorescente disponível para projetos multiplex.
O qPCR multiplex permite obter mais informações com uma única reação. Isso é particularmente importante, quando a entrada de amostras é limitada, ou quando é necessário minimizar os custos de análise das amostras.
O multiplex oferece uma forma de reduzir os custos da reação em até 40%. Os custos relativos da reação multiplex são muito mais próximos aos custos de uma reação singleplex e oferecem economia significativa em comparação aos custos da realização de 4 reações singleplex de forma independente.
A solução multiplex TaqMan consiste em cinco componentes:
Os fluoróforos ABY e JUN, combinados com fluoróforos FAM e VIC, fornecem um conjunto de quatro fluoróforos cujos comprimentos de ondas espectrais estão alinhados em proximidade com os canais de filtros encontrados nos instrumentos Applied Biosystems.
O quencher TaqMan, QSY, está, agora, disponível para multiplex ideal de alto nível com o melhor desempenho em reações de 3 e de 4 plex.
Applied Biosystems Master mix TaqMan Multiplex, Master mix TaqPath 1-step Multiplex* e Master mix TaqPath ProAmp* são formuladas para permitir que todas as amplificações ocorram, apesar da competição entre as reações. Eles contêm o fluoróforo Mustang Purple, um corante de referência passiva que é usado para normalização, no lugar do corante ROX. Versões sem ROX também estão disponíveis.
Placas de calibração estão disponíveis em diferentes formatos e são adequados para uso com os seguintes sistemas de PCR em tempo real: o portfólio de instrumentos QuantStudio, o sistema ViiA 7 e os sistema de PCR em tempo real 7500 e 7500 Fast.
Determine suas opções de sondas
Ao iniciar um novo projeto, recomendamos desenhar os ensaios usando sondas TaqMan QSY e os fluoróforos reporters FAM, VIC, ABY e JUN. Consulte o Guia de otimização multiplex TaqMan para recomendações de desenho e sobre aconselhamento sobre otimização de seus experimentos de qPCR multiplex.
Redesenhe e peça ensaios, primers e sondas
Redesenhe: Use o software Primer Express™ e as recomendações do Guia de otimização multiplex TaqMan para desenhar primers e sondas QSY TaqMan ou entre em contato com Custom Services para redesenhar seus ensaios.
Repetir pedido: Recomendamos pedir primers e sondas separadamente, como oligonucleotídeos e sondas individuais, para facilitar a otimização de seus experimentos qPCR multiplex.
Contato: Suporte técnico se precisar de informações para repetir pedido de ensaios com fluoróforos alternativos ou se precisar de ajuda para redesenhar seus ensaios com sondas QSY (taxas adicionais se aplicam).
Escolha e peça o master mix adequado
Use o TaqMan Multiplex Master Mix ou para reações de 1-step, escolha a TaqPath 1-Step Multiplex Master Mix.
Otimização
Depois de ter os reagentes necessários para o seu experimento qPCR multiplex, você pode usar o Guia de otimização multiplex TaqMan para otimizar seus experimentos de expressão gênica e genotipagem.
Determine suas opções de sondas
Ao iniciar um novo projeto, recomendamos desenhar os ensaios usando sondas TaqMan QSY e os fluoróforos reporters FAM, VIC, ABY e JUN. Consulte o Guia de otimização multiplex TaqMan para recomendações de desenho e sobre aconselhamento sobre otimização de seus experimentos de qPCR multiplex.
Redesenhe e peça ensaios, primers e sondas
Redesenhe: Use o software Primer Express™ e as recomendações do Guia de otimização multiplex TaqMan para desenhar primers e sondas QSY TaqMan ou entre em contato com Custom Services para redesenhar seus ensaios.
Repetir pedido: Recomendamos pedir primers e sondas separadamente, como oligonucleotídeos e sondas individuais, para facilitar a otimização de seus experimentos qPCR multiplex.
Contato: Suporte técnico se precisar de informações para repetir pedido de ensaios com fluoróforos alternativos ou se precisar de ajuda para redesenhar seus ensaios com sondas QSY (taxas adicionais se aplicam).
Escolha e peça o master mix adequado
Use o TaqMan Multiplex Master Mix ou para reações de 1-step, escolha a TaqPath 1-Step Multiplex Master Mix.
Otimização
Depois de ter os reagentes necessários para o seu experimento qPCR multiplex, você pode usar o Guia de otimização multiplex TaqMan para otimizar seus experimentos de expressão gênica e genotipagem.
Boletim do produto: TaqPath ProAmp Master Mix
Boletim do produto: TaqMan Multiplex Real-time PCR
Boletim do produto: TaqPath 1-Step Multiplex Master Mix
Boletim do produto: Propósito geral dos reagentes TaqPath
Guia do usuário: Guia de otimização multiplex TaqMan
Nota de aplicação: qPCR multiplex TaqMan
*Para uso do laboratório. Reagente de uso geral.
Para uso em pesquisas somente. Não deve ser usado em procedimentos diagnósticos.