La primera pieza de hardware con la que la fase móvil entra en contacto es la bomba, que empuja la fase móvil con determinado caudal desde el muestreador automático hasta la columna y el detector.

La contrapresión del sistema depende del diseño y el caudal de la bomba, la composición de la fase móvil, la dimensión de la columna y el tamaño de las partículas. La precisión del tiempo de retención es vital para la separación, la identificación y la cuantificación fiables de los analitos.

Gracias a los años de desarrollo tecnológico, las bombas modernas proporcionan una presión de hasta 1500 bares, además de una precisión y exactitud de flujo excelentes. El suministro sin pulsos de los disolventes es esencial para obtener mediciones reproducibles.

La mayoría de las bombas modernas para HPLC tienen por lo menos un par de pistones de vaivén. Un pistón empuja el flujo mientras que el otro aspira la fase móvil al caudal que se haya programado.

El cambio de pistón en las bombas utiliza o bien un motor con un árbol de levas o múltiples motores de accionamiento lineal, uno para cada pistón. Los pistones están colocados en serie o en paralelo, con el último desgaste de distribución justo entre los cabezales de las bombas, si bien esto requiere más válvulas de retención para dirigir el flujo.

En separaciones isocráticas, definidas como aquellas con una composición de la fase móvil constante durante toda la separación, el eluyente se mezcla previamente o se mezcla dentro de la bomba.

Como alternativa, en las separaciones de gradientes, la composición de la fase móvil varía durante el ciclo. Una bomba para HPLC necesita uno de estos dos elementos para empujar los gradientes correctamente: una válvula dosificadora presente en las bombas de gradiente de baja presión (LPG) o una segunda unidad de bomba presente en las bombas de gradiente de alta presión (HPG).

La selección de la bomba óptima para una separación determinada depende de lo que requiera la aplicación  y de la complejidad del analito. Existen cuatro tipos de bombas para un sistema de HPLC:

  • Bombas isocráticas

    Utilizan solo una unidad de bomba y un solo conducto de entrada de disolvente. Son ideales con la detección de índice de refracción para el análisis de garantía y control de la calidad.
  • Bombas binarias

    Utilizan dos unidades de bomba y dos conductos de entrada de disolvente, lo que permite la mezcla a alta presión de dos disolventes distintos. Se utilizan para aplicaciones de LC-MS, UHPLC o HPLC de alto rendimiento y resolución.
  • Bombas cuaternarias

    Utilizan solo una unidad de bomba y cuatro conductos de entrada de disolvente para mezclar hasta cuatro disolventes diferentes. Estas bombas ofrecen la gama de aplicaciones más amplia con una flexibilidad máxima en la composición de la fase móvil.
  • Bombas de gradiente dual

    Contienen dos conductos o canales independientes de entrada de disolventes ternarios, lo que permite realizar dos separaciones de forma simultánea. Las bombas de gradiente dual mejoran el procesamiento de las muestras, aumentan la productividad y permiten el cambio entre aplicaciones sin necesidad de reconexión.

 
 
 
Preguntas frecuentes

Existen diferentes tipos de bombas para HPLC. Las bombas binarias de HPG son las más utilizadas en aplicaciones rutinarias y de alto rendimiento que requieren un gradiente de dos disolventes. Las bombas cuaternarias de LPG se utilizan en el desarrollo de métodos o cuando la flexibilidad es esencial. Las bombas isocráticas se utilizan para aplicaciones sencillas de garantía y control de calidad. Las bombas ternarias de gradiente dual (DGP) se utilizan en soluciones para automatización y flujos de trabajo o en métodos de sistemas dobles.

La mayoría de las bombas modernas para HPLC tienen por lo menos un par de pistones de vaivén. Un pistón empuja el flujo mientras que el otro aspira la fase móvil al caudal que se haya programado.

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