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Los modelos de piel cultivados artificialmente y sin componentes de origen animal son una herramienta importante para simular los efectos de las distintas condiciones en tejidos epidérmicos. Para cultivar dichos modelos de forma eficaz, los investigadores deben inducir a los queratinocitos a diferenciarse en las diversas capas de epidermis, lo que requiere una exposición directa al aire, así como el uso de medios de cultivo que faciliten el crecimiento celular.
Aplicaciones y protocolos de pruebas relevantes:
El sistema de insertos para cultivo celular Thermo Scientific Nunc ofrece una solución altamente fiable, eficaz y efectiva para el cultivo de modelos de epidermis en 3D para su uso en numerosas aplicaciones, desde ensayos de productos del cuidado de la piel hasta la detección clínica de compuestos y formulaciones.
El sistema para el crecimiento de modelos de tejido cutáneo en 3D incluye:
El sistema de insertos de cultivo celular Nunc ofrece un método eficaz para el cultivo de tejido epidérmico en 3D. Las funciones de altura ajustable de la placa portadora Thermo Scientific Nunc simplifican el protocolo experimental, lo que permite ampliar los intervalos de alimentación y ahorrar tiempo y trabajo en el proceso.
Los experimentos iniciales sobre fijación celular y ampliación indican que los insertos de cultivo celular Nunc son un excelente sustrato de crecimiento para los queratinocitos epidérmicos humanos.
En la siguiente imagen, la mancha de hematoxilina y eosina (H&E) muestra la estratificación del modelo de epidermis cultivado con un sistema de insertos de cultivo celular Nunc.
Las dimensiones indicadas representan la altura de la superficie de crecimiento del inserto del cultivo celular desde el fondo interior del pocillo. Las dimensiones de la figura se redondean a la décima de milímetro.
Hemos aprovechado la versatilidad de la placa portadora y hemos probado diferentes posiciones de altura de los insertos junto con los correspondientes aumentos de volumen de medios para diferentes intervalos de cambio de medios cada 2, 3 o 4 días. Esta figura muestra las manchas de H&E del tejido del modelo de piel estratificado tras 12 días de cultivo en una interfaz de aire-líquido con cambios de medio a intervalos variables en placas portadoras con insertos suspendidos sobre los pocillos a tres alturas diferentes. La posición de suspensión más alta a intervalos más largos fue tan efectiva como la posición de suspensión más baja a intervalos más cortos, lo que permitió ahorrar tiempo y esfuerzo durante el establecimiento del tejido cutáneo.
A) Posición de suspensión baja: 0,5 ml de medio por pocillo, alimentación cada 2 días.
B) Posición de suspensión media: 1,0 ml de medio por pocillo, alimentación cada 3 días.
C) Posición de suspensión alta: 1,5 ml de medio por pocillo, alimentación cada 4 días.