Extracción de ARN por tipo de muestra

Independientemente de que esté empezando con células cultivadas o muestras de tejido, o trabajando con plantas, bacterias o células de mamíferos, los kits y reactivos de extracción de ARN Ambion ofrecen el producto adecuado para su investigación. La marca Ambion incluye productos Invitrogen existentes, tales como los fiables reactivos TRIzol y kits de purificación PureLink, junto con los principales productos Ambion, tales como kits y reactivos Cells-to-CT, MagMAX y RNAlater.

¿Qué kit de extracción de ARN de muestra de sangre es adecuado para usted?

	Optimizado para muestras líquidas	Kit especializado agota eritrocitos no nucleados	Formato de placas de filtración con 96 columnas, para necesidades HTP	HTP optimizado para la purificación de muestras de sangre estabilizadas	Formato HTP, capaz de recuperar ARN de todos los tamaños (incluidos microARN)	Alta producción de ARN directamente de sangre completa, sin necesidad de aislar leucocitos
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	TRIzol LS	Kit de sangre de ARN total PureLink	Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96	Kit MagMAX para aislamiento de ARN de tubos de sangre estabilizados	Aislamiento de ARN total MagMAX mirVana	Kit de sangre RiboPure
El más vendido						✓
Reactivos de estabilización compatibles	EDTA, heparina, citrato, RNAlater	EDTA, heparina, citrato	EDTA, heparina, citrato	Tubos Tempus o PaxGene	EDTA o citrato	EDTA, heparina, citrato, RNAlater
Incluye reactivo de estabilización						✓ RNAlater
Método de aislamiento	Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol)	Columna de sílice rápida y cómoda	Columnas de sílice rápidas y cómodas en formato de placas	Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos	Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos	Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación)
Tiempo de preparación	1 hora	20 minutos		12 tubos en 2 horas	≥ 96 muestras en < 1 h	30 minutos
Compatible con alto rendimiento			✓	✓	✓

Para obtener más información sobre cómo trabajar con sangre, consulte nuestros artículos técnicos:

Protocolos adicionales

Consejos desde la mesa de trabajo

¿Afecta el fraccionamiento de muestras de sangre a los niveles de expresión de ARNm?

Artículos de notas técnicas

La purificación de ARN de células cultivadas tradicionalmente ha sido un procedimiento altamente repetitivo, que requiere mucho tiempo y trabajo, y que a menudo implica el uso de productos químicos orgánicos tóxicos. Los productos desarrollados por nuestros expertos en ARN permiten aislar ARN de máximo rendimiento, pureza e integridad utilizando diversas tecnologías (extracción orgánica, columnas de fibra de vidrio, gránulos magnéticos y combinaciones de estas tecnologías).

También puede analizar lisados de células cultivadas sin aislar primero el ARN. En un tiempo significativamente menor, obtendrá resultados de qPCR equivalentes a los de ARN purificado o, en algunos casos, mejores. Los productos Invitrogen como, por ejemplo, la línea de productos Cells-to-CT y Single Cell-to-CT, ofrecen enormes ventajas de rendimiento y manipulación.

¿Qué kit de aislamiento de ARN de células cultivadas es adecuado para usted?

	ARN intacto y altamente puro	Formato basado en columnas rápido y cómodo para ARN (> 200 nt)	Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt)	Método basado en columnas rápido y cómodo de una entrada de muestras limitada (ARN > 200 nt)	Método rápido y cómodo para especies de ARN pequeño	Sistema completo para células a qRT-PCR sin purificación de ARN
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	Reactivo TRIzol	Minikit de ARN PureLink	Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96	Kit de micromuestras de ARN PureLink	Kit de aislamiento de miARN MirVana	Kits Cells-to-CT
El más vendido	✓	✓			✓	✓
Tiempo de preparación	1 hora	20 minutos	20 minutos	20 minutos	30 minutos	< 10 minutos
Método de lisis celular	Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol)	Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad	Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad	Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad	Extracción orgánica seguida de precipitación de alcohol	Lisis Cells-to-CT
Cantidad de material de partida	Hasta 1 x 10⁷ células	De 5 x 10⁶ a 1 x 10⁸ células	De 5 x 10⁶ a 1 x 10⁸ células	Hasta 5 x 10⁵ células	10²-10⁷ células cultivadas	10-100 000 células
Aplicación	Todos los métodos de expresión de ARN	qRT-PCR, NGS	qRT-PCR, NGS	qRT-PCR, NGS	Análisis de micro ARN	qRT-PCR

Preservar y estabilizar su ARN

La solución RNAlater se usa ampliamente para la preservación del ARN en tejidos, órganos, células de animales intactos y bacterias. Elimina la necesidad de procesar inmediatamente las muestras para el aislamiento de ARN o de congelarlas en nitrógeno líquido para su posterior procesamiento.

Recursos técnicos

¿Qué kit de extracción de ARN de muestras de FFPE es adecuado para usted?

	Aislamiento de bajo rendimiento de ARN y ADN de la misma sección de FFPE	Aislamiento ampliable de ARN y ADN de la misma sección de FFPE
	Pedir ahora	Pedir ahora
	Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales RecoverAll para FFPE	Kit MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra
Tiempo de preparación	4,5 horas (tiempo total para 16 muestras) 2,5 horas de tiempo de manipulación	4 horas (tiempo total para 96 preparaciones) 1 hora de tiempo de manipulación
Producto final extraído	ARN total, microARN y ADNg	ARN total, microARN y ADNg
Método de aislamiento	purificación de columnas	purificación de gránulos magnéticos
Requiere desparafinación	✓	✓
Compatible con automatización (posdesparafinización)		✓ (guiones para KF Flex y Duo Prime)
Intervalo de muestras de FFPE compatible	Secciones de hasta 4 x 20 micras (tejido de 300 mm²)	Secciones de hasta 2 x 20 micras (tejido de 300 mm²)
Volumen de muestra	~ 50 µl de ADN purificado ~ 50 µl de ARN purificado	~ 50 µl de ADN purificado ~ 50 µl de ARN purificado
Compatible con paneles de ADN Ion AmpliSeq (p. ej., Cancer Hotspot Panel v2)	✓	✓
Compatible con paneles de ARN Ion AmpliSeq (p. ej., RNA cancer y RNA fusion)	✓	✓

¿Por qué el aislamiento de ARN de FFPE supone un desafío?

La recuperación de ARN de calidad de muestras de FFPE puede ser bastante difícil. El proceso de fijación provoca un enlace cruzado entre los ácidos nucleicos y las proteínas, y modifica de forma covalente el ARN mediante la adición de grupos monometílicos a las bases. Como resultado, las moléculas se vuelven rígidas y susceptibles al cizallamiento mecánico, y los enlaces cruzados pueden poner en peligro el uso del ARN como sustrato para la transcripción inversa. Por tanto, a fin de utilizar tejidos de FFPE como origen para el análisis de la expresión génica, se requiere un método fiable para la extracción de ARN de la matriz entrecruzada.

¿Cómo puede aumentar sus posibilidades de éxito con FFPE?

Existen una serie de factores que pueden afectar a la calidad y al rendimiento generales del ARN aislado de tejidos de FFPE. A continuación se presentan recomendaciones para abordar varios factores clave:

Obtención de tejidos y preparación de muestras de tejidos en fases anteriores: si es posible, los tejidos se deben fijar en el plazo de una hora después de la resección quirúrgica. Se puede producir una gran degradación del ARN antes de completar el proceso de fijación. El tiempo de fijación óptimo es de entre 12 y 24 horas, utilizando formalina tamponada neutra o paraformaldehído. Los tejidos fijados se deben deshidratar completamente antes del proceso de inclusión.
Almacenamiento de bloques: el almacenamiento de bloques sin caras cortadas, cuando sea posible, previene daños continuos por exposición al oxígeno atmosférico, al agua y a otros factores ambientales, tales como la luz y la infestación (hongos, insectos, etc.).
Tipo, tamaño y cantidad de tejido que se va a utilizar para el aislamiento de ARN: el grosor de tejido recomendado es de 10-20 µm. El número de secciones utilizadas se determina por el tipo de tejido (que afecta a la densidad celular) y el área de superficie (tamaño recomendado: 50-300 mm2). El exceso de material de partida puede causar la obstrucción del filtro, lo que da como resultado una baja producción.
Cantidad excesiva de parafina utilizada para la inclusión de tejidos: cuando sea posible, se debe eliminar el exceso de parafina antes de iniciar el protocolo de purificación. Para los métodos de purificación basados en xileno, deberían ser suficientes dos tratamientos de xileno a temperatura ambiente para una desparafinización completa. Si se desea, se puede realizar un tratamiento más riguroso de 37-55 °C durante 30 minutos. Después de la desparafinización del xileno, es crucial que se retire completamente el etanol al 100 % y que los sedimentos estén secos después de los dos lavados de etanol al 100 %. El método de gránulos magnéticos emplea novedosas sustancias químicas para tratar la parafina que limita la entrada a secciones de 20 µm.

Los kits MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra están diseñados para un aislamiento rápido, eficiente y automatizado del ARN total y el ADN de muestras de FFPE utilizando partículas magnéticas Invitrogen MagMAX. Los kits Invitrogen MagMAX FFPE NA ofrecen flujos de trabajo más rápidos y utilizan reactivos menos tóxicos, sin sacrificar la calidad. Estos kits ayudan a ofrecer una producción y una pureza de ácidos nucleicos comparables a las del mejor sistema basado en filtros RecoverAll de su clase. Los kits MagMAX FFPE NA superan el rendimiento de productos con protocolos similares y logran producciones de ARN y ADN comparables a las de protocolos más largos, más peligrosos y de menor rendimiento.

El procedimiento del kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales RecoverAll requiere unos 45 minutos de manipulación y se puede completar fácilmente en menos de un día cuando se aísla ARN. Las muestras FFPE se desparafinan con una serie de lavados de etanol y xileno. A continuación, se las somete a una rigurosa digestión de proteasas con un tiempo de incubación adaptado a la recuperación de ARN o ADN. Los ácidos nucleicos se purifican con un método rápido de filtrado con vidrio que incluye un tratamiento de nucleasa en el filtro y se eluyen en agua o en el tampón bajo en sal proporcionado.

Recursos técnicos

Artículos de notas técnicas

Extracción de ácidos nucleicos de muestras de FFPE
Cuantificación exacta y sensible de microARN de tejidos de FFPE - Notas técnicas 16(1): Este estudio describe el aislamiento con éxito y la medición precisa de la expresión de miARN de muestras fijadas en formol incluido en parafina (FFPE) o en paraformol incluido en parafina.
Aislamiento más rápido de ácidos nucleicos de tejidos de FFPE - Notas técnicas 16(1): Applied Biosystems ha mejorado el protocolo para el kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales Invitrogen Ambion RecoverAll para tejidos de FFPE, lo que ha reducido significativamente el tiempo de procesamiento.
Análisis de expresiones genéticas optimizadas de muestras de FFPE - Notas técnicas 14(3): El protocolo optimizado presentado aquí se puede utilizar para cuantificar de manera fiable niveles de expresión de ARNm utilizando ARN aislado de muestras de FFPE y RT-PCR en tiempo real.
Recuperar producciones elevadas de ácidos nucleicos totales de tejidos fijados en formol incluido en parafina (FFPE) - Notas técnicas 12(3): El nuevo kit RecoverAll de Ambion permite a los investigadores aislar ADN o ARN (incluido microARN) de muestras de FFPE. Los ácidos nucleicos recuperados son ideales para diversas aplicaciones posteriores, tales como el análisis de micromatrices, qRT-PCR y detección de mutaciones.
Análisis de microARN con ARN extraído de muestras emparejadas fijadas en formol incluido en parafina (FFPE) y frescas congeladas
Alta correlación de datos de cuantificación de miARN de tejidos congelados instantáneamente y FFPE emparejado con ensayos MicroRNA TaqMan
Identificación de genotipos de ADN de muestras de FFPE humanas - Fiable y Reproducible: Nota de aplicación
Extracción y cuantificación optimizadas de ARN de muestras de FFPE para análisis de expresión génica
Protocolo: Preparación de bibliotecas de ARN pequeño de FFPE para secuenciación SOLiD
Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales RecoverAll™

Consejos desde la mesa de trabajo

El espesor óptimo de las secciones de FFPE para el aislamiento de miARN: Nuestros científicos examinan el efecto del espesor de las secciones (5-40 µm) sobre el aislamiento de miARN de tejidos de FFPE.

Sus datos

Identificación de firmas de ARNm relacionadas con el cáncer en muestras de pacientes de FFPE: El laboratorio Yeatman del H. Lee Moffitt Cancer Center and Research Institute (Tampa, Florida) investiga las firmas de expresión génica que definen el cáncer de colon, cáncer de mama y otros tipos de cáncer.
Efectos de la tinción LCM sobre la RT-PCR en tiempo real: La investigación demuestra que el kit de tinción Ambion LCM se puede utilizar con éxito en tejidos fijados en formol incluido en parafina (FFPE) sin poner en riesgo ni la producción ni la calidad del ARN extraído.

Nota de aplicación

Extracción y cuantificación optimizadas de ARN de muestras de FFPE para análisis de expresión génica

Boletín de producto

Kits RecoverAll y MagMAX para aislamiento de ácidos nucleicos: Análisis de metilación con muestras de FFPE

¿Qué kit de aislamiento de ARN vegetal es adecuado para usted?

	Excelente para muestras complicadas (semillas y tejidos de coníferas)	Rápido y fácil de utilizar	Recuperación eficaz de ARN pequeño y microARN	Rápido y totalmente automático
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	Reactivo de ARN de plantas	Minikit de ARN PureLink	Kit de aislamiento de miARN mirVana	Kit de aislamiento de ARN total MagMAX-96
El más vendido			✓
Tipos de ARN aislado	solo moléculas de ARN grandes	solo moléculas de ARN grandes	Moléculas de ARN grandes y pequeñas	solo moléculas de ARN grandes
Tiempo de preparación	60 minutos	<20 minutos	30 minutos	< 45 minutos
Cantidad de material de partida	Hasta 1 g	<250 mg	De 0,5 a 250 mg	Hasta 10 mg
Método de aislamiento	Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol)	Columna de sílice rápida y cómoda	Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación)	Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos
Compatible con alto rendimiento				✓
Productos compatibles		Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes	Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes	Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes

Eliminar polisacáridos

Uno de los principales problemas relacionados con el aislamiento de ARN vegetal es la presencia de biomoléculas problemáticas, como compuestos polifenólicos y polisacáridos. El medio a aislamiento de ARN vegetal Ambion minimiza muchos de estos contaminantes con la adición de polivinilpirrolidona, un polímero de alto peso molecular que se une a polifenolicos y polisacáridos, y con un paso de centrifugación previo a la extracción.

Preservar y estabilizar su ARN

La solución RNAlater se usa ampliamente para la preservación del ARN en tejidos, órganos, células de animales intactos y bacterias. Minimiza la necesidad de procesar inmediatamente las muestras para el aislamiento de ARN o de congelarlas en nitrógeno líquido para su posterior procesamiento.

Recursos técnicos

¿Qué kit de extracción de ARN de tejidos es adecuado para usted?

	Criterio de referencia para ARN intacto y altamente puro	Método sencillo, fiable y rápido	Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt)	Método basado en columnas rápido y cómodo de una entrada de muestras limitada (ARN > 200 nt)	Método rápido y cómodo para especies de ARN pequeño	TRIzol de máxima pureza + purificación de columnas, no se requiere precipitación	Formato HTP, capaz de recuperar ARN de todos los tamaños (incluidos microARN)
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	Reactivo TRIzol	Minikit de ARN PureLink	Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96	Kit de micromuestras de ARN PureLink	Kit de aislamiento de miARN mirVana	Sistema de purificación de ARN TRIZol Plus	Aislamiento de ARN total MagMAX mirVana
El más vendido	✓
Método de aislamiento	Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol)	Columna de sílice rápida y cómoda	Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración	Columnas de sílice rápidas y cómodas	Extracción orgánica combinada con prácticas columnas de sílice	Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación)	Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos
Tiempo de preparación	1 hora	20 minutos	20 minutos	20 minutos	30 minutos	1 hora	< 1 hora
Cantidad de material de partida	Hasta 100 mg	De 10 mg a 100 mg	De 10 células a 10 mg	Hasta 10 mg	Hasta tejido de 250 mg	Hasta 100 mg	Hasta 50 mg
Compatible con alto rendimiento			✓				✓
Tamaño de preparación	100 preparaciones	50 preparaciones	96 preparaciones	50 preparaciones	96 preparaciones	50 preparaciones	96 preparaciones

Producción de ARN de tejidos animales

El contenido de ARN puede variar ampliamente entre tejidos, tipos de células, estados fisiológicos, etc. En esta tabla se proporcionan directrices generales para estimar las producciones de ARN de una variedad de células y tejidos.

Producción de ARN total habitual de 1 mg de varios tejidos

Tabla 1. Producción de ARN total habitual de 1 mg de varios tejidos.

Preservar y estabilizar su ARN

Recursos técnicos

¿Qué kit de extracción de ADN de levadura es adecuado para usted?

	Rápido y totalmente automático	Rápido y fácil de utilizar	Diseñado para paredes celulares rígidas de levadura manteniendo los perfiles de expresión	Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt)
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	Kit Platinum Taq MagMAX de aislamiento de ARN total para micromatrices	Minikit de ARN PureLink	Kit RiboPure-Yeast	Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96
El más vendido		✓
Incluye gránulos especializados para lisis celular	No	No	Gránulos de circón	No
Método de aislamiento	Formato ampliable y flexible para la máxima pureza; incluye extracción orgánica y gránulos magnéticos	Columna de sílice rápida y cómoda	Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica	Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración de 96 pocillos
Tiempo de preparación	< 1 hora	20 minutos	90 minutos (incluye tratamiento de ADNasa)	20 minutos
Cantidad de material de partida	Hasta 5 x 10⁶ células	Hasta 5 x 10⁸ células	Hasta 3 x 10⁸ células	1,8 ml de células de levadura frescas en fase logarítmica (OD660=0,6-0,8)
Compatible con alto rendimiento	✓
Tamaño del kit	96 preparaciones	50 preparaciones	50 preparaciones	96 preparaciones

Recursos técnicos

A diferencia de las células eucariotas, la levadura y muchas cepas bacterianas están protegidas por paredes celulares que pueden ser difíciles de alterar. Como primer paso, se requiere una lisis celular efectiva (normalmente mediante interrupción mecánica o pretratamiento enzimático) antes de cualquier procedimiento de aislamiento de ARN.

Una gama de productos desarrollados por los expertos en ARN de Ambion le ayudará a aislar una elevada producción de ARN puro e intacto de bacterias y levadura.

¿Qué kit de aislamiento de ARN bacteriano es adecuado para usted?

	Sin procedimientos de lisis	Rápido y fácil, 20 min	Formato de placas de filtración basado en columna de sílice rápida y cómoda	HTP, 45 min	Ideal para bacterias + gram difíciles de lisar
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	Kit de aislamiento de ARN bacteriano TRIzol Max con reactivo de mejora bacteriana TRIZol & Max	Minikit de ARN PureLink	Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96	Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales MagMAX	Kit RiboPure-Bacteria
El más vendido		✓
Incluye gránulos especializados para lisis celular	No	No	No	Gránulos de circón	Gránulos de circón
Método de aislamiento	Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol)	Columna de sílice rápida y cómoda	Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración de 96 pocillos	Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos	Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación)
Tiempo de preparación	1 hora	20 minutos	20 minutos	45 minutos	1 hora
Cantidad de material de partida	Hasta 1 x 10⁸ células	Hasta 1 x 10⁹ células	Hasta 1 x 10⁹ células	Hasta 0,3 g de muestras sólidas o 175 µl de muestras líquidas	Hasta 10⁹ células
Compatible con alto rendimiento			✓	✓
Tamaño del kit	100 preparaciones	50 preparaciones	96 preparaciones	100 preparaciones	50 preparaciones

Recursos técnicos

El análisis vírico de muestras biológicas (animales, insectos, plantas, hongos, bacterias) y ambientales (agua, aire, alimentos) se realiza cada vez más utilizando estrategias de análisis molecular que requieren ARN o ADN vírico de las muestras que se están analizando. La purificación de ARN vírico plantea desafíos únicos para la obtención de una buena sensibilidad de recuperación y detección. Los expertos en ARN de Ambion han desarrollado productos de purificación de ARN optimizados para proporcionar la máxima producción, pureza e integridad de ARN vírico de una amplia gama de tipos de muestras en varias opciones de formato.

«El ARN vírico altamente concentrado del minikit de ADN/ARN vírico PureLink proporciona una herramienta para un análisis posterior más sensible y delicado de genomas víricos»

Dr. Dongning Wang, en el laboratorio de Feng Gao, MD, Duke Human Vaccine Institute, Universidad de Duke

Especificaciones del producto

		Aplicación posterior más adecuada
Producto	Formato	RT-PCR en tiempo real	Análisis de micromatrices	Secuenciación	Northern blot	Clonación
ARN total
Minikit de ADN/ARN vírico PureLink	Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice	✓			✓
Kit RNAqueous	Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice	✓			✓	✓
Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX AI⁄ND	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas	✓			✓
Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96 AI⁄ND	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización	✓			✓
ADN/ARN
Kit de purificación de ADN/ARN vírico PureLink Pro 96	Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización	✓
Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales MagMAX	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización	✓			✓
Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización	✓			✓
AN vírico Dynabeads SILANE	Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos, compatible con automatización
Kit de virus iPrep PureLink	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, compatible con automatización	✓
Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas	✓
Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96 (5 x 96 reacciones)	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización	✓
Micro ARN
Kit de aislamiento de miARN mirVana	Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice		✓
Kit de aislamiento mirVana miRNA (sin fenol - se debe adquirir por separado)	Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice		✓
Reactivo TRIzol LS	Lisis en reactivo TRIzol, reactivo de un paso	✓	✓		✓	✓
ARNm
Kit Dynabeads mRNA DIRECT	Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos	✓				✓
Microkit Dynabeads mRNA DIRECT	Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos	✓				✓

Resources

Nucleic Acid Purification and Analysis Support Center
Find tips, troubleshooting help, and resources for your nucleic acid purification & analysis applications.

Protocol Videos—Videos to help you isolate nucleic acids using a variety of techniques.
DNA & RNA Selection Guide—Find the right purification products.
Videos—View our library of DNA & RNA purification and analysis videos.
Application Notes—Explore our application notes from scientists sharing data for isolation products

Sangre

¿Qué kit de extracción de ARN de muestra de sangre es adecuado para usted?

	Optimizado para muestras líquidas	Kit especializado agota eritrocitos no nucleados	Formato de placas de filtración con 96 columnas, para necesidades HTP	HTP optimizado para la purificación de muestras de sangre estabilizadas	Formato HTP, capaz de recuperar ARN de todos los tamaños (incluidos microARN)	Alta producción de ARN directamente de sangre completa, sin necesidad de aislar leucocitos
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	TRIzol LS	Kit de sangre de ARN total PureLink	Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96	Kit MagMAX para aislamiento de ARN de tubos de sangre estabilizados	Aislamiento de ARN total MagMAX mirVana	Kit de sangre RiboPure
El más vendido						✓
Reactivos de estabilización compatibles	EDTA, heparina, citrato, RNAlater	EDTA, heparina, citrato	EDTA, heparina, citrato	Tubos Tempus o PaxGene	EDTA o citrato	EDTA, heparina, citrato, RNAlater
Incluye reactivo de estabilización						✓ RNAlater
Método de aislamiento	Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol)	Columna de sílice rápida y cómoda	Columnas de sílice rápidas y cómodas en formato de placas	Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos	Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos	Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación)
Tiempo de preparación	1 hora	20 minutos		12 tubos en 2 horas	≥ 96 muestras en < 1 h	30 minutos
Compatible con alto rendimiento			✓	✓	✓

Para obtener más información sobre cómo trabajar con sangre, consulte nuestros artículos técnicos:

Protocolos adicionales

Consejos desde la mesa de trabajo

¿Afecta el fraccionamiento de muestras de sangre a los niveles de expresión de ARNm?

Artículos de notas técnicas

Células cultivadas

¿Qué kit de aislamiento de ARN de células cultivadas es adecuado para usted?

	ARN intacto y altamente puro	Formato basado en columnas rápido y cómodo para ARN (> 200 nt)	Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt)	Método basado en columnas rápido y cómodo de una entrada de muestras limitada (ARN > 200 nt)	Método rápido y cómodo para especies de ARN pequeño	Sistema completo para células a qRT-PCR sin purificación de ARN
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	Reactivo TRIzol	Minikit de ARN PureLink	Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96	Kit de micromuestras de ARN PureLink	Kit de aislamiento de miARN MirVana	Kits Cells-to-CT
El más vendido	✓	✓			✓	✓
Tiempo de preparación	1 hora	20 minutos	20 minutos	20 minutos	30 minutos	< 10 minutos
Método de lisis celular	Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol)	Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad	Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad	Lisis de isotiocianato de guanidina sin toxicidad	Extracción orgánica seguida de precipitación de alcohol	Lisis Cells-to-CT
Cantidad de material de partida	Hasta 1 x 10⁷ células	De 5 x 10⁶ a 1 x 10⁸ células	De 5 x 10⁶ a 1 x 10⁸ células	Hasta 5 x 10⁵ células	10²-10⁷ células cultivadas	10-100 000 células
Aplicación	Todos los métodos de expresión de ARN	qRT-PCR, NGS	qRT-PCR, NGS	qRT-PCR, NGS	Análisis de micro ARN	qRT-PCR

Preservar y estabilizar su ARN

Recursos técnicos

FFPE

¿Qué kit de extracción de ARN de muestras de FFPE es adecuado para usted?

	Aislamiento de bajo rendimiento de ARN y ADN de la misma sección de FFPE	Aislamiento ampliable de ARN y ADN de la misma sección de FFPE
	Pedir ahora	Pedir ahora
	Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales RecoverAll para FFPE	Kit MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra
Tiempo de preparación	4,5 horas (tiempo total para 16 muestras) 2,5 horas de tiempo de manipulación	4 horas (tiempo total para 96 preparaciones) 1 hora de tiempo de manipulación
Producto final extraído	ARN total, microARN y ADNg	ARN total, microARN y ADNg
Método de aislamiento	purificación de columnas	purificación de gránulos magnéticos
Requiere desparafinación	✓	✓
Compatible con automatización (posdesparafinización)		✓ (guiones para KF Flex y Duo Prime)
Intervalo de muestras de FFPE compatible	Secciones de hasta 4 x 20 micras (tejido de 300 mm²)	Secciones de hasta 2 x 20 micras (tejido de 300 mm²)
Volumen de muestra	~ 50 µl de ADN purificado ~ 50 µl de ARN purificado	~ 50 µl de ADN purificado ~ 50 µl de ARN purificado
Compatible con paneles de ADN Ion AmpliSeq (p. ej., Cancer Hotspot Panel v2)	✓	✓
Compatible con paneles de ARN Ion AmpliSeq (p. ej., RNA cancer y RNA fusion)	✓	✓

¿Por qué el aislamiento de ARN de FFPE supone un desafío?

¿Cómo puede aumentar sus posibilidades de éxito con FFPE?

Obtención de tejidos y preparación de muestras de tejidos en fases anteriores: si es posible, los tejidos se deben fijar en el plazo de una hora después de la resección quirúrgica. Se puede producir una gran degradación del ARN antes de completar el proceso de fijación. El tiempo de fijación óptimo es de entre 12 y 24 horas, utilizando formalina tamponada neutra o paraformaldehído. Los tejidos fijados se deben deshidratar completamente antes del proceso de inclusión.
Almacenamiento de bloques: el almacenamiento de bloques sin caras cortadas, cuando sea posible, previene daños continuos por exposición al oxígeno atmosférico, al agua y a otros factores ambientales, tales como la luz y la infestación (hongos, insectos, etc.).
Tipo, tamaño y cantidad de tejido que se va a utilizar para el aislamiento de ARN: el grosor de tejido recomendado es de 10-20 µm. El número de secciones utilizadas se determina por el tipo de tejido (que afecta a la densidad celular) y el área de superficie (tamaño recomendado: 50-300 mm2). El exceso de material de partida puede causar la obstrucción del filtro, lo que da como resultado una baja producción.
Cantidad excesiva de parafina utilizada para la inclusión de tejidos: cuando sea posible, se debe eliminar el exceso de parafina antes de iniciar el protocolo de purificación. Para los métodos de purificación basados en xileno, deberían ser suficientes dos tratamientos de xileno a temperatura ambiente para una desparafinización completa. Si se desea, se puede realizar un tratamiento más riguroso de 37-55 °C durante 30 minutos. Después de la desparafinización del xileno, es crucial que se retire completamente el etanol al 100 % y que los sedimentos estén secos después de los dos lavados de etanol al 100 %. El método de gránulos magnéticos emplea novedosas sustancias químicas para tratar la parafina que limita la entrada a secciones de 20 µm.

Recursos técnicos

Artículos de notas técnicas

Extracción de ácidos nucleicos de muestras de FFPE
Cuantificación exacta y sensible de microARN de tejidos de FFPE - Notas técnicas 16(1): Este estudio describe el aislamiento con éxito y la medición precisa de la expresión de miARN de muestras fijadas en formol incluido en parafina (FFPE) o en paraformol incluido en parafina.
Aislamiento más rápido de ácidos nucleicos de tejidos de FFPE - Notas técnicas 16(1): Applied Biosystems ha mejorado el protocolo para el kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales Invitrogen Ambion RecoverAll para tejidos de FFPE, lo que ha reducido significativamente el tiempo de procesamiento.
Análisis de expresiones genéticas optimizadas de muestras de FFPE - Notas técnicas 14(3): El protocolo optimizado presentado aquí se puede utilizar para cuantificar de manera fiable niveles de expresión de ARNm utilizando ARN aislado de muestras de FFPE y RT-PCR en tiempo real.
Recuperar producciones elevadas de ácidos nucleicos totales de tejidos fijados en formol incluido en parafina (FFPE) - Notas técnicas 12(3): El nuevo kit RecoverAll de Ambion permite a los investigadores aislar ADN o ARN (incluido microARN) de muestras de FFPE. Los ácidos nucleicos recuperados son ideales para diversas aplicaciones posteriores, tales como el análisis de micromatrices, qRT-PCR y detección de mutaciones.
Análisis de microARN con ARN extraído de muestras emparejadas fijadas en formol incluido en parafina (FFPE) y frescas congeladas
Alta correlación de datos de cuantificación de miARN de tejidos congelados instantáneamente y FFPE emparejado con ensayos MicroRNA TaqMan
Identificación de genotipos de ADN de muestras de FFPE humanas - Fiable y Reproducible: Nota de aplicación
Extracción y cuantificación optimizadas de ARN de muestras de FFPE para análisis de expresión génica
Protocolo: Preparación de bibliotecas de ARN pequeño de FFPE para secuenciación SOLiD
Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales RecoverAll™

Consejos desde la mesa de trabajo

El espesor óptimo de las secciones de FFPE para el aislamiento de miARN: Nuestros científicos examinan el efecto del espesor de las secciones (5-40 µm) sobre el aislamiento de miARN de tejidos de FFPE.

Sus datos

Identificación de firmas de ARNm relacionadas con el cáncer en muestras de pacientes de FFPE: El laboratorio Yeatman del H. Lee Moffitt Cancer Center and Research Institute (Tampa, Florida) investiga las firmas de expresión génica que definen el cáncer de colon, cáncer de mama y otros tipos de cáncer.
Efectos de la tinción LCM sobre la RT-PCR en tiempo real: La investigación demuestra que el kit de tinción Ambion LCM se puede utilizar con éxito en tejidos fijados en formol incluido en parafina (FFPE) sin poner en riesgo ni la producción ni la calidad del ARN extraído.

Nota de aplicación

Extracción y cuantificación optimizadas de ARN de muestras de FFPE para análisis de expresión génica

Boletín de producto

Kits RecoverAll y MagMAX para aislamiento de ácidos nucleicos: Análisis de metilación con muestras de FFPE

Planta

¿Qué kit de aislamiento de ARN vegetal es adecuado para usted?

	Excelente para muestras complicadas (semillas y tejidos de coníferas)	Rápido y fácil de utilizar	Recuperación eficaz de ARN pequeño y microARN	Rápido y totalmente automático
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	Reactivo de ARN de plantas	Minikit de ARN PureLink	Kit de aislamiento de miARN mirVana	Kit de aislamiento de ARN total MagMAX-96
El más vendido			✓
Tipos de ARN aislado	solo moléculas de ARN grandes	solo moléculas de ARN grandes	Moléculas de ARN grandes y pequeñas	solo moléculas de ARN grandes
Tiempo de preparación	60 minutos	<20 minutos	30 minutos	< 45 minutos
Cantidad de material de partida	Hasta 1 g	<250 mg	De 0,5 a 250 mg	Hasta 10 mg
Método de aislamiento	Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol)	Columna de sílice rápida y cómoda	Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación)	Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos
Compatible con alto rendimiento				✓
Productos compatibles		Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes	Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes	Medio de aislamiento de ARN vegetal Ambion Elimina los contaminantes de plantas comunes

Eliminar polisacáridos

Preservar y estabilizar su ARN

Recursos técnicos

Tejido

¿Qué kit de extracción de ARN de tejidos es adecuado para usted?

	Criterio de referencia para ARN intacto y altamente puro	Método sencillo, fiable y rápido	Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt)	Método basado en columnas rápido y cómodo de una entrada de muestras limitada (ARN > 200 nt)	Método rápido y cómodo para especies de ARN pequeño	TRIzol de máxima pureza + purificación de columnas, no se requiere precipitación	Formato HTP, capaz de recuperar ARN de todos los tamaños (incluidos microARN)
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	Reactivo TRIzol	Minikit de ARN PureLink	Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96	Kit de micromuestras de ARN PureLink	Kit de aislamiento de miARN mirVana	Sistema de purificación de ARN TRIZol Plus	Aislamiento de ARN total MagMAX mirVana
El más vendido	✓
Método de aislamiento	Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol)	Columna de sílice rápida y cómoda	Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración	Columnas de sílice rápidas y cómodas	Extracción orgánica combinada con prácticas columnas de sílice	Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación)	Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos
Tiempo de preparación	1 hora	20 minutos	20 minutos	20 minutos	30 minutos	1 hora	< 1 hora
Cantidad de material de partida	Hasta 100 mg	De 10 mg a 100 mg	De 10 células a 10 mg	Hasta 10 mg	Hasta tejido de 250 mg	Hasta 100 mg	Hasta 50 mg
Compatible con alto rendimiento			✓				✓
Tamaño de preparación	100 preparaciones	50 preparaciones	96 preparaciones	50 preparaciones	96 preparaciones	50 preparaciones	96 preparaciones

Producción de ARN de tejidos animales

Producción de ARN total habitual de 1 mg de varios tejidos

Tabla 1. Producción de ARN total habitual de 1 mg de varios tejidos.

Preservar y estabilizar su ARN

Recursos técnicos

Levadura

¿Qué kit de extracción de ADN de levadura es adecuado para usted?

	Rápido y totalmente automático	Rápido y fácil de utilizar	Diseñado para paredes celulares rígidas de levadura manteniendo los perfiles de expresión	Formato de placas de filtración basado en columnas rápido y cómodo para 96 muestras (ARN > 200 nt)
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	Kit Platinum Taq MagMAX de aislamiento de ARN total para micromatrices	Minikit de ARN PureLink	Kit RiboPure-Yeast	Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96
El más vendido		✓
Incluye gránulos especializados para lisis celular	No	No	Gránulos de circón	No
Método de aislamiento	Formato ampliable y flexible para la máxima pureza; incluye extracción orgánica y gránulos magnéticos	Columna de sílice rápida y cómoda	Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica	Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración de 96 pocillos
Tiempo de preparación	< 1 hora	20 minutos	90 minutos (incluye tratamiento de ADNasa)	20 minutos
Cantidad de material de partida	Hasta 5 x 10⁶ células	Hasta 5 x 10⁸ células	Hasta 3 x 10⁸ células	1,8 ml de células de levadura frescas en fase logarítmica (OD660=0,6-0,8)
Compatible con alto rendimiento	✓
Tamaño del kit	96 preparaciones	50 preparaciones	50 preparaciones	96 preparaciones

Recursos técnicos

Bacterias

Una gama de productos desarrollados por los expertos en ARN de Ambion le ayudará a aislar una elevada producción de ARN puro e intacto de bacterias y levadura.

¿Qué kit de aislamiento de ARN bacteriano es adecuado para usted?

	Sin procedimientos de lisis	Rápido y fácil, 20 min	Formato de placas de filtración basado en columna de sílice rápida y cómoda	HTP, 45 min	Ideal para bacterias + gram difíciles de lisar
	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora	Pedir ahora
	Kit de aislamiento de ARN bacteriano TRIzol Max con reactivo de mejora bacteriana TRIZol & Max	Minikit de ARN PureLink	Kit de purificación de ARN total PureLink Pro 96	Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales MagMAX	Kit RiboPure-Bacteria
El más vendido		✓
Incluye gránulos especializados para lisis celular	No	No	No	Gránulos de circón	Gránulos de circón
Método de aislamiento	Extracción orgánica de gran pureza (requiere precipitación de alcohol)	Columna de sílice rápida y cómoda	Columna de sílice rápida y cómoda en formato de placas de filtración de 96 pocillos	Formato ampliable y flexible con gránulos magnéticos	Máxima pureza y comodidad; incluye columna de sílice y extracción orgánica (no es necesaria la precipitación)
Tiempo de preparación	1 hora	20 minutos	20 minutos	45 minutos	1 hora
Cantidad de material de partida	Hasta 1 x 10⁸ células	Hasta 1 x 10⁹ células	Hasta 1 x 10⁹ células	Hasta 0,3 g de muestras sólidas o 175 µl de muestras líquidas	Hasta 10⁹ células
Compatible con alto rendimiento			✓	✓
Tamaño del kit	100 preparaciones	50 preparaciones	96 preparaciones	100 preparaciones	50 preparaciones

Recursos técnicos

Vírico

«El ARN vírico altamente concentrado del minikit de ADN/ARN vírico PureLink proporciona una herramienta para un análisis posterior más sensible y delicado de genomas víricos»

Dr. Dongning Wang, en el laboratorio de Feng Gao, MD, Duke Human Vaccine Institute, Universidad de Duke

Especificaciones del producto

		Aplicación posterior más adecuada
Producto	Formato	RT-PCR en tiempo real	Análisis de micromatrices	Secuenciación	Northern blot	Clonación
ARN total
Minikit de ADN/ARN vírico PureLink	Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice	✓			✓
Kit RNAqueous	Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice	✓			✓	✓
Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX AI⁄ND	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas	✓			✓
Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96 AI⁄ND	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización	✓			✓
ADN/ARN
Kit de purificación de ADN/ARN vírico PureLink Pro 96	Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización	✓
Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales MagMAX	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización	✓			✓
Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización	✓			✓
AN vírico Dynabeads SILANE	Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos, compatible con automatización
Kit de virus iPrep PureLink	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, compatible con automatización	✓
Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas	✓
Kit de aislamiento de ARN vírico MagMAX-96 (5 x 96 reacciones)	Lisis basada en sal caotrópica, partículas magnéticas, procesamiento de 96 pocillos, compatible con automatización	✓
Micro ARN
Kit de aislamiento de miARN mirVana	Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice		✓
Kit de aislamiento mirVana miRNA (sin fenol - se debe adquirir por separado)	Lisis basada en sal caotrópica, filtro de sílice		✓
Reactivo TRIzol LS	Lisis en reactivo TRIzol, reactivo de un paso	✓	✓		✓	✓
ARNm
Kit Dynabeads mRNA DIRECT	Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos	✓				✓
Microkit Dynabeads mRNA DIRECT	Lisis basada en sal caotrópica, gránulos magnéticos	✓				✓

¿Qué kit de extracción de ARN de muestra de sangre es adecuado para usted?

Protocolos adicionales

Consejos desde la mesa de trabajo

Artículos de notas técnicas

¿Qué kit de aislamiento de ARN de células cultivadas es adecuado para usted?

Preservar y estabilizar su ARN

Recursos técnicos

¿Qué kit de extracción de ARN de muestras de FFPE es adecuado para usted?

¿Por qué el aislamiento de ARN de FFPE supone un desafío?

¿Cómo puede aumentar sus posibilidades de éxito con FFPE?

Recursos técnicos

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Especificaciones del producto

ARN total

ADN/ARN

Micro ARN

ARNm

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¿Cómo puede aumentar sus posibilidades de éxito con FFPE?

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ADN/ARN

Micro ARN

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