Los kits de Dicer BLOCK-iT™ proporcionan grupos de ARNip altamente eficaces para la reducción de ARNi. Los grupos de ARNip cubeteado (ARNip-c) son un método rentable para llevar a cabos varios experimentos con el mismo objetivo. Los experimentos con Dicer ofrecen una reducción sólida y son muy útiles para evaluar los efectos del ARNi de varios genes de interés o para hacer un seguimiento de análisis de micromatrices. Cuando se ha identificado un efecto de ARNi, la evaluación adicional puede incluir métodos sintéticos o vectoriales.

La tecnología Dicer es aplicable a diferentes necesidades de investigación

  • Inhibición de genes recalcitrantes a la reducción mediante otros métodos
  • Estudio de varios genes, evitando el coste de pedir varias secuencias sintéticas
  • Ejecución de varios experimentos de transfección en paralelo mediante la gran cantidad de ARNip-c generado con cada reacción
  • Reducción de un ARNm objetivo cuando identificar un sitio objetivo específico ha sido difícil
  • Generar un grupo de ARNip-c único para un gen o una familia de genes, a fin de maximizar el potencial de reducción excepcionalmente potente

Reducción potente con grupos de ARNip-c generados por Dicer in vitro

El kit completo de ARNi Dicer BLOCK-iT™ incluye toda la tecnología y los reactivos necesarios para generar ARN bicatenario largo y disociarlo en grupos de ARNip-c. El kit incluye todo lo necesario para generar y purificar grupos de ARNip-c y hacer la transfección de células de mamífero para una fuerte inhibición génica (figura 1).

Figura 1. Los grupos cubeteados garantizan el éxito del ARNi. Los grupos cubeteados de ARNip (ARN-ip-c) se han generado a partir de β-galactosidasa (β-gal) o transcripciones ARN bicatenario de luciferasa, y se utilizan para determinar la capacidad del ARNip-c para reducir exclusivamente la actividad de los genes. Las células GripTite™ 293 MSR fueron co-transfectadas como sigue: plásmidos de control positivo pcDNA™1.2/V5-GW/lacZ y pcDNA™5/FRT/luc, expresando indicadores de luciferasa y β-gal, respectivamente; plásmidos de control positivo y 50 ng de ARNip lacZ; o plásmidos de control positivo y ARNip-c luc. Por cada indicador, el ARNip-c correspondiente consiguió reducir la expresión de actividad del indicador, mientras que el ARNip-c derivado de la otra transcripción
no afectó a la expresión.

Preparación sencilla de una mezcla potente de ARNip-c

Los kits de Dicer ARNi BLOCK-iT™ son los únicos sistemas disponibles que contienen la enzima Dicer recombinante, un módulo de purificación de ARNip-c de alta calidad y el reactivo de transfección más popular para ARNi: Lipofectamine™ RNAiMAX. Utilizar la tecnología de cubeteado in vitro para lograr una inhibición selectiva sólida de la expresión génica de la inhibición de la expresión génica es muy sencillo mediante la generación de un grupo de ARNip-c en tres sencillos pasos (figura 2). No es necesario diseñar ni pedir oligonucleótidos sintéticos. Cada kit contiene todo lo necesario para generar, a partir de un fragmento de una PCR de un gen diana, un grupo altamente eficaz de ARNip. También hay disponibles tamaños personalizados más grandes de esta enzima Dicer recombinante excepcionalmente pura.


Figura 2. Tres sencillos pasos para el éxito del ARNi con grupos de Dicer.