不同类型双抗的pH梯度分析（新型离子交换色谱柱在pH梯度下检测不同类型的双特异性抗体）

摘要

本文使用新型离子交换色谱柱ProPac Elite WCX 5 μm 4.0 mmX150 mm色谱柱和CX- 1Buffer缓冲液，进行pH梯度高分辨率分析非对称型双特异性抗体和对称型的IgG类抗体,使用MAbPac SCX-10 RS 5um 4.6 mmX50 mm色谱柱和CX-1 Buffer缓冲液，进行pH梯度高分辨率分析片段型双特异性抗体。解决了等电聚焦电泳和其他色谱分离模式不能分离的杂质异构体。给双特异性抗体的QC方法控制提供参考。

引言

双特异性抗体（Bispecific Antibody）因其能同时特异性结合两种抗原或者两个表位的抗体分子，可以发挥两种单抗联合的协同作用，成为当下最热门的新药研发方向之一。其作用机制主要包括介导免疫细胞杀伤、双靶点信号通路阻断以及促进蛋白形成功能性复合体三种。这些优异的特性，使得国内外制药巨头纷纷布局该产线，目前比较常见的双抗结构有：非对称的IgG型双抗（图一），对称的IgG型双抗（图二）和片段型双抗（图三），结构的复杂性和多样性，使得表征和制备该类样品困难重重，本文采用新型离子交换色谱柱ProPac Elite WCX色谱柱和线性CX-1 pH Buffer缓冲液高分辨率分析非对称的IgG型双抗和对称的IgG型双抗，使用MAbPac SCX-10 RS 5um 4.6 mmX50 mm色谱柱和CX-1 Buffer缓冲液分析片段型双抗，方案可用于相关双抗药物质量研究表征和QC 放行。