摘要

本文通过赛默飞全新的Vanqμish Core高效液相色谱仪结合质量通 用型检测器-电雾式检测器（CAD）建立一种简单高效的HPLC方 法，可以满足腺相关病毒（AAV）载体制剂中泊洛沙姆188和吐温 80同时测定的需求，本方法稳定性好、灵敏度高，较宽的线性范围 适用于不同浓度样品的测定，可作为泊洛沙姆188和吐温80此类药 物辅料残留控制的有效手段。

引言

近些年来，随着基因治疗的蓬勃发展，FDA已先后批准3款基因治 疗产品，它们均是以腺相关病毒（AAV）为载体，标志着我们对疾 病的治疗真正迈入了基因时代。
泊洛沙姆188是一种聚氧乙烯/聚氧丙烯共聚物，属于一类新型的高 分子非离子表面活性剂，通常作为AAV制剂中的一种添加剂，避免 聚体的产生，以保证长期低温保存和运输的稳定性。吐温80的化学 成分是聚山梨醇酯80，它是一种非离子型表面活性剂，常作为助溶 剂、乳化剂和稳定剂，在AAV纯化工艺中去除特定病毒，但吐温80 具有溶血副作用，因此，吐温80作为药用辅料，应严格按照国家标 准，控制吐温80的用量[1]。
泊洛沙姆188和吐温80均无紫外吸收，目前常用测定制剂中泊洛沙 姆188的方法，主要是采用体积排阻法搭配示差或蒸发光散射检测 器。其中示差检测器受环境条件影响大，无法兼容梯度洗脱，灵敏 度低；而蒸发光散射检测器线性范围窄，虽然灵敏度在测定泊洛沙 姆188相较于示差检测器有一定程度的提高，但仍很难满足低浓度 泊洛沙姆188残留的检测需求[2]。而目前测定吐温80的蒸发光散射 检测器的方法，存在和测定泊洛沙姆188同样的问题[3]。
电雾式检测器（CAD）作为一款通用型的质量检测器，具有高灵 敏度和宽线性范围的特点，在测定泊洛沙姆188和吐温80等无紫外 吸收辅料时，具有其独特的优势。本文建立了一种HPLC-CAD法， 可同时完成泊洛沙姆188和吐温80的测定，方法快速高效，重复性 好，灵敏度高，可作为其残留质控的可靠手段。

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