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这些快速、准确的测试方法适用于来自生物制药生产过程或宿主细胞系的污染物和杂质,其普及应用对于在生产过程中实现在制品测试至关重要。 这些测试的结果可作为下游工艺表征的一部分,用于作出基于事实、通过/不准通过的处理决定。
AutoMate Express™ 核酸提取系统是一款方便易用的台式仪器,无需动手即可对污染物和杂质测试的核酸提取过程进行自动化处理。 该仪器采用业已成熟的PrepSEQ核酸提取化学方法对各类样本(包括细胞培养液、原材料(即血清)以及色谱柱纯化样本或散装药物(BDS)样本等在制品下游纯化样本)中的DNA和RNA进行定量回收。
AutoMate Express™ 平台可用于提取哺乳动物细胞培养生产过程中常见污染物的核酸,即支原体、MMV和病毒。灵活的实验方案可供您从单一微生物分离出DNA和RNA,而三合一组合式监控方案则可以从单一样本中同时提取支原体、MMV和病毒核酸。图1和2展示了将含支原体和MMV的细胞/病毒或其DNA加入典型细胞培养基后使用 AutoMate Express™ 系统提取回收DNA。该工作流程(图3)设计用于完全无手操作的核酸提取过程,可实现重现性良好的提取效率,并缩短得出结果所需的时间。
图1: 检测加入PBS(蓝色)、胎牛血清(黑色)、CHO培养基(灰色)和条件CHO培养基(棕色)的 (A) 支原体DNA和 (B) MMV DNA 。 每种基质均采用回收对照品(RC)来评估提取效率。
图2: 检测加入PBS(蓝色)、胎牛血清(黑色)、CHO 培养基(灰色)和CHO条件培养基(棕色)的 (A) M. arginini DNA 和 (B) MMV DNA。 每板的对照品反应均在实时PCR检测中以500、1000和2000拷贝的支原体歧视阳性对照品或MMV 阳性对照品运行。
图3: AutoMate Express™ 系统的1小时工作流程。
AutoMate Express™ 平台可在封闭式系统中自动执行污染物和杂质核酸高效提取的所有步骤。 该系统采用PrepSEQ Express 试剂盒,其中包含密封纯化柱和抽提试剂以及多种塑料用品,包括吸头和样品、裂解液和洗脱管。 该仪器占地面积小,可以轻松集成到现有的实验室设置中。 通常在1小时内可处理至多13个样本,提取过程产生的洗脱物可以直接在实时PCR-SEQ分析检测中使用。
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