Nalgene实验室器具的保养和使用

在大多数常规应用中，Thermo Scientific™ Nalgene™塑料器具都可以通过温和去垢剂（推荐使用非碱性去垢剂）洗涤，然后再使用自来水和蒸馏水进行冲洗。请勿在任何实验室塑料器具上使用摩擦性清洁器或擦洗片，亦不得在聚碳酸酯制品上使用强碱性清洁试剂。

如下表所示，对大多数微量金属元素分析应用而言，塑料通常比玻璃以及其他材料更清洁，污染也更少。然而，塑料却含有特定类型的微量金属元素。为最大限度降低潜在的污染风险，可以通过1mol/L盐酸浸泡以及蒸馏水清洗的方式，去除或过滤微量金属元素。为确保高精确度，盐酸侵泡之后可以使用1mol/L硝酸浸泡，然后再进行蒸馏水清洗。浸泡时间视具体要求而异，但是塑料器具的浸泡时间不得少于8小时。如果应用要求更严格，可提高所使用的盐酸和硝酸浓度。注意：浓硝酸是强氧化剂，会导致塑料脆化。

去除微量有机物有助于减轻微量金属的吸附，因此，可以用酒精、碱性液、醇碱化合物或氯仿来清洁塑料器具表面，最后使用1mol/L盐酸清洗，进一步降低微量金属元素吸附。

聚砜 (PSF) 是一种用于制造Thermo Scientific™ Nalgene™离心管和可重用过滤产品的树脂，极其“洁净”。以下是罗德岛大学海洋研究所 (URI-GSO)在Nalgene PSF离心管中进行的质量检测。

在测定大气溶胶和远洋海水中微量金属的浓度时，URI-GSO检测了排入到太平洋中的重金属和其他微量金属元素、农药、石油和塑料残留物、其他自然和人造有机物以及可引起酸雨的其他物质。样品中的微量元素含量极低，因此实验室器具必须高度洁净，防止实验室器具或过滤产品浸出微量元素，污染样品。另外，实验室器具吸附样品溶液中的金属元素这一过程也不能是不可逆的。在URI-GSO的测定过程中，用于从海水样品中提取多种微量金属元素的过滤架受到了污染。

清洗过程如下所示：

• 用盐酸与去离子水1:1混合的溶液浸泡一周，用去离子水洗涤
• 用硝酸与去离子水1:1混合的溶液浸泡一周，用去离子水洗涤
• 用石英双重蒸馏硝酸与去离子水1:1000混合的溶液浸泡一周，用去离子水洗涤
• 用石英双重蒸馏硝酸与去离子水1:1000混合的溶液浸泡一周，用去离子水洗涤

上述清洁过程来源于《分析化学》49:2264 (1977)，J.R. Moody和R.M. Lindstrom，罗德岛大学海洋研究所；以及加州理工学院研究人员访谈。

测试过程如下：

• 在五个离心管中加入大约25mL的1mol/L石英双蒸硝酸。
• 向另外五个离心管中添加约25 mL的1mol/L石英双蒸硝酸，含十亿分之一铝、铜、铅和锌元素。
• 离心管放置一个月，然后分析离心管中的物质。

在Perkin Elmer 5000原子吸收光谱仪上，利用原子吸收光谱进行分析。该仪器配备了基于塞曼效应进行背景校正的HGA 5000石墨炉。所有标准均来源于NBS（美国国家标准局）。

结论如下：

(1) 1mol/L的石英双蒸硝酸中含有极低浓度的金属元素（例如：铝、铜、铅是百亿分之一，锌是千亿分之一）。清洗后，聚砜只向溶液中析出极少量的金属元素。

(2) 实验误差范围内，十亿分之一的铝、铜、铅和锌溶液中含有十亿分之一的铝、铜、铅和锌元素，这表明聚砜不会从酸性溶液中吸附这些金属元素。

铝、铜、铅和锌的分析包含一个两步萃取过程。第一步，通过“液/液”萃取配合有机络合剂，去除铜、铅和锌。第二步，采用氢氧化铁共沉淀技术进行萃取。向海水中添加硝酸铁调节pH。从剩余的混合物中过滤氢氧化铁和铝 — 这一步中可使用Nalgene可重用PSF塑料过滤架。

12种塑料和硼硅酸盐玻璃中的元素平均含量汇总

油脂和油-常规清洗

我们推荐使用非碱性清洁剂来清洗塑料实验室器具，特别是对碱性侵蚀特别敏感的聚碳酸酯制品。

Nalgene L900液体洗涤剂（目录号：900-4000）适用于中性pH条件下所有塑料和玻璃器具的清洗。一般情况下，5％浓度的溶液（液体洗涤剂+水）就可以满足要求，但遇到顽固残留或实验室器具极度脏污时可将浓度提高到20％。L900清洁剂还适用于自动清洗机，轻柔清洗一般受污染器具。

将实验室器具浸泡在洗涤剂溶液中，最长浸泡时间为3小时，然后用布或海绵轻轻洗净。受到严重污染的器具在清洗前需要在5-20％浓度的洗涤剂溶液中浸泡4小时或更长时间，然后用自来水冲洗，再用蒸馏水冲洗。

• 请勿在任何实验室塑料器具上使用摩擦性清洁器或擦洗片。
• 定期拆卸清洗瓶子的塞子和螺纹，并拧紧瓶口以防止盐分积聚，否则可能导致泄漏。
• 大多数塑料，尤其是聚烯烃（LDPE、HDPE、PP、PMP和PPCO）具有能抵抗侵蚀的非润湿表面，易于清洗。

对于大多数应用，使用温和的洗涤剂即可除去油脂和油。当需要更严格的清洗时，请小心使用有机溶剂进行清洗。长期暴露在这些溶剂中，聚烯烃可能会产生一定程度的膨胀。在使用实验室器具前必须冲洗掉所有的溶剂。PC、PSF、PS和PVC材料只能使用酒精清洗，其他有机溶剂会侵蚀这些塑料。最后，不得使用含丙烯酸的有机溶剂。

清洗机

由于温度限制，实验室器具清洗机可用于清洗LDPE、丙烯酸和PS以外的所有树脂材料

关于聚碳酸酯(PC)的特别说明：在清洗机中重复洗涤会削弱PC的强度。对于暴露在高应力条件下的PC实验室器具（例如离心应力造成或真空室中的应力），应始终使用温和、中性pH值的非研磨洗涤剂手动清洗，例如Nalgene L-900液体洗涤剂。

如何除去塑料容器中的核糖核酸酶 (RNase) 或脱氧核糖核酸酶 (DNase)

RNase是一种能够分解RNA的酶，Dnase是一种能够分解DNA的酶，二者都是会对核苷酸研究造成干扰的污染物。DNase可在121°C条件下高压蒸汽灭菌15分钟，或通过以下方法灭活。以下一种或多种技术都能抑制或去除您塑料容器中的RNase。请根据您Nalgene容器底部的树脂代码选择最合适的技术。RNase是一种能够分解RNA的酶，Dnase是一种能够分解DNA的酶，二者都是会对核苷酸研究造成干扰的污染物。DNase可在121°C条件下高压蒸汽灭菌15分钟，或通过以下方法灭活。以下一种或多种技术都能抑制或去除您塑料容器中的RNase。请根据您Nalgene容器底部的树脂代码选择最合适的技术。

1. 180°C下加热至少8小时。¹
2. 在氯仿中清洗。¹
3. 在0.1％的焦碳酸二乙酯²水溶液（DEPC）中，37°C条件下浸泡2小时；用无菌（DEPC处理）水（***）冲洗多次；加热至100°C，持续15分钟，或在121°C条件下通过液体/缓慢排气循环高压蒸汽灭菌15分钟。（加热或高压蒸汽灭菌可除去DEPC残基。）。请注意以下图表中的加热变化。
4. 用洗涤剂溶液清洗设备，用清水彻底冲洗，然后用95％乙醇冲洗晾干。在室温下用3％过氧化氢 (H₂O₂) 浸泡设备10分钟。用DEPC处理水彻底冲洗设备。***
5. 在含有0.1mol/L氢氧化钠（氢氧化钠）和0.1％EDTA的水中浸泡设备过夜，然后用DEPC处理的水彻底冲洗。³

RNase 去除表 — 技术

* 多次冲洗，降低化学侵蚀
***DEPC处理水：添加0.1％DEPC至水中，并使之在37°C温度下静置至少12小时。然后加热到100°C，持续15分钟或121°C（250°F）下高压蒸汽灭菌15分钟。
¹ Sambrook, J.；Fritsch, E.F.；Maniatis, T.；“RNA的提取和分离”；分子克隆：实验手册，第二版；7.3；冷泉港实验室出版（1989）
² 注意：DEPC是一种疑似致癌物，必须小心处理。DEPC溶液会刺激眼睛、粘膜和皮肤。
³ Titus, David E.；核酸检测、纯化和标记；快速分离总RNA；普洛麦格协议和应用守则，第二版；pp. 125-126, 203；普洛麦格公司(1991)

Nalgene L900液体洗涤剂

推荐在制药、医疗、科研、学术、生物技术、环境及其他领域的实验室中应用Thermo Scientific™ Nalgene™ L900液体洗涤剂，对玻璃和塑料材质的实验室器具进行洗涤或自动机洗。本品特别适合聚碳酸酯器具的洗涤，而不会像碱性去垢剂一样造成器具污浊、应力开裂或裂纹。

规格

抑制残留测试结果显示，L900液体洗涤剂中不存在任何可能导致毒性或抑制效应的残留（按照《标准方法》第十八版说明，孔板之间的均值差异小于15%）；对pH值无影响也表明L900中无碱性或酸性残留。Nalgene L900液体洗涤剂的pH介于6~7之间。

注意：请勿冷冻。

订购信息：4升装，每箱4件，目录编号900-4000

洗涤说明

手洗：

• 对于轻微污染的器具，每升水加入2-4 mL即可。对于很脏的器具，每升水最多可加入15 mL，并在清洗前浸泡4小时或更长时间。

自动清洗机清洗：

• 按照洗涤剂生产商的指导使用液体洗涤剂。无法确定用量时，请在每升水中加入2-4 mL。很脏的器具可能需要预先浸泡。洗涤剂的用量取决于每次清洗使用的水量，视清洗机的不同而变化。

离心器具的使用和清洁

检查指南

在每次使用前请小心检查离心管与离心瓶。

离心器具在旋转时会承受很大的重力，因此极易发生损坏。安全实验室操作规程要求每次使用前都必须检查所有的离心器具。塑料离心器具易于检查，无需特殊设备。首先，观察污浊和脱色或裂纹可以发现过度应力造成的损坏，即在亮光下手持离心管，在特定角度观察是否存在肉眼可见的小裂痕。在持续使用下，一个带有裂纹的离心管会出现更大的裂缝，甚至破裂。一旦发现肉眼可见的裂纹，就应立即弃用。

转子平衡

请参考离心机操作手册，了解关于转子平衡与操作的说明信息。正确的转子操作、清洁和平衡至关重要。由于不同塑料器具的密度不同，因此不得将不同类型或材质的离心管和离心瓶同时放置在转子中。除非特别说明，否则所有离心器具都必须达到80%以上的盛载量以获得最佳性能。

清洁

一次性离心管

一次性离心管一旦使用完毕即应丢弃。注意：当处理危险试材时，应在丢弃前对离心管进行净化。如需清洁可重复使用的Nalgene离心器具，我们推荐使用如下步骤：

1. 为了去除所有残留物，请先在Nalgene L900洗涤剂中浸泡离心管或离心瓶（参见常规清洁，了解推荐建议）。浸泡过夜，以松解顽固的污渍。
2. 使用一个非磨蚀性刷子，或橡胶/氟聚合物刮棒来清除残留物。
3. 以蒸馏水作为最终的洗液，对器具进行彻底的浸润和漂洗。
4. 风干。

灭菌

PP、PPCO、PMP、FEP和ETFE等材质的产品在常规条件下可重复进行高压蒸汽灭菌，条件为：121°C、15 psig（磅/平方英寸，1.02巴）、15分钟循环时间。PC与PSF材质的产品在同样条件下也能够进行高压蒸汽灭菌，但可能会使机械强度发生劣化，并缩短其可用寿命。如果您需要对PC和PSF材质的产品高压蒸汽灭菌，请参考上述检查指南。对Nalgene离心器具进行高压蒸汽灭菌时，请按照以下方式进行：

• 高压蒸汽灭菌前，请使用蒸馏水彻底清洁、漂洗离心管和离心瓶。
• 对于带盖的离心瓶或离心管，在高压蒸汽灭菌前必须完全取掉盖子（盖或塞），避免冷却过程中容器发生塌缩。

某些在室温下对树脂材料无明显影响的化学品，可能在高压蒸汽灭菌温度下导致材质劣化。请参阅离心器具化学耐受表，了解特定化学品与树脂材料信息。所有的Nalgene离心器具均可通过环氧乙烷气体或兼容的化学消毒剂进行灭菌。

化学品影响

化学品可能会影响塑料部件的强度、柔韧度、外观、颜色、尺寸和重量。塑料部件的化学耐受性可能受化学品浓度、暴露温度、时长和频率以及离心力影响。塑料产品接触化学品可能导致的物理变化包括：/p>

• 溶剂吸附，导致塑料材质变软或肿胀
• 溶剂渗透塑料材质
• 聚合物溶解进入溶剂
• 离心管或离心瓶接触化学品的同时再加上额外的离心力，可能会导致器具发生应力开裂；而容器与转子腔之间的匹配不当则可能会加剧这类不良压力。

请参考离心器具化学耐受表，了解特定材质的相关信息。

关于Nalgene离心器具防破裂性的备注：

在匹配适当转子，并遵照我们关于化学耐受、温度限制、相对离心力等级、瓶盖使用、洗涤和高压蒸汽灭菌等操作指南的条件下，Nalgene离心管与离心瓶不会发生损坏或碎裂。如果违背这些使用限制，离心管或离心瓶可能在离心过程中发生损坏（即出现裂缝或破裂）。但是，Nalgene离心管与离心瓶与玻璃器具不同，它们不会发生碎裂，从而降低了操作员与设备的使用风险。

高压蒸汽灭菌

推荐在121°C、15 psig（1.02巴）的条件下，高压蒸汽灭菌20 分钟。

所有器具都应在高压蒸汽灭菌前仔细清洗，以免烘烤塑料材质表面的污渍。当清洗完成后、高压蒸汽灭菌前，所有器具都应使用蒸馏水进行彻底漂洗。某些在室温下对树脂无明显影响的化学品可能在高压蒸汽灭菌温度下导致材质劣化，因此必须彻底去除此等化学品。

不得对盛装洗涤剂或润湿液（wetting solution）的容器（氟聚合物容器除外）进行高压蒸汽灭菌。

• 在高压蒸汽灭菌前，盖上容器的封盖，无需拧紧螺纹。（一旦螺纹被拧紧，高压蒸汽灭菌过程中的压力差可能导致容器破损。）
• 为获得最佳结果，请使用慢排气循环。
• 带阀门的细口大瓶只能在空置的情况下进行高压蒸汽灭菌（阀门可能在高压蒸汽灭菌过程中发生泄漏）。

循环（处理）时间

塑料比玻璃或金属的导热慢，因此在高压蒸汽灭菌锅中需要更长的时间来达到灭菌温度。同时由于塑料与无机材料在热导性方面的差异，塑料容器盛装的内容物可能需要更长时间来达到灭菌温度（121°C）。因此，对于大体积塑料容器中盛装的液体，必须设置更长的灭菌循环时间。特定液体和容器的最佳处理时间只能凭经验确定。

• 蒸汽中的化学添加剂可能会对透明塑料材质造成不良影响，进而在高压蒸汽灭菌之后形成永久性的污迹。
• 一些透明的塑料制品可能会吸收微量水蒸气，并在高压蒸汽灭菌后变模糊。这一模糊效应在干燥后即会消失。可通过在110°C条件下进行烘烤来加速清洁过程。
• 在高压蒸汽灭菌过程中使用聚丙烯共聚物（PPCO）瓶替代聚砜类材质+吐温的组合。
• 装满了试管的试管架必须在平坦表面上进行高压蒸汽灭菌。

特定塑料制品注意事项

聚丙烯、聚甲基苯基硅氧烷、聚丙烯共聚物、Teflon* ETFE、Tefzel*和PFA材质均可在121°C、15 psig的条件下重复进行高压蒸汽灭菌。处理时间至少需达到15分钟，以确保灭菌效果。

聚碳酸酯产品可经受高压蒸汽灭菌。由于洗涤剂残留会导致裂缝和污点，因此必须在高压蒸汽灭菌前彻底清洗。高压蒸汽灭菌循环应限制在121°C温度，20分钟以内。PC材质的机械强度在重复高压蒸汽灭菌之后会表出现一定程度的降低，因此可能无法胜任离心一类的高强度应用。我们PC材质的真空槽因此不适于高压蒸汽灭菌。

注意：请勿在聚碳酸酯制品上使用强碱性洗涤剂。请勿使用含有碱性化学添加剂的汽锅蒸汽来进行高压蒸汽灭菌，这类物质会侵袭塑料材质并造成损坏。

Teflon与Tefzel是DuPont*的注册商标，经Nalge Nunc*国际公司*授权使用。

乙缩醛材质的产品在推荐条件下可进行高压蒸汽灭菌。由于乙缩醛在高压蒸汽灭菌过程中会释放甲醛气味，因此需要进行适当的通风。以下声明符合1986年《加州安全饮用水与毒物执行法案》：“警告：高压蒸汽灭菌时，本品可能会释放甲醛，这一化学物质在加州被视为致癌物。"

微波灭菌

通常来说，微波可穿透所有塑料。常用塑料中，PMP与PSF对微波的通透性最好，当其化学与温度稳定性与将加热的材料相容时建议使用。加热腐蚀性化学品（如酸或溶剂）时请选择含氟聚合物材料，此时排气十分重要。使用微波炉加热瓶子或容器时，须完全松开瓶盖螺纹圈。

预灭菌Nalgene实验室器具

Nalgene如何确保实验室器具的无菌性？

某些Nalgene实验室器具是在组装后灭菌的并经过了严格测试，因此只要包装完好，无菌性就可以得到保证。我们使用的灭菌方法主要有两种：环氧乙烷气体灭菌和伽马辐照。尽管我们的一次性过滤产品并未划分为医疗器材，但仍按照美国食品及药物管理局(FDA)1976年《医疗器械法案》规定的生产规范进行灭菌。我们还将美国医疗仪器协会（AMMI）推荐的规范作为灭菌指南。

Nalgene产品使用的指示剂变色点在灭菌时会发生不可逆的颜色改变，分别适用于环氧乙烷气体 (EtO) 和伽马射线。当产品得到正确处理时，紫色的EtO变色点会变绿；当产品恰当暴露于伽马射线时，黄色的伽马变色点会变红。

环氧乙烷灭菌

当灭菌要求在低温低压条件下进行时（待灭菌材料不能使用高压蒸汽灭菌），可采用环氧乙烷 (EtO)灭菌法：实验室器具暴露于EtO，灭菌器中的温度、湿度和压力都处于严密监控下。EtO灭菌效果通过三种方法检验。包装上的外部颜色指示剂显示气体暴露情况而不指示灭菌情况。生物指示剂显示灭菌结果。生物指示剂是细菌芽孢的抗性菌株，通常是枯草杆菌黑色变种芽孢，芽孢无法存活表明EtO灭菌有效。灭菌结束后可对过滤产品进行无菌测试。与生物指示剂一致，确认无菌的标准是无微生物生长。经EtO灭菌的实验室器具将被隔离直至获得所有测试结果。隔离时间持续7到14天以确保EtO及可能存在的残基有足够的时间脱气。Nalgene器具定期进行残基存留量评估，结果远低于FDA植入性医疗器械标准。通过EtO灭菌的Nalgene器具包括灭菌过滤元件、分析过滤元件和过滤漏斗。

伽马辐照灭菌

在伽马辐照灭菌过程中，待灭菌器具在室温下暴露于来自钴60辐射源的高能量伽马电离射线。此法适用于要求绝对避免有毒残留的实验程序，即不能存在任何潜在有毒残基，无论含量多低。产品通过所吸收辐射剂量的累积来实现灭菌，辐射剂量以兆拉德（Mrads）表示。剂量水平通过剂量验证实验决定，包括生物负载测定与无菌状态检验。产品的辐射释放过程可确认已发出指定的最小辐射剂量从而确保灭菌效果。通过伽马辐照灭菌的Nalgene产品包括我们的所有组织培养过滤元件、过滤接收元件及PETG（聚对苯二甲酸乙二醇酯）瓶和桶。

其他测试

所有Nalgene无菌器具产品均通过下列测试：

• 生物负载
• 热原质
• 细胞毒性¹

无论采用何种灭菌方法，Nalgene过滤产品都经过了多项测试，包括：

• 滤膜保留度/完整性
• 滤膜厚度
• 滤膜抽提物
• 起泡点

测试详细信息由赛默飞世尔科技公司技术服务提供。无菌及技术规范符合证明可通过书面申请获得，请将申请邮寄到以下地址：Quality Assurance Department, Thermo Fisher Scientific, Box 20365, Rochester, New York 14602-0365 USA；或发送电子邮件至technical.nalgene@thermofisher.com。

¹ 我们的组织培养元件所使用的所有材料（包括塑料罩和盖子）都经小鼠L929成纤维细胞以及更敏感的人二倍体胚肺细胞株WI-38测试证明无细胞毒性。测试方法来自Guess, W.L., Rosenbluth, S.A., Schmidt, B., and Autian, J., Agar diffusion method for toxicity screening of plastics on cultured cell monolayers. J. Pharm. Sci. 54:1, p 1545-7, 1965。

特殊清洁程序

对大多数微量金属元素分析应用而言，塑料通常比玻璃以及其他材料更清洁，污染也更少。然而，塑料却含有特定类型的微量金属元素。为最大限度降低潜在的污染风险，可以通过1mol/L盐酸浸泡以及蒸馏水清洗的方式，去除或过滤微量金属元素。为确保高精确度，盐酸侵泡之后可以使用1mol/L硝酸浸泡，然后再进行蒸馏水清洗。浸泡时间视具体要求而异，但是塑料器具的浸泡时间不得少于8小时。如果应用要求更严格，可提高所使用的盐酸和硝酸浓度。注意：浓硝酸是强氧化剂，会导致塑料脆化。

去除微量有机物有助于减轻微量金属的吸附，因此，可以用酒精、碱性液、醇碱化合物或氯仿来清洁塑料器具表面，最后使用1mol/L盐酸清洗，进一步降低微量金属元素吸附。

聚砜 (PSF) 是一种用于制造Nalgene离心管和可重用过滤产品的树脂，极其“洁净”。以下是罗德岛大学海洋研究所 (URI-GSO)在Nalgene PSF离心管中进行的质量检测。

在测定大气溶胶和远洋海水中微量金属的浓度时，URI-GSO检测了排入到太平洋中的重金属和其他微量金属元素、农药、石油和塑料残留物、其他自然和人造有机物以及可引起酸雨的其他物质。样品中的微量元素含量极低，因此实验室器具必须高度洁净，防止实验室器具或过滤产品浸出微量元素，污染样品。另外，实验室器具吸附样品溶液中的金属元素这一过程也不能是不可逆的。在URI-GSO的测定过程中，用于从海水样品中提取多种微量金属元素的过滤架受到了污染。

被感染性或有毒物质污染的实验室器具从工作区移除之前，应进行适当的灭菌处理。高压蒸汽灭菌是首选方法，但适合特定塑料的任何化学消毒或高温灭菌法均可选用（参见“塑料灭菌”）。任何时候，含生物危害性物质的废液在清除之前都必须经过去污染处理。

同时，被生物危害性和放射性物质污染的实验室器具也必须首先灭菌。去除放射性物质的方法取决于所用同位素的种类、剂量、半衰期、载体材料及可溶性。非感染性/无毒性物质的常规去污染过程为，首先室温下在去污剂或清洁剂中浸泡24小时，然后在蒸馏水中漂洗数次。增加清洁剂浓度和升高溶液温度可加速去污染，搅动及使用无磨蚀性材料小心擦洗也可加快这一过程。PC材料需特别注意防止刮伤。最后，任何时候，放射性废物和废水都必须正确处理。

有关受污染实验室器具处理的更多信息，请联系您的生物安全/辐射安全办公室，或参考美国国家卫生研究所 (NIH) 生物危害安全指南、实验室安全专著和辐射安全指南。