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Invitrogen™ Molecular Probes™ 及eBioscience荧光试剂是全球公认的获得出版级高品质荧光图像所需的必要关键工具之一,也是所有生命科学研究同行文献中引用率最高的试剂。
三大精选主题
从数据中排除死细胞可以使免疫细胞分群更为准确,如下图数据可见排除死细胞后,阳性细胞分群更明确。Invitrogen Molecular Probes LIVE/DEAD 可固定死细胞染色剂是一种有助于确认在细胞固定后对活性进行准确评估的可固定活性染料。
如左图若设门活细胞(图上蓝色细胞群,可明确区分出有表达因子的细胞群。若不把死细胞去除(图上红色细胞群)则无法明确
可固定死活染料 | LIVE/DEAD Fixable Blue | LIVE/DEAD Fixable Violet | LIVE/DEAD Fixable Aqua | LIVE/DEAD Fixable Yellow | LIVE/DEAD Fixable Green | LIVE/DEAD Fixable Red | LIVE/DEAD Fixable Far Red | LIVE/DEAD Fixable Near-IR | ||
测定基础 | LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料,可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测,而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。 | |||||||||
数据分析 | 死细胞发出强烈的荧光,而活细胞的荧光强度极低,两者易于区分。 | |||||||||
激光(nm) | UV | 405 | 405 | 405 | 488 | 488 | 561 | 633/635 | 633/635 | |
Ex/Em (nm) | 350/450 | 416/451 | 367/526 | 400/575 | 495/520 | 595/615 | 650/665 | 750/775 | ||
货号 | 80 反应 | L34961 | L34963 | L34965 | L34967 | L34969 | L34971 | L34973 | L34975 | |
200 反应 | L23105 | L34955 | L34957 | L34959 | L23101 | L23102 | L10120 | L10119 | ||
400 反应 | L34962 | L34964 | L34966 | L34968 | L34970 | L34972 | L34974 | L34976 |
Invitrogen SYTOX死细胞染色剂无法穿透完整的细胞膜且在与dsDNA结合后具有更强的荧光信号,因而成为我们最出色的死细胞染色剂(图 1)。 SYTOX死细胞染色剂在水相介质中不发荧光,因此在使用时仅需直接加入细胞中便可进行观察,并不需要洗涤步骤,但不能用于固定后细胞染色。该系列染色剂可提供多种颜色形式并兼容多种激光,具有高度灵活性。
SYTOX Blue 死细胞染色剂 | SYTOX Green 死细胞染色剂 | SYTOX Orange 死细胞染色剂 | SYTOX AADvanced 死细胞染色试剂盒 | SYTOX Red 死细胞染色剂 | SYTOX 死细胞试用装染色剂 | ||||
读取 | 死细胞具有高度的荧光;活细胞不会发生染色 | ||||||||
激光(nm) | 405 | 488 | 488 | 532 | 488 | 532 | 561 | 633/635 | 多种 |
Ex/Em (nm) | 444/480 | 504/523 | 547/570 | 546⁄647 | 640/658 | 多种 | |||
多重 | 是 | ||||||||
可固定 | 否 | ||||||||
样品类型 | 活细胞 | ||||||||
产品规格 | 1,000 反应 | 1,000 反应 | 1,000 反应 | 参见下文 | 1,000 反应 | 每种染色剂 50 个反应 | |||
货号 | S34857 | S34860 | S34861 | 100 个反应 (S10349), | S34859 | S34862 | |||
500 个反应 (S10274) |
通过细胞成像方法也可以简单直观的区分死活细胞,评估单个细胞或细胞群的活性,可对培养的细胞、3D球状体、精子、细菌、酵母等进行检测。
货号 | 产品名称 | 规格 | 推荐检测通道 | Ex/Em (nm) |
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R37601 | LIVE/DEAD™ Cell Imaging Kit (488/570) 即用型滴管包装 | 1 kit/200 assays | FITC | 488/535 |
Texas Red | 570/602 | |||
L3224 | LIVE/DEAD™ Viability/Cytotoxicity Kit, for mammalian cells | 1 kit/1000 assays | FITC | 488/535 |
TRITC/RFP | 528/617 | |||
L7011 | LIVE/DEAD™ Sperm Viability Kit | 1 kit/200~1000 assays | FITC | 489/519 |
TRITC/RFP | 535/617 | |||
R37609 | ReadyProbes™ Cell Viability Imaging Kit, Blue/Green | 6 x 2.5 mL 滴瓶 | FITC | 504/523 |
DAPI | 360/460 | |||
R37610 | ReadyProbes™ Cell Viability Imaging Kit, Blue/Red | 6 x 2.5 mL 滴瓶 | TRITC/RFP | 535/617 |
DAPI | 360/460 |
更多细胞活性检测产品请查阅官网:/cellviability
细胞周期检测对于监控不正常生长的癌细胞是重要的指标,也同时代表了细胞发育的调节分化的进展。我们提供了一系列的荧光染料,供您对活细胞或固定细胞群进行G0/G1期细胞与S期、G2期或多倍体细胞的周期分析。
细胞周期分析
G0:细胞阻留时期
G1:合成前期,大量酶生成
S:DNA开始复制
G2:有丝分裂准备期,大量蛋白生成
M:有丝分裂期
Hoechst 33342 | Vybrant DyeCycle Violet | Vybrant DyeCycle Green | Vybrant DyeCycle Orange | Vybrant DyeCycle Ruby | ||
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检测基本原理 | 利用荧光染料区分G0/G1期细胞与S期、G2期或多倍体细胞 | |||||
数据分析 | 使用细胞膜通透染料进行活细胞DNA含量分析,该染料在结合双链DNA后发出与DNA质量成比例的荧光信号 | |||||
激发 | UV或350 | UV或405 | 488 | 488或532 | 488或633/5 | |
发射 | 461 | 437 | 534 | 563 | 686 | |
推荐滤光片 | 450/50 | 440/40 | 530/30 | 585/42 | 695/40 | |
产品规格 | 10 mL | 200反应 | 200反应 | 200反应 | 100 反应 | 400反应 |
货号 | H3570 | V35003 | V35004 | V35005 | V10309 | V10273 |
FxCycle Violet | PI ReadyProbes试剂 | FxCycle PI/RNAse溶液 | FxCycle Far Red | SYTOX AADvanced | ||
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检测基本原理 | 利用荧光染料区分G0/G1期细胞与S期、G2期或多倍体细胞 | |||||
数据分析 | 使用细胞膜通透染料进行DNA含量分析,细胞存活时,该染料在结合双链DNA后发出与DNA质量成比例的荧光信号。 | |||||
激发 | 405 | 488或532 | 488或532 | 633 | 488 或 532 | |
发射光 | 358/461 | 617 | 617 | 660/20 | 695/40 | |
推荐滤片 | 450/50 | 575/24 | 572/24 | 660/20 | 695/40 | |
包含RNase | 已包括 | |||||
产品规格 | 1试剂盒 | 1试剂盒 | 100 mL | 1 试剂盒 | 5 x 0.5 mL | 0.2 mL |
货号 | F10347 | R37108 | F10797 | F10348 | S10274 | S10349 |
货号 | 产品名称 | 规格 | 推荐检测通道 | Ex/Em (nm) |
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P36238 | Premo™ FUCCI Cell Cycle Sensor (BacMam 2.0) | 2 x 200 µL | GFP | 485/520 |
P36237 | 2 x 1000 µL | RFP | 555/584 |
Premo™ FUCCI细胞周期指示剂是一种双色荧光传感器,用以观察活细胞中细胞周期过程和细胞分裂,可通过荧光显微镜、流式细胞仪或高内涵成像对单个细胞或一群细胞进行精确和灵敏的细胞周期分析,兼容固定和透化。两种指示剂geminin–GFP 和 Cdt1–RFP两相循环,呈现从红色(G1期)到黄色(G1/S期)再到绿色(G2/M期)的动态颜色变化(如左图)。
更多细胞周期检测产品请查阅官网:/cellcycle
细胞凋亡(细胞程序性死亡)是细胞正常发育过程中,由遗传控制的细胞消亡现象。细胞死亡的有序进程对于多细胞生物而言至关重要。凋亡—由遗传因素控制的去除细胞的过程—不仅可为生物体去除其不重要的细胞和组织,确保生物体正常生长和发育,还能通过破坏免疫系统中多余的细胞以及被病毒感染或者DNA 受损的细胞,从而减小对生物体的损害。凋亡调控异常与许多疾病状态有关,例如阿尔茨海默病、 中风以及癌症。
区别千损伤导致的细胞死亡(坏死),凋亡细胞的形态学特征为核染色质固缩、 细胞皱缩以及产生膜结合凋亡 小体,以及出现DNA 片段化和—些细胞蛋白的解离或降解。通过荧光探针,我们可以选择性的显示这些差异。 与细胞活性—样,无法通过任何单—指标来准确界定细胞彻底死亡,也没有单—的实验方法能够完全的显示凋亡,因此, 在研究凋亡事件及其时间关系时最好采用多参数的方法。
诱导后时间开始
结束
细胞功能改变
线粒体膜电位
线粒体转换孔开放
磷脂酰丝氨酸外翻
Caspase 活性
DNA 浓缩
质膜完整性
DNA 片段化
所用试剂
Mito Tracker™ Red
MitoProbe™ DIOC2(3) 试剂盒
MitoProbe™ JC01 试剂盒
Image-iT™ LIVE 线粒体
转换孔检测试剂盒
MitoProbe™ 转换孔检测试剂盒
Annexin V( 膜联蛋白V)
Caspase 检测试剂盒
Hoechst 染料
碘化丙啶
SYTOXTMGREEN 染料
APO-BrdU™ TUNEL 检测试剂盒
抗BrdU 抗体
细胞凋亡早期阶段的显著特征是线粒体的破裂,包括膜电位和氧化-还原电位的改变。
底下表格列出了不同方法与各种荧光染料通道的相关试剂。
线粒体健康分析 | 线粒体膜电位分析 | |||||||||
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显微镜成像 | 流式 | 流式 | 显微成像 | |||||||
MitoSOX™ Red线粒体超氧化物指示剂 | Rhod-2 AM (钙离子指示剂) | Image-iT™ LIVE 线粒体转换孔检测试剂盒 | 线粒体通透性转换孔分析 | JC-1 | JC-1 | TMRE | MitoTracker™ Orange | |||
指示剂 | MitoSOX™ Red | Rhod-2 AM | Hoechst 33342 | Calcein | MitoTracker Red CMXRos | Calcein AM | JC-1 | JC-1 | TMRM | MitoTracker Orange |
检测通道 | RFP/TRITC | TRITC | DAPI | FITC | TRITC | FITC | FITC | TRITC | TRITC | TRITC |
Ex/Em (nm) | 510/580 | 552/577 | 350/461 | 494/517 | 579/599 | 494/517 | 515/529 | 514/529 | 552/576 | 550/580 |
规格 | 10 x 50 µg | 20 x 50 µg | 1 kit (1,000 slides) | 100 反应 | 5 mg | 5 mg | 25 mg | 20 x 50 μg | ||
货号 | M36008 | R1245MP | I35103 | M34153 | 65-0851-38 | T3168 | T669 | M7510 |
Annexin V染色方法是最常用于流式细胞术检测细胞凋亡中期。在正常活细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)位于细胞膜的细胞质表面。凋亡的中间,PS会从膜的内侧翻转到外侧,暴露于细胞外环境,可被检测到。强荧光Annexin V偶联物可为研究磷脂酰丝氨酸外化提供快速、可靠的检测方法。
Annexin V 荧光通道 | 包含的坏死染料 | 包装/反应次数 | 货号 |
---|---|---|---|
eFluor 450 | 7AAD | 50 | 88-8006-72 |
200 | 88-8006-74 | ||
Pacific Blue | SYTOX AADvanced | 50 | A35136 |
Alexa Fluor 488 | PI | 50 | V13241 |
250 | V13245 | ||
Alexa Fluor 488 | SYTOX Green | 50 | V13240 |
FITC | PI | 50 | 88-8005-72 |
200 | 88-8005-74 | ||
PerCP-eFluor 710 | 不含 | 50 | 88-8008-72 |
200 | 88-8008-74 | ||
PE | SYTOX Green | 50 | V35112 |
7AAD | 50 | 88-8102-72 | |
200 | 88-8102-74 | ||
PE-Cyanine7 | 不含 | 50 | 88-8103-72 |
APC | SYTOX Green | 50 | V35114 |
PI | 50 | 88-8007-72 | |
200 | 88-8007-74 |
Caspase酶激活是细胞凋亡早期的一个显著特征。该过程参与了蛋白质底物的剪切及后续的细胞分解。我们可提供一系列caspase活性分析工具,能轻松实时监测或瞬时捕捉到活细胞中的活化caspase。
CellEvent™ Caspase-3/7 Green/Red 成像检测试剂特点
CellEvent™ Caspase-3/7 Green 检测试剂 | Image-iT™ LIVE Red Detection Kits | Image-iT LIVE Green Detection Kits | ||||||
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流式 | 显微镜成像 | 显微镜成像 | ||||||
检测原理 | 免洗,可连续检测caspase活性,荧光强度随活性增加而增强 | 洗涤后检测caspase活性标记信号,可区分凋亡细胞、活细胞和死细胞 | ||||||
靶向的Caspase | Caspase-3/7 | Poly-caspase | Caspase-3/7 | Poly-caspase | Caspase-3/7 | |||
推荐检测通道 | FITC | FITC | TRITC | FITC | ||||
Em/Ex (nm) | 502/530 | 502/530 | 550/595 | 488/530 | ||||
核染料 | SYTOX® AADvanced | 不含 | Hoechst 33342 SYTOX Green | Hoechst 33342 PI | ||||
样本 | 活细胞染色且可兼容固定 | |||||||
规格 | 100 反应 | 100 µl | 25 µl | 1 Kit | 1 Kit | |||
货号 | C10427 | C10423 | C10723 | R37111 | I35101 | I35102 | I35104 | I35106 |
处于凋亡中的细胞表现出细胞核染色质凝聚的增强。 随着染色质的凝聚,细胞可渗透核酸染料发出超亮荧光,使得结合传统的死亡细胞染色就可以确认凋亡细胞。
货号 | 名称 | 激光 | 激发/发射光波长 | 应用 |
---|---|---|---|---|
H1399 | Hoechst 33342 | UV | 350/461 | 流式 |
V35003 | Vybrant DyeCycle™ Violet | 405 | 369/437 | |
Y3603 | YO-PRO-1碘化物 | 488 | 491/509 | |
R37605 | NucBlue™ Live ReadyProbes™即用型滴瓶装 | UV | 360/460 | 成像 |
R37106 | NucRed™ Live 647 ReadyProbes™即用型滴瓶装 | 640 | 638/686 | |
R37606 | NucBlue™ Fixed Cell ReadyProbes™ 即用型滴瓶装 | UV | 360/460 |
细胞凋亡时出现的DNA片段化会产生DNA链断裂,推荐使用TUNEL技术 (末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记) 标记断裂的DNA片段,进行分析。
Invitrogen™ Click-iT™ TUNEL 显微成像试剂盒
分析试剂可标记DNA断裂检测细胞凋亡。与其他传统使用修饰核苷酸的检测方法相比,Click-iT TUNEL方法能够检测到更高比例的凋亡细胞。Click-iT 采用“点击化学”技术,通过使用叠氮和炔基两步小分子快速反应进行标记,可用于TUNEL 凋亡检测、细胞增殖、RNA合成、新蛋白合成、脂质过氧化反应等多种检测。
Click-iT TUNEL 技术优势:
货号 | 名称 | 包装 | 应用 |
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C10245 | Click-iT TUNEL Alexa Fluor 488 Imaging Assay | 1 kit | 成像&HCS |
C10246 | Click-iT TUNEL Alexa Fluor 594 Imaging Assay | 1 kit | |
C10247 | Click-iT TUNEL Alexa Fluor 647 Imaging Assay | 1 kit | |
C10617 | Click-iT Plus TUNEL for in situ apoptosis detection, Alexa Fluor 488 dye | 50 assays | |
C10618 | Click-iT Plus TUNEL for in situ apoptosis detection, Alexa Fluor 594 dye | 50 assays | |
C10619 | Click-iT Plus TUNEL for in situ apoptosis detection, Alexa Fluor 647 dye | 50 assays | |
C10625 | Click-iT TUNEL Colorimetric IHC Detection Kit | 50 assays | IHC |
APO™-BrdU TUNEL 流式试剂盒
该试剂盒包含标记和探测凋亡细胞 DNA 链断裂所需的所有材料。 DNA 链被核酸酶切割或产生切口时,大量 3’ 羟基端暴露出来。 在 APO-BrdU 分析中,通过 TUNEL 技术用 BrdUTP 和末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT) 标记这些末端。 待其掺入 DNA 后,即可用明亮和光稳定的绿色荧光 Alexa Fluor® 488 染料标记的抗 -BrdU 抗体检测 BrdU。
货号 | 名称 | 激光 | 激发/发射光波长 | 应用 |
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A23210 | APO-BrdU™ TUNEL Assay Kit, with Alexa Fluor™ 488 Anti-BrdU | 488 | 495/519 | 流式 |
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