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Sanger法测序工作流程
通过我们已验证的工作流程来产生高质量的Sanger测序数据
我们简单而快速的Sanger测序工作流程可在一个工作日内完成从样本到结果的全部过程。Thermo Fisher Scientific提供的Applied Biosystems产品可用于支持我们推荐工作流程中的许多步骤，包括从PCR扩增到数据分析。了解更多关于我们推荐的Sanger测序工作流程的每一步。
视频：如何进行Sanger测序
Sanger测序套餐*可享受15%的优惠*
工作流程信息
用于PCR和Sanger测序的引物设计工具
使用我们的在线Primer Designer™工具，从数据库中搜索正确的PCR/Sanger测序引物对。我们的数据库包含约650,000个用于人类外显子组和人类线粒体基因组测序的预设计引物对。从不同的扩增子长度中进行选择，以适应不同类型的研究应用和生物样本。
- 我们的引物不含已知的SNPs和引物二聚体，具有高度靶点特异性，适用于通用PCR条件
- 完全的引物覆盖，适用于Ion AmpliSeq™ Exome Panel和Ion AmpliSeq™ Cancer Hotspot Panel v.2 Sanger验证工作流程
- 灵活的引物构型，可满足您的研究需求：您可选择订购无修饰、M13、HPLC纯化或脱盐的引物
- 所有引物都经过质谱检测，并且已通过严格的生物信息学指标；实验室验证测试显示成功率大于95%
AmpliTaq Gold 360 Master Mix预混液
AmpliTaq Gold 360 Master Mix预混液在含有成功进行PCR扩增所需的全部组分。所有组分都是预混合并预测量的。AmpliTaq Gold 360 Master Mix预混液设计用于目标全长的360°覆盖。
- 扩增一系列不同目标(<3 kb)，包括高GC含量、高AT含量、连续重复碱基等
- 超高产量，实现PCR扩增子的更多应用
- 在降低细菌背景的同时帮助减少假阳性的结果
- 来自可信来源的可重复结果
ExoSAP-IT Express试剂：最为快速的PCR纯化方法
Applied Biosystems ExoSAP-IT Express 试剂可提供快速的实验周期以及更为高效的资源利用，并能保证同原版ExoSAP-IT试剂具有相同一流的纯化效果。无需离心柱、磁珠、沉淀、过滤和凝胶纯化。全新ExoSAP-IT技术可实现用最少的步骤在显著缩短的时间里完成样品的纯化，具有最为简单的工作流程。
- 5分钟操作步骤
- 一管式，一步法PCR纯化
- 全新的酶技术
- PCR产品的100%回收
视频：如何使用ExoSAP-It Express试剂进行PCR反应的纯化
我们在持续开发一流的Sanger测序试剂盒，以实现为所有应用和模板提供解决方案。
BigDye Direct 循环测序试剂盒
Applied Biosystems BigDye Direct 循环测序试剂盒通过将PCR后的纯化和循环次数整合至一步，简化了产业标准Sanger测序的工作流程。BigDye Direct 循环测序试剂盒需要PCR引物带有M13尾，可通过引物设计工具进行获取。
视频：使用BigDye Direct 循环测序试剂盒进行测序
BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit
The Applied Biosystems BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit's robust, highly flexible chemistry is ideal for de novo sequencing, resequencing, and finishing with PCR product, plasmid, fosmid, and BAC templates.
BigDye Terminator v1.1 Cycle Sequencing Kit
The Applied Biosystems BigDye Terminator v1.1 Cycle Sequencing Kit is designed for specialty applications that require optimal basecalling adjacent to the primer, and for sequencing short PCR product templates with rapid electrophoresis run modules.
BigDye XTerminator纯化试剂盒
Applied Biosystems BigDye XTerminator 纯化试剂盒可为DNA测序反应去除未插入的BigDye终止子和盐离子提供一种快速而简单的纯化方法。再也没有染料团！纯化过程通过可在40分钟内完成而手工操作时间一般短于10分钟。
视频：如何使用BigDye XTerminator试剂盒纯化测序反应
三种不同的聚合物试剂，分别用于不同的需求：
POP-4聚合物
- 低粘稠度，快速运行
- 绝大多数用于人类鉴定应用及其他片段分析应用，以及短DNA片段（<500 bp）的测序
- 可用于Applied Biosystems 310，3130/xl以及3500/XL仪器
POP-6 聚合物
- 更为粘稠，低速运行
- 为毗邻测序引物的核苷酸提供优质的分辨率。绝大多数与BigDye Terminator v1.1循环测序试剂盒联合使用，用于短PCR产物的测序
- 可用于310, 3130/xl以及3500/XL仪器
POP-7 聚合物
- PDMA及LPA的混合
- 绝大多数与BigDye Terminator v3.1循环测序试剂盒联合使用，用于长达~1,000 bp读长的测序
- 也可用于片段分析应用
- 可用于3130/xl，3500/xL以及3730/xl仪器
Minor Variant Finder软件
通过免费Applied Biosystems Minor Variant Finder软件而实现的灵敏度提升使得Sanger法测序成为肿瘤学家和病理学家用于低频（5%或更低）体细胞突变（通常相关目标的数量也有限）检测的理想选择。该软件对您现有的Singer测序工作流程无需做出改变。
优点包括：
- 检测频率低至5%的低频突变
- 低成本实现中等数量目标的测序
- 用于二代测序结果的验证，并可提供比对视图及韦恩图结果
视频：如何使用Sanger测序进行低频突变的检测
Sanger Analysis Modules—免费云端工具
Applied Biosystems Sanger Analysis Modules是免费的创新性云端二级数据分析工具，可将多个数据集的结果简便地汇总在一起。该在线解决方案可更加容易地进行Sanger测序数据的查看、储存和分析。
主要功能包括：
- 二代测序（NGS）结果验证—对NGS变异结果进行集中验证
- 带有绝对基因组坐标信息报告—不再需要根据参考基因组进行计算
- 自动化数据库查询—对于SNP可自动添加基因组注释信息
- .vcf格式文件输出便于下游分析—利用Ion Reporter注释流程在多个数据库中进行查询
用于PCR和Sanger测序的引物设计工具
使用我们的在线Primer Designer™工具，从数据库中搜索正确的PCR/Sanger测序引物对。我们的数据库包含约650,000个用于人类外显子组和人类线粒体基因组测序的预设计引物对。从不同的扩增子长度中进行选择，以适应不同类型的研究应用和生物样本。
- 我们的引物不含已知的SNPs和引物二聚体，具有高度靶点特异性，适用于通用PCR条件
- 完全的引物覆盖，适用于Ion AmpliSeq™ Exome Panel和Ion AmpliSeq™ Cancer Hotspot Panel v.2 Sanger验证工作流程
- 灵活的引物构型，可满足您的研究需求：您可选择订购无修饰、M13、HPLC纯化或脱盐的引物
- 所有引物都经过质谱检测，并且已通过严格的生物信息学指标；实验室验证测试显示成功率大于95%
AmpliTaq Gold 360 Master Mix预混液
AmpliTaq Gold 360 Master Mix预混液在含有成功进行PCR扩增所需的全部组分。所有组分都是预混合并预测量的。AmpliTaq Gold 360 Master Mix预混液设计用于目标全长的360°覆盖。
- 扩增一系列不同目标(<3 kb)，包括高GC含量、高AT含量、连续重复碱基等
- 超高产量，实现PCR扩增子的更多应用
- 在降低细菌背景的同时帮助减少假阳性的结果
- 来自可信来源的可重复结果
ExoSAP-IT Express试剂：最为快速的PCR纯化方法
Applied Biosystems ExoSAP-IT Express 试剂可提供快速的实验周期以及更为高效的资源利用，并能保证同原版ExoSAP-IT试剂具有相同一流的纯化效果。无需离心柱、磁珠、沉淀、过滤和凝胶纯化。全新ExoSAP-IT技术可实现用最少的步骤在显著缩短的时间里完成样品的纯化，具有最为简单的工作流程。
- 5分钟操作步骤
- 一管式，一步法PCR纯化
- 全新的酶技术
- PCR产品的100%回收
视频：如何使用ExoSAP-It Express试剂进行PCR反应的纯化
我们在持续开发一流的Sanger测序试剂盒，以实现为所有应用和模板提供解决方案。
BigDye Direct 循环测序试剂盒
Applied Biosystems BigDye Direct 循环测序试剂盒通过将PCR后的纯化和循环次数整合至一步，简化了产业标准Sanger测序的工作流程。BigDye Direct 循环测序试剂盒需要PCR引物带有M13尾，可通过引物设计工具进行获取。
视频：使用BigDye Direct 循环测序试剂盒进行测序
BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit
The Applied Biosystems BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit's robust, highly flexible chemistry is ideal for de novo sequencing, resequencing, and finishing with PCR product, plasmid, fosmid, and BAC templates.
BigDye Terminator v1.1 Cycle Sequencing Kit
The Applied Biosystems BigDye Terminator v1.1 Cycle Sequencing Kit is designed for specialty applications that require optimal basecalling adjacent to the primer, and for sequencing short PCR product templates with rapid electrophoresis run modules.
BigDye XTerminator纯化试剂盒
Applied Biosystems BigDye XTerminator 纯化试剂盒可为DNA测序反应去除未插入的BigDye终止子和盐离子提供一种快速而简单的纯化方法。再也没有染料团！纯化过程通过可在40分钟内完成而手工操作时间一般短于10分钟。
视频：如何使用BigDye XTerminator试剂盒纯化测序反应
三种不同的聚合物试剂，分别用于不同的需求：
POP-4聚合物
- 低粘稠度，快速运行
- 绝大多数用于人类鉴定应用及其他片段分析应用，以及短DNA片段（<500 bp）的测序
- 可用于Applied Biosystems 310，3130/xl以及3500/XL仪器
POP-6 聚合物
- 更为粘稠，低速运行
- 为毗邻测序引物的核苷酸提供优质的分辨率。绝大多数与BigDye Terminator v1.1循环测序试剂盒联合使用，用于短PCR产物的测序
- 可用于310, 3130/xl以及3500/XL仪器
POP-7 聚合物
- PDMA及LPA的混合
- 绝大多数与BigDye Terminator v3.1循环测序试剂盒联合使用，用于长达~1,000 bp读长的测序
- 也可用于片段分析应用
- 可用于3130/xl，3500/xL以及3730/xl仪器
Minor Variant Finder软件
通过免费Applied Biosystems Minor Variant Finder软件而实现的灵敏度提升使得Sanger法测序成为肿瘤学家和病理学家用于低频（5%或更低）体细胞突变（通常相关目标的数量也有限）检测的理想选择。该软件对您现有的Singer测序工作流程无需做出改变。
优点包括：
- 检测频率低至5%的低频突变
- 低成本实现中等数量目标的测序
- 用于二代测序结果的验证，并可提供比对视图及韦恩图结果
视频：如何使用Sanger测序进行低频突变的检测
Sanger Analysis Modules—免费云端工具
Applied Biosystems Sanger Analysis Modules是免费的创新性云端二级数据分析工具，可将多个数据集的结果简便地汇总在一起。该在线解决方案可更加容易地进行Sanger测序数据的查看、储存和分析。
主要功能包括：
- 二代测序（NGS）结果验证—对NGS变异结果进行集中验证
- 带有绝对基因组坐标信息报告—不再需要根据参考基因组进行计算
- 自动化数据库查询—对于SNP可自动添加基因组注释信息
- .vcf格式文件输出便于下游分析—利用Ion Reporter注释流程在多个数据库中进行查询
Sanger 测序化学研究指南
科学家和研究人员使用Sanger法测序的完美手册。在该化学手册中，您将了解到Sanger测序从工作流程到应用的基本原理。
- Sanger 测序应用
- DNA模板制备
- 循环测序
- 延伸产物的纯化
- 毛细管电泳
- 数据分析
- 故障排除
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.