实验时遇到困难？

我们致力于成就您的成功。话不多说。查看我们针对常见问题场景的专家建议。

浏览以下相关问题：

实验新手？访问我们的

入门页面

一般问题

我的过滤板漏液。我该怎么操作？

以下是一些可能的原因和问题的解决方案：

原因

解决方案

将过滤板放置在工作台和摇床上的吸水材料上（这会在吸水材料与过滤漏斗底部的开口接触时导致芯吸（wicking））。

 

将当前使用的板放在另一块过滤板的顶部，使得当前使用的过滤板仅与非吸水表面接触。这也有助于找到任何潜在的泄漏。 

在孵育之前，使用Kimwipe™薄纸轻轻向上按压每个孔以干燥板的底部。

在孵育期间（使用胶带或夹子）在板上施加了垂直压力。

使用夹子夹在过滤板侧面，以使板子在孵育时固定在摇床上。

使板经受大于5mm Hg的真空压力，即使时间很短，这个压力也会撕裂过滤膜或产生超过体积保留设计极限的开口。 

在将板放置在多联器（manifold）表面上之前打开并调节多联器上的真空并用测试板（即，不是用于检测的板）检查真空，防止任何真空激增。对于我们的检测产品，我们建议设置不超过5 mm Hg。

试剂上样过程中移液器吸头一直插在孔中，导致吸头刺穿过滤膜。

沿着孔的侧面吸移溶液，而不是深入孔中。

在开始之前将过滤板的软（不透明）塑料底部与硬（透明）塑料顶部分开，这会损害密封的完整性，即使这两个部件重合在一起后看起来非常紧密。 

如果您不小心将板的这两层分开，则应丢弃该板并使用新板。

运行结束后，我在仪器的XY平台托盘上观察到液体。这可能是什么导致的？

这可能源于探针高度设置得太低，并且来自液体回流的压力迫使液体穿过过滤膜。但是，请记住，只要在合理的时间范围内读取所要求的100个微珠，即已正确读取样品。如果难以达到100个微珠，则液体可能已在读取样品之前泄漏。在这种情况下，停止运行并检查板是否泄漏。如果发现泄漏，请取下真空多联器上的洗涤液并完全干燥板底部。添加新鲜的洗涤液并摇晃。从停止的步骤开始继续运行。 

注意：有关检查和重置样品探针（取样针）高度的说明，请参阅相应的仪器硬件手册。 

我过滤板的孔堵塞了。你们有什么建议吗？

如果在第一次标准品孵育后孔被堵塞：

  • 当清洗部分板时，真空可能不完整，因为空气会从空孔中进入。我们建议用Parafilm™薄膜覆盖板以形成密封，这会由此提高压力使其足以排空孔。 
  • 如果有一个小的堵塞，即使它足以防止吸入也可能很难看到它。对于这种情况，我们建议使用15 mL锥形管的尖端从左向右轻轻地摩擦孔底部开口的尖端。这种方法仅移除小的堵塞。 
  • 疏通孔的其他方法有，使用戴手套的手指或拇指从孔上方施压，同时在板下方放吸水纸巾，或者使用大注射器针头疏通排水孔。
我的样品的读数显示它们超过可检测上限。我该怎么操作？

建议如下：

  • 使用此处的数据分析工具验证您的标准曲线。
  • 确保您的稀释因子设置正确。
  • 可能需要进行样品优化：用适当的稀释液稀释样品并重新读数。
我的样品的读数显示它们低于可检测下限。你们有什么建议？

建议如下：

  • 使用此处的数据分析工具验证您的标准曲线。 
  • 确保您的稀释因子设置正确。
  • 可以扩展标准曲线的功能灵敏度，以更好地区分曲线下端的数据。这可以通过添加一个或两个更高稀释度值绘制标准曲线来实现，并对较低浓度的样品重新进行检测。
  • 可能是您的目标蛋白质水平低于检测的检测限值。
我的标准曲线的微珠计数是正确且有规律的，但对于我样品的微珠计数不稳定，我收到一条警告消息“获取时至少有一个区域没有达到最大值”。我该怎么操作？

这一消息表示出现样品基质效应。建议如下：

  • 确认样品已澄清且没有碎屑。 
  • 确认已使用适合您样品类型的试剂。 
  • 确认血清、血浆、CSF和培养上清液样品中样品与检测稀释液的比例至少为1：1。对于细胞裂解物或组织匀浆，确认样品已被适当稀释以将裂解缓冲液中的去垢剂浓度降低至≤0.01％。对于其他样品类型，可能需要进一步的样品优化。 
我所有检测孔的微珠计数都不稳定。出现了什么问题？

建议如下：

  • 查看警告消息。
  • 检查仪器设置并确保它们适合于正在运行的检测。
  • 检查检测中使用的工作流程和试剂：体积、添加顺序、孵育时间和温度等。
  • 查看您的运行生成的微珠图和柱状图以查找不规律性。将模式与仪器操作手册“问题排查”部分中的模式进行比较。这将指导所需的进一步的问题排查步骤。例如：系统中的气泡、探针高度校正、鞘液不相容。 
在数据分析期间，微珠没有出现在门控区域中。为什么？

这表示最后一步使用了不正确的缓冲液。必须使用试剂盒中提供的洗涤液洗涤微珠并在微珠上样至LuminexTM仪器之前将其重悬。溶液的渗透压将影响微珠的尺寸，而微珠尺寸的任何变化都将改变仪器的检测。

在数据分析期间，微珠落在微珠图上其微珠区域的下方或左下方。为什么会这样？

以下是可能的原因和问题的解决方案：

  • 这通常表明微珠已经光漂白。这个问题也可能由于将微珠暴露于有机溶剂中引起。不幸的是，必须重复该检测，因为微珠不能恢复。必须保护珠子免受光和有机溶剂的影响。
  • 或者，仪器可能在其测量中关闭，或者可能存在校准问题。致电制造商进行服务预约。
我收到一条警告消息，出现微珠高度聚集。我该怎么操作？

以下是可能的原因和问题的解决方案：

  • 超声和涡旋没有使微珠充分混合：将微珠涡旋至少30秒，然后将其超声处理至少30秒，然后将其加入检测中。确保您的摇床已正确设置，可以在孵育步骤中在孔中实现绝佳的微珠移动。
  • 由于孔中的微珠悬浮液体积不足以达到仪器探针的高度，空气进入Luminex™仪器的管线中：确认微珠悬浮在适量的溶液中（参见检测特定的说明）。调整样品探针高度。 

需要更多资料？联系我们 ›

仅供研究使用。不可用于诊断操作。