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    概述

    试剂盒中的绿色染料是细胞通透性核酸染色剂,会标记所有细胞。红色染料不能渗透进细胞,只能对膜受损的细胞(死细胞)进行染色。因此,任何具有红色信号的细胞会被认为是死亡的。您的细胞可能会出现有些只有红色信号,有些有红色和绿色信号,有些只有绿色信号的现象。有时红色染料会置换绿色染料。在任何情况下,红色细胞都是死亡的。

    另外,绿色染料可能漏进红色通道。进行单色染色,同时在绿色和红色滤光片下检查确定漏光程度。为了避免这种漏光的情况,请使用低浓度的染料;如果可能的话,使用窄带通滤光片。

    支原体污染在很多情况下无法从培养物中除去,因此应该丢弃污染的培养物。可能你们有特殊的培养物不舍得丢弃,打算尝试净化。Ciprofloxacin和Plasmocin™经报道可用于此类应用。如果您对上述应用的实验方案或指导原则感兴趣,请向抗生素供应商核实或查阅发表的文献。需要注意的是,支原体极难从培养物中去除且很容易扩散,所以培养物应该隔离处理,直到支原体被清除,并实验室需要彻底净化。

    在富营养培养基(高糖)中生长的细菌往往难以裂解。您可以尝试减少葡萄糖浓度。B-PER试剂能够裂解包括E. coli,Acetinobacter,Archaebacteria,S. aureus,H. pylori,昆虫杆状病毒,线虫和昆虫细胞在内的细菌和细胞。B-PER试剂可以裂解一些革兰氏阳性菌,但是裂解革兰氏阴性细菌的效率通常更高。如果对某一特定细菌菌株裂解效果不佳,则请在裂解前冷冻细菌。添加溶菌酶是最有效的提取手段,但是对于一些过表达蛋白则不需要加入溶菌酶。

    酵母可以在加入15%甘油后放于-80℃下冷冻存储。甘油储存的酵母可以无限储存(除非有大量的冻-融操作)。