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您需要在提取前将病毒从细胞中分离出来,以避免样品中细胞核酸的污染。
提取的RNA量本身就比较少,或者在乙醇沉淀过程中将RNA沉淀丢失,都可能导致RNA产量低。另外,不同组织的RNA含量不同,RNA的产量取决于样本的种类。
这一问题的出现可能有以下几个原因:
在使用RiboMinus™试剂盒分离纯化RNA前,使用DNaseI消化总RNA样品,以除去基因组DNA的污染。
将软布或纸巾用温和的去垢剂、肥皂水或酒精润湿,然后擦拭磁力棒。
如果没有向磁棒套架插入磁棒套则程序不会开始运行。
如果起始材料过于粘稠,磁力棒将不能完全吸取磁珠。可以尝试稀释样本,并检查样本是否使用正确的方法进行匀浆及裂解。
这种情况有时会发生,但是这不会影响产量,因为样本已经从磁珠上被洗脱下来了。
一个可能的原因是塑料的磁棒套由于其本身的设计稍有弯曲。这也是为什么磁棒套是成对包装的,以保持它们的形状。您可以手动调整磁棒套主板的弯曲度,并再试一次。
关闭机器,然后检查仪器是否有可见的损伤。确保正在运行的实验程序使用的是正确的磁头。如果机器没有可见的损伤,请重新打开机器。这时,机器将会重置。如果问题又立即重新出现,则将机器关闭,并将磁头轻轻移到它移动路径的中央,然后再次重启机器。如果问题仍然出现,请拨打客服电话,联系重置磁力棒。
很不幸,磁珠被冷冻后,将失去结合RNA的能力,不能继续使用。
请按照下列建议步骤处理:
将软布或纸巾用温和的去垢剂、肥皂水或酒精润湿,然后擦拭磁力棒。
如果没有向磁棒套架插入磁棒套,则程序不会开始运行。
如果起始材料过于粘稠,那么磁力棒将不能完全吸取磁珠。可以尝试稀释样本,并检查样本是否使用正确的方法进行匀浆及裂解;向样本内加入少量去垢剂也可以提高磁珠的回收率;还可以对样品板进行快速离心,使磁珠沉积在板的底部,以提高磁珠的回收率。
这种情况有时会发生,但是这不会影响产量,因为样本已经从磁珠上被洗脱下来了。
不能,一旦实验程序停止,它将从头重新开始运行。您可以使用磁力架手动完成剩下的提取程序,或者从实验停止的步骤开始重新创建一个修改版的KingFisher™ Flex实验程序并运行该程序。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.