蛋白质凝胶电泳槽、电源及附件支持 - 故障排除

请务必查看电源、设备或凝胶是否存在问题。通常，切断电源或开盖查看是否有连接错误可帮助解决问题。同时，应检查凝胶盒底部的胶带是否已去除以及缓冲液核心装置是否损坏。此外，应确保电泳槽中的缓冲液足以浸没凝胶的上样孔。

以下是可能原因和解决方案：

• 使用了浓度过高或错误的缓冲液。应检查缓冲液配方；必要时，稀释或重新配制。
• 电压、电流或功率设置过高。将电源条件降低至推荐的电泳条件。

在IEF电泳期间，电流下降至低于1 mA很常见。大部分电源会将此记录为“空载”错误并自动关闭，导致电泳停止。一些电源可通过禁用或关闭“负载检测”功能来避免上述情况的发生。

在NativePAGE™电泳期间，电流下降至低于1 mA很常见。大部分电源会将此记录为“空载”错误并自动关闭，导致电泳停止。一些电源可通过禁用或关闭“负载检测”功能来避免上述情况的发生。

以下是可能原因和解决方案：

• 缓冲液稀释过度。检查缓冲液配方；必要时，重新配制。
• 上层缓冲液槽泄漏。应确保缓冲液核心装置稳固，垫片在原位，并且凝胶张力操纵杆已锁定。
• 电压设置过低。设置正确的电压。

我们建议在加入上层缓冲液槽之前，使用记号笔在凝胶盒上标记出孔的底部。此外，我们也推荐将光源直接放置在XCell SureLock™ Mini-Cell装置后方，照亮实验台区域。

您可购买Novex™电源适配器，货号ZA10001，帮助您将电源线连接到电源上。

以下是一些建议：

• 检查电源装置。
• 再次确认凝胶盒底部的胶带已去除。
• 确保凝胶安装方向正确，即凝胶盒较高的一面（有印刷字体）面向电泳装置的外侧。
• 确保在缓冲液槽内部加入了足够的缓冲液，可浸没上样孔。若未浸没上样孔，应检查是否有泄漏并重新封装。
• 再次检查电极或Mini cell装置的连接处是否有松动。

以下是可能原因和解决方案：

• 缓冲液稀释过度。检查缓冲液配方；必要时，重新配制。
• 缓冲液槽泄漏。确保凝胶盒夹安置稳固，垫片在原位，并且凝胶盒夹已锁定。
• 电流设置过低。设置正确的电流。

以下是可能原因和解决方案：

• 使用了浓度过高或错误的缓冲液。应检查缓冲液配方；必要时，稀释或重新配制。
• 电流设置过高。将电流降低至推荐的电泳条件（见使用手册第8页）。

以下是可能原因和解决方案：

• 凝胶盒底部留有胶带。应从凝胶盒底部去除胶带。
• 与电源连接不良。使用电压表检测所有连接处的电导率。
• 缓冲液不足。应确保电泳槽中的缓冲液足以浸没凝胶的上样孔。

我们建议在将凝胶盒放置在电泳槽中之前，使用记号笔在凝胶盒上标记出孔的底部。

我们的新型Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶具有10 cm凝胶盒，专用于小型凝胶电泳槽（货号A25977）。若这些凝胶使用Bolt™小型凝胶电泳槽进行电泳，为了获得最佳结果，有必要升级 电泳槽，可将黑色10.5 cm凝胶盒夹凸轮手柄更换为灰色10 cm凝胶盒夹凸轮手柄（货号A26732）。凸轮手柄更换说明见使用手册第20页或视频。

在没有灰色10 cm凝胶盒夹凸轮手柄（货号A26732）的情况下，请遵循使用手册第22页关于使用Bolt™小型凝胶电泳槽进行10 cm Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶电泳的说明。

以下是可能原因和解决方案：

• 缓冲液稀释过度。检查缓冲液配方；必要时，重新配制。
• 缓冲液槽泄漏。应确保凝胶盒夹安置稳固，垫片在原位，并且凝胶盒夹已锁定。
• 电压设置过低。设置正确的电压。

我们建议在将凝胶盒放置在凝胶电泳槽中之前，使用记号笔在凝胶盒上标记出孔的底部。

以下是出现波浪形条带的可能原因和解决方案：

• 缓冲液槽内外的缓冲液高度不同。缓冲液槽内外的缓冲液必须全都到达电极高度并完全浸没上样孔。这样不仅可以防止缓冲液从内向外泄漏，还能起到散热的作用，从而防止出现波浪形条带。
• 所用电泳缓冲液稀释度大于1X。我们推荐使用1X电泳缓冲液。
• 使用了旧的电泳缓冲液。应确保使用新鲜的电泳缓冲液，并且不要重复利用电泳缓冲液。

这可能是因为Bolt™凝胶盒在安装至电泳槽时插反了（大玻璃板朝前，上样孔朝后），尽管这很难实现。当凝胶反向插入时，电流从凝胶底端流向顶端，导致样品反向电泳。对调导线将转换凝胶电泳方向，但会导致电流从阳极流向阴极。阴极是由带有铂涂层的不锈钢制成，阳极是由铂丝制成。电子从阳极流向阴极，会导致钢芯生锈。但是，当正确连接导线时，电子从阴极流向阳极，铂丝作为电子受体则不会生锈。

注意：当凝胶盒正确插入时，凝胶盒上的印刷字体（凝胶类型、SKU和有效期）是反向的（从右向左阅读）。

以下是一些可能原因和解决方法：

• 缓冲液从电泳槽内部泄漏到外部。泄漏最可能是由于凝胶盒移除不当，导致垫片位置不正，密封不良。我们建议用拇指向下推垫片。
• 缓冲液未完全浸没上样孔。我们建议在插入凝胶盒之前，在电泳槽中将缓冲液加至电极的高度。完全填满电泳槽不仅可以防止缓冲液向外泄漏，还能起到散热的作用。
• 未将凝胶盒上的胶带去除。应确保在将凝胶盒插入电泳槽前去除胶带。
• 未将凝胶盒放到电泳槽底部就将其夹紧（这会使底部形成电流分流，导致凝胶电泳缓慢或完全不能电泳）。

以下是可能原因和解决方案：

• 电压设置过低。按照使用手册的说明设置正确的电压。
• 缓冲液稀释过度。检查缓冲液配方；必要时，重新配制。
• 上层缓冲液槽泄漏。应确保缓冲液核心装置安置稳固。若您使用了缓冲液挡板，应确保将挡板正确安装到核心中。如果核心垫片损坏，应更换新的垫片。应确保XCell4 SureLock™组装体处于锁定位置。

我们推荐使用Novex™电源适配器（货号ZA10001），帮助您将导线连接到您的电源上。该适配器随XCell4 SureLock™ Midi-Cell一起提供。如果使用这种适配器不能解决问题，您可联系电源生产商询问是否有其他方法。

以下是可能原因和解决方案：

以下是可能原因和解决方案：

这表示电路中断。请进行以下检查：

• 确认使用了正确的电泳缓冲液。
• 确认所有电线正确连接。
• 关闭电源并重新启动；重新开启应用。
• 如果您无法重启仪器，请关闭电源并从电源插座上拔掉电源线，然后发送邮件至lifescience-CNTS@thermofisher.com来联系技术服务。

这最可能是因为在运行期间检测到接地泄漏。应检查电泳系统是否存在不正确的接地情况，然后关闭和打开电源开关以重启电源。

这可能是因为电源过热。请执行以下操作：

• 关闭电源。检查电源风扇周围的气流是否充足。降温后，通过接通电源开关重启电源。
• 如果您无法重启仪器，请关闭电源并从电源插座上拔掉电源线，然后发送邮件至lifescience-CNTS@thermofisher.com来联系技术服务。

以下是可能原因和解决方案：

以下是发生这种情况的可能原因：

• 在电泳过程中增加或移除电泳系统
• 连接系统中出现缓冲液泄漏
• 过度升温
• 过多的缓冲液蒸发
• 连接系统中出现连接松动
• 电流设置过低

以下是出现该错误的可能原因和解决方案：

• 恒定电压模式改变为恒定电流模式
  • 电流极限设置过低，对电流上限产生冲击，从而使恒定电压模式改变为恒定电流模式。应升高电流极限至3 A。
• 恒定电流模式改变为恒定电压模式
  • 电压设置过低，对电压上限产生冲击，从而使恒定电流模式改变为恒定电压模式。应升高电压极限值250V。

PowerEase™ 300W电源配有一个备用保险丝。请参见使用手册第19页对更换保险丝的详细说明。

在NativePAGE™电泳期间，电流下降至低于1 mA很常见。PowerEase™ 300W电源会将此记录为“空载”错误并自动关闭，导致电泳停止。由于PowerEase™ 300W电源无法禁用/关闭“负载检测”功能，所以我们不推荐将其用于Native-PAGE电泳。

以下是可能原因和解决方案：

• 确认使用了正确的电泳缓冲液。
• 确认所有电线正确连接。
• 关闭电源并重新启动；重新开启应用。
• 如果您无法重启仪器，请关闭电源并从电源插座上拔掉电源线，然后发送邮件至lifescience-CNTS@thermofisher.com来联系技术服务。

这最可能是因为在运行期间检测到接地泄漏。应检查电泳系统是否存在不正确的接地情况，然后关闭和打开电源开关以重启电源。

这可能是因为电源过热。请执行以下操作：

• 关闭电源。检查电源风扇周围的气流是否充足。降温后，通过接通电源开关重启电源。
• 如果您无法重启仪器，请关闭电源并从电源插座上拔掉电源线，然后发送邮件至lifescience-CNTS@thermofisher.com来联系技术服务。

以下是可能原因和解决方案：

以下是发生这种情况的可能原因：

• 在电泳过程中增加或移除电泳系统
• 连接系统中出现缓冲液泄漏
• 过度升温
• 过多的缓冲液蒸发
• 连接系统中出现连接松动
• 电流设置过低

以下是出现该错误的可能原因和解决方案：

• 恒定电压模式改变为恒定电流模式。电流极限设置过低，对电流上限产生冲击，从而使恒定电压模式改变为恒定电流模式。应升高电流极限至500 mA。
• 恒定电流模式改变为恒定电压模式。电压设置过低，对电压上限产生冲击，从而使恒定电流模式改变为恒定电压模式。应升高电压极限值300V。

PowerEase™ 90W电源配有一个备用保险丝。请参见使用手册第17页对更换保险丝的详细说明。

以下是可能原因和解决方案：

• 电源线未连接或保险丝熔断。检查电源线两端的连接情况或更换保险丝。
• 二次关机。按键盘上的电源开关按钮。

注意：PowerEase™ 500电源已于2013年12月31日起停产，我们的替代产品为PowerEase™ 90W电源和PowerEase™ 300W电源。

以下是可能原因和解决方案：

• 电泳槽未连接、在电泳过程中断开连接或电泳槽中存在短路。应检查电源和电泳槽的连接处，确保连接完好无损。
• 由预制胶上的胶带残留、错误的缓冲液浓度或电泳槽中错误的缓冲液体积导致 高电阻。按停止按钮。确保移除预制胶上的胶带、正确配制缓冲液并在电泳装置中加入推荐的缓冲液体积。重启方法。

注意：PowerEase™ 500电源已于2013年12月31日起停产，我们的替代产品为PowerEase™ 90W电源和PowerEase™ 300W电源。

我们建议重置装置，方法是按住前面板的电源按钮，同时将后方的电源开关关闭并再次开启。然后松开前方的电源按钮。

注意：PowerEase™ 500电源已于2013年12月31日起停产，我们的替代产品为PowerEase™ 90W电源和PowerEase™ 300W电源。

当缓冲液温度超过预设的温度极限时，会发生这种情况。我们推荐检查电流和功率设置是否符合正确的运行条件。同时，确保正确配制缓冲液并升高温度极限。

注意：PowerEase™ 500电源已于2013年12月31日起停产，我们的替代产品为PowerEase™ 90W电源和PowerEase™ 300W电源。

这表示所选的凝胶数量超过设定的电流极限。由于凝胶数量受到可用最大电流的限制，所以我们推荐减少凝胶数量或改变电流设置。

注意：PowerEase™ 500电源已于2013年12月31日起停产，我们的替代产品为PowerEase™ 90W电源和PowerEase™ 300W电源。

这表示所选的凝胶数量超过设定的功率极限。由于凝胶数量受到可用最大功率的限制，所以我们推荐减少凝胶数量或改变功率设置。

注意：PowerEase™ 500电源已于2013年12月31日起停产，我们的替代产品为PowerEase™ 90W电源和PowerEase™ 300W电源。

以下是更换PowerEase™ 500电源保险丝的说明：

1. 关闭PowerEase™ 500电源后方的主电源开关，从PowerEase™ 500电源后方拔掉电源线。
2. 将一字螺丝刀插入开关上方的槽内，转动螺丝刀，轻轻撬开保险丝盒，打开电源接入模块内部的保险丝盒（见使用手册第8页的PowerEase™ 500电源后视图）。
   注意：未拔掉电源线时，保险丝盒不会打开。
3. 从盒内拉出保险丝座，检查保险丝。如果保险丝烧断或保险丝组件有损坏，则使用指定型号的保险丝进行更换（见使用手册第29页的图）。
4. 将保险丝座放回盒内，确保保险丝座上的箭头与保险丝盒内侧的箭头指向同一个方向。
5. 将盖子扣紧。

注意：PowerEase™ 500电源配备的备用保险丝已于2013年12月31日起停产。/p>

出现这种错误信息是因为电源检测到通过设备的电流不足。这种错误信息最常见于PowerEase™ 500电源用于IEF凝胶或NativePAGE™ Blue凝胶电泳时，这种情况下电流会降到非常低的水平。通过禁用“负载检测”功能（仅在出现错误信息时这样做）可避免上述问题的出现；菜单屏幕显示了运行参数，您可在选中电压时点击向左箭头，转到“负载检测”。使用向上或向下箭头，将“负载检测”由“开”调到“关”（见下图）。这种改变应该不会使凝胶电泳出现问题。

注意：PowerEase™ 500电源已于2013年12月31日起停产，我们的替代产品为PowerEase™ 90W电源和PowerEase™ 300W电源。

PowerEase™ 500电源已于2013年12月31日起停产。我们不提供该仪器的原理图、零部件或维修服务。

PowerEase™ 500电源已于2013年12月31日起停产。我们不提供该仪器的重新校准服务。

高电压指示灯（琥珀色或红色）是表示电源正在运行的警示灯。该灯亮起时，不要拔掉电源线。

干燥速度太快会使凝胶变白，这通常发生在过度通风或温暖的环境下。您可用Kimwipe™纸在凝胶上轻轻涂去离子水，使变白部分再水化。然后在黑暗、干燥、不通风的地方再次干燥凝胶，例如抽屉或橱柜。

通常情况下，不需要剥离玻璃纸。如果您的信号非常微弱并且您担心信号获取，那么，可先使用湿毛巾摩擦凝胶的上表面，再剥离玻璃纸。然后，将凝胶通风干燥几分钟，再进行放射自显影检测。

请参考以下可能原因和解决方案：

以下是可能原因和解决方案：

• 低电流关闭功能开启。检查电源。按照生产商的说明，禁用低电流关闭功能，从而使电源在低电流下也能运行。
• 槽内存在气泡。避免槽组装管或样品槽内存在气泡。如果有气泡，使用凝胶上样滴管将其刺破。

以下是可能原因和解决方案：

• 缓冲液槽内使用了错误的缓冲液。根据使用手册的说明，使用稀释的阳极和阴极缓冲液。如果您自己配制阳极和阴极缓冲液（见使用手册中的配方），应使用赖氨酸（游离碱）和精氨酸（游离碱）。不要使用赖氨酸HCl和精氨酸HCl。
• 试剂质量差或尿素降解。制备样品和缓冲液时，应使用高质量、蛋白质组学级别的试剂。应使用新配制的或在-80℃冻存的尿素溶液。按照生产商的说明，在混合离子交换树脂上将尿素溶液去离子化。

以下是可能原因和解决方案：

• 缓冲液槽内使用了错误的缓冲液。根据使用手册的说明，使用稀释的阳极和阴极缓冲液。我们推荐使用能够设置功率和电流极限的电源，以避免过高的电流对组分分离器造成意外损害。
• 高盐浓度。将样品中的盐浓度限制在10mM或更低。

阳极端密封器连接有一个黑色的环状摩擦密封圈。如果难以将阳极端密封器插入槽组装管中，可去掉黑色的环状摩擦密封圈。

去掉环状摩擦密封圈可能导致阳极端密封器和样品槽滑入槽组装管中。如果发生这种情况，则在阳极端密封器上添加一个环状摩擦密封圈。

检查样品槽或凹槽是否有任何损坏。使用备件盒中的另一个样品槽。

尝试用棉签在密封圈周围轻轻涂抹硅胶，润滑阴极槽密封器（黑色环状）。大部分实验通常都有硅胶。如果槽密封器损坏，则使用备件盒中新的槽密封器更换。

这可能是因为样品槽间发生泄漏。请根据使用手册中的说明，将样品槽安装到槽组装管中。分离器组装不恰当，会导致密封不良，引起组分泄漏和污染。应按照使用手册的说明，将样品槽环状密封器正确插入到样品槽的凹槽中，并将ZOOM™ Disk放到槽上。

一个可能的原因是电极间连接不良或电路未闭合。应确保在Electrode Wicks中加入600 μL去离子水，并且凝胶暴露于凝胶盒的阳极和阴极端。检查电源。确保关闭电源的“负载检测”功能，使电源能够在低电流下运行。

以下是可能原因和解决方案：

• 蛋白质上样量较低。增加蛋白质上样量。使用精确和灵敏的蛋白质定量方法。
• 样品制备不恰当。增加溶解试剂。使用至少8 M尿素进行溶解。加入DTT和非离子去污剂（详情见使用手册）。
• 胶条摆放方向错误。按照使用手册的说明，正确排列胶条。确保在将胶条安装到ZOOM™ IPGRunner™ 凝胶盒中时，使凝胶面朝上。
• 胶条和2D凝胶间有气泡。排出所有气泡。
• 检测方法不灵敏。应使用灵敏的检测方法，如银染或免疫印迹法。

以下是可能原因和解决方案：

• 高盐浓度。将样品中的盐浓度限制在10 mM或更低。如果可能，通过超滤、透析或凝胶过滤调整样品中的盐浓度。
• High Power. Check power settings.
• 高功率。检测功率设置。
• 胶条再水化不佳。按照使用手册的说明，将胶条放置在140 μL样品再水化缓冲液中1小时进行再水化。如果使用155 μL再水化缓冲液，可将再水化时间延长至过夜。应确保再水化缓冲液完全浸没胶条。
• 内槽中有液体。不要在内槽中加入任何液体。检测内槽中是否有液体渗入。

以下是可能原因和解决方案：

• 交流电电源线未连接。检查交流电电源线两端的连接情况。使用正确的电源线。
• 保险丝熔断。按照使用手册中的说明来更换保险丝。

以下是可能原因和解决方案：

• 在很低的电流下运行高电压应用。关闭电泳屏幕上的空载警报（详情见使用手册），例如在运行等电点聚焦应用的情况下。
• 电泳导线未连接到电源或电泳装置，或电泳槽出现短路。检查电源和电泳槽的连接处，确保连接完好无损；检查电泳装置中的电线。重新连接好电线以接通电路。按开始/暂停按钮，重新开始电泳。
• 由预制胶上的胶带残留、错误的缓冲液浓度或电泳槽中错误的缓冲液体积导致的高电阻。应确保移除预制胶上的胶带、正确配制缓冲液并在电泳装置中加入推荐的缓冲液体积。

这表示电路中断。请进行以下检查：

• 确认使用了正确的电泳缓冲液。
• 确认所有电线正确连接。
• 关闭电源并重新启动；重新开启应用。
• 如果您无法重启仪器，请关闭电源并从电源插座上拔掉电源线，然后发送邮件至lifescience-CNTS@thermofisher.com来联系技术服务。

这表示在运行期间检测到接地泄漏。应检查电泳系统是否存在不正确的接地情况。然后关闭和打开电源开关以重启电源。

这表示电源过热。关闭电源并检查电源风扇周围的气流是否充足。降温后，通过接通电源开关重启电源。如果您无法重启仪器，请关闭电源并从电源插座上拔掉电源线，然后发送邮件至lifescience-CNTS@thermofisher.com来联系技术服务。

以下是更换ZOOM™ Dual Power Supply保险丝的说明：

注意：ZOOM™ Dual Power Supply有一个备用保险丝。

1. 关闭 ZOOM™ Dual Power Supply后方的主电源开关，从 ZOOM™ Dual Power Supply后方拔掉电源线。
2. 将一字螺丝刀插入开关上方的槽内，转动螺丝刀，轻轻撬开保险丝盒，打开电源接入模块内部的保险丝盒（见使用手册第13页的 ZOOM™ Dual Power Supply后视图）。
   注意：未拔掉电源线时，保险丝盒不会打开。
3. 从盒内拉出保险丝座，并检查保险丝。如果保险丝烧断或保险丝组件有损坏，则使用保险丝座内提供的指定型号保险丝（4 A/250 V）进行更换（见使用手册第39页的图）。
4. 将保险丝座放回盒内。
5. 将盖子扣紧。