연구용 AAV 생산

비용 효율적이고 확장 가능한 AAV vector 생산은 상업적 수요를 충족하는 데 중요하며, 임상 생산으로의 원활한 확장이 필수적입니다. 이러한 요구를 해결하기 위해 당사는 생산 비용을 절감하고 연구 단계에서 임상 규모로의 전환을 간소화하는 완전한 AAV 생산 시스템을 개발했습니다.

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• 높은 AAV 역가 - 생산 비용을 절감하는 데 도움이 됩니다.
• 확장성 - shake flask에서 바이오리액터 크기까지 확장 가능한 프로토콜을 갖춘 suspension 시스템
• 간소화된 워크플로우 - helper virus-free의 triple transfection을 사용한 간소화된 프로토콜
• 동물 유래 성분 무함유(AOF)
• Clonal 293F-derived producer cell

그림 1. Gibco AAV-MAX Helper Free AAV Production System의 구성 요소.

Gibco AAV-MAX Helper Free AAV Production System에는 clonal HEK293F 유래 suspension 세포, 화학적으로 정의된 동물 유래 성분 무함유, 무혈청 배지, 특허 받은 형질주입 시약, booster, 새로운 production enhancer 및 polysorbate 20 기반 용해 완충액이 포함되어 있습니다.

AAV-MAX 시스템은 suspension AAV 생산을 위한 확장형 고역가의 플랫폼을 제공합니다. 이 제품은 바이러스 생산 배지에서 clonal 293F 유래 Viral Production Cell 2.0의 고밀도 suspension 배양에 기반합니다. 최적의 바이러스 역가는 새로운 생산용 enhancer와 결합하여 당사의 고급 지질 나노입자 형질주입 시약을 통해 실현됩니다(그림 1).

AAV-MAX 시스템의 구성 요소는 서로 상승 효과를 극대화할 수 있도록 설계되었으며 이를 통해 최대 역가가 실현되어 시약과 프로토콜을 최적화할 필요가 없습니다. 이러한 완전한 시스템은 개별 구성 요소를 교환하거나 기존의 polyethyleneimine(PEI) 기반 형질주입 시약을 사용하는 것에 비해 더 높은 역가를 만들어 냅니다(그림 2).

그림 2. 이 완전한 시스템은 대체 형질주입 시약에 비해 최대 AAV 역가를 제공합니다. AAV2 및 AAV6는 AAV-MAX 시스템을 사용하여 125mL shake flask에서 30mL 용량으로 생산되었습니다. 이러한 데이터를 통해 다른 형질주입 시약을 사용할 때 관찰되는 역가에 비해 완전형 시스템을 사용하였을 때 가장 높은 역가가 나타났음을 알 수 있습니다. 역가는 qPCR로 측정되었습니다. 데이터는 완전형 AAV-MAX 시스템의 역가(vg/mL)로 정규화되었습니다.
 

혁신적인 AAV-MAX Helper-Free AAV 생산 시스템은 여러 AAV 혈청형에 대해 높은 역가로 AAV 벡터를 원활하고 효율적으로 생성할 수 있도록 지원하는 완전형의 최적화된 부유 시스템입니다.

그림 3. 이 시스템은 여러 AAV serotype에 대해 높은 역가를 산출합니다. AAV-MAX 시스템을 사용하여 125mL shake flask에서 30mL 용량으로 5개의 AAV serotype을 생산하였습니다. 이러한 데이터는 5가지 serotype에 대해 높은 게놈 역가, 높은 세포 생존력 및 높은 생존 세포 밀도(VCD)를 달성했음을 보여줍니다. 역가는 qPCR로 측정되었습니다.
 

AAV-MAX 시스템은 PEI 기반 생산 시스템에 비해 더 적은 부피에서 동일한 바이러스 역가를 획득하도록 지원합니다. 이를 통해 배지, 다운스트림 정제, 실험실 공간 및 노동력을 절감할 수 있습니다.

이러한 이점을 바탕으로 보다 작은 배치 크기로 작업함으로써 오염 위험을 완화할 수 있습니다. 또한 AAV-MAX 시스템은 대체 형질주입 시약보다 1x10⁶ 세포당 플라스미드 DNA가 더 적게 필요하기 때문에 생산 비용을 더욱 절감할 수 있습니다.

기존 AAV 생산 시스템과 관련된 문제로 낮은 역가, 높은 비용의 cGMP 플라스미드 DNA, 낮은 확장성 및 목적에 맞는 cGMP 시약의 부족 등이 있습니다. AAV-MAX 시스템은 확장한 체적에 맞게 바이러스 역가가 유지되는 확장형 부유 플랫폼에서 AAV 생산을 위해 개발된 사전 최적화된 규제 준수* 시약을 사용하여 높은 AAV 역가를 생산함으로써 이러한 문제를 극복하도록 지원합니다.

* CTS AAV-MAX Helper Free Production System과 함께 사용할 수 있습니다(2022년 출시).

이 페이지에 언급된 제품의 용도는 다양합니다. 구체적인 용도 설명은 제품 라벨을 참조하십시오.