Análisis de proteínas y genes multiplex en una plataforma

La plataforma Luminex permite a los investigadores combinar flujos de trabajo cuantitativos de proteínas y expresión génica sin comprometer la calidad ni la sensibilidad. Los ensayos Invitrogen ProcartaPlex e Invitrogen QuantiGene Plex permiten un exclusivo enfoque multiómico de alto rendimiento que utiliza la plataforma de instrumentos Luminex. Los instrumentos Luminex son una consolidada familia de instrumentos diseñados para la cuantificación de varios analitos a partir de una sola muestra de bajo volumen mediante la tecnología xMAP. Los ensayos QuantiGene Plex y ProcartaPlex permiten la medición de hasta 80 objetivos de ARN o proteínas, respectivamente. Ambas plataformas de ensayos ofrecen ensayos predefinidos y personalizados. Descubra cómo crear un ensayo personalizado con nuestras nuevas herramientas de configurador de paneles para ensayos QuantiGene Plex y ProcartaPlex.


Tecnología xMAP

La tecnología Luminex xMAP (Multi-Analyte Profiling o perfiles multianalito) combina fluídica avanzada, óptica y procesamiento de señales digitales con tecnología de microesferas propia para ofrecer capacidades de ensayos multiplexados. La tecnología xMAP utiliza microesferas o gránulos marcados mediante fluorescencia, lo que permite la captura simultánea de hasta 80 analitos de proteínas u 80 genes a partir de una sola reacción. Los ensayos Invitrogen QuantiGene Plex y ProcartaPlex utilizan la tecnología xMAP para realizar una amplia gama de ensayos multiplex basados en ácidos nucleicos y proteínas.

 

Los gránulos se leen individualmente utilizando una de las cuatro plataformas de instrumentos Luminex xMAP: INTELLIFLEX, Luminex 200 (LX200), FLEXMAP 3D y MAGPIX. Estos instrumentos utilizan analizadores basados en los principios de citometría de flujo fluorescente o microscopía fluorescente cuantitativa y están diseñados para satisfacer las necesidades de los laboratorios de investigación de cualquier tamaño.


Detección de proteínas con ensayos ProcartaPlex en la plataforma Luminex

Los inmunoensayos multiplex ProcartaPlex son ensayos basados en gránulos para la cuantificación de proteínas basados en los principios de un ELISA tipo sándwich con el uso de la tecnología Luminex xMAP. Los ensayos ProcartaPlex están disponibles para su uso con suero, plasma, lisados de células y tejidos y sobrenadantes de cultivos celulares, y pueden ser adecuados para otros fluidos corporales. Los ensayos se proporcionan en varios formatos, incluidos 96 y 384 pocillos, en seis especies: humano, ratón, rata, primate no humano, porcino y perro.

 

Los paneles preconfigurados y personalizados están disponibles para cada etapa de su investigación, desde el descubrimiento hasta la detección específica.. Los conjuntos de gránulos también están disponibles como kits Simplex para analitos individuales para mantener la uniformidad entre los paneles.

¿Cómo funcionan los ensayos ProcartaPlex?

(A) Los ensayos ProcartaPlex utilizan la tecnología xMAP para medir hasta 80 analitos de proteínas diferentes simultáneamente por pocillo. Los anticuerpos de captura están unidos a gránulos Luminex que están teñidos internamente. La conjugación de un anticuerpo específico a un gránulo distinto permite el análisis de varios analitos en un solo pocillo, por ejemplo, IL-9 se captura a través de la región de gránulos n.º 12. (B) Las muestras se mezclan con los conjuntos de gránulos. Los analitos de interés dentro de la muestra están unidos por los anticuerpos de captura. Se añaden anticuerpos de detección marcados con fluorescencia (ficoeritrina) específicos de los analitos de interés, formando un sándwich de antígeno-anticuerpo. (C) Los ensayos completados se leen en un instrumento Luminex donde un láser clasifica el tipo de gránulo para determinar el analito que se detecta, mientras que un segundo láser determina la magnitud del analito enlazado (señal derivada de PE).


Expresión génica con ensayos QuantiGene Plex en la plataforma Luminex

La plataforma de instrumentos y gránulos Luminex también es útil para el estudio de la expresión génica cuando se utiliza con ensayos QuantiGene Plex. El ensayo QuantiGene Plex está basado en hibridación e incorpora tecnología de ADN ramificado (bDNA), que utiliza la amplificación de la señal en lugar de la amplificación del objetivo para la medición directa de transcritos de ARN. El ensayo es extremadamente fácil de usar con un sencillo flujo de trabajo similar a ELISA.

 

Los ensayos QuantiGene Plex son compatibles con muchos tipos de muestras difíciles, incluyendo el ARN degradado y cruzado en tejidos FFPE y sangre. No se requiere purificación de ARN, conservando valiosas muestras. Se pueden detectar hasta 80 genes en el mismo pocillo de una placa de 96 o 384 pocillos, lo que maximiza la salida de datos.


Configurador de panel personalizado para la detección de proteínas y ARN

Diseñe su propio inmunoensayo multiplex para la detección de proteínas mediante un instrumento Luminex. Seleccione una especie, un formato de ensayo y cualquier número de objetivos disponibles, y construiremos un ensayo personalizado de acuerdo con sus especificaciones.

Para el Configurador del panel de expresión génica QuantiGene Plex, puede solicitar un presupuesto para un panel de ADN o ARN multiplex personalizado para su uso con el ensayo Invitrogen QuantiGene Plex. Agregue objetivos a su panel mediante la herramienta de búsqueda de palabras clave o importando su propio archivo de texto, guarde o exporte su panel para futuras consultas y solicite un presupuesto.

Características del instrumento Luminex

Sistema de fluídica del instrumento Luminex

El sistema Luminex interroga los gránulos individuales por citometría de flujo. El sistema de fluídica del lector alinea los gránulos en una sola fila a medida que entran en una corriente de líquido envolvente y después en una celda de flujo. Cuando los gránulos están en una sola fila de la celda de flujo, cada gránulo se analiza individualmente para buscar el color del gránulo (analito) y la intensidad de la señal del ensayo (intensidad de fluorescencia de PE). Esta tecnología establecida garantiza la captura de todos los datos.

Láseres para la detección de alta sensibilidad

Los láseres tienen sensibilidad para detectar cantidades muy pequeñas de analitos. El lector utiliza un láser verde de 532 nm (láser «de ensayo») para excitar el tinte de PE del ensayo (estreptavidina-PE). El láser de estado sólido de 635 nm (láser rojo «de clasificación») se utiliza para excitar los tintes dentro de los gránulos y determinar su «color» o «región». También se utiliza para la discriminación de dobletes por dispersión de la luz. El sistema DR-SE xMAP INTELLIFLEX incluye un láser adicional de indicador violeta (405 nm) que es capaz de medir hasta dos parámetros por región de gránulos.

Detectores

Los lectores tienen varios detectores, uno para cada una de las rutas ópticas. Los detectores se utilizan para medir la fluorescencia del ensayo, determinar los gránulos (de 1 a 500) y discriminar entre gránulos individuales y agregados. Los resultados se recopilan en un ordenador.

Alto rendimiento

Los ensayos ProcartaPlex y QuantiGene Plex diseñados para placas de 384 pocillos, en combinación con las capacidades de los sistemas xMAP INTELLIFLEX y FLEXMAP 3D para leer dichas placas permiten el uso de aplicaciones de alto rendimiento. Mida hasta 65 proteínas o genes en un solo pocillo para obtener conjuntos de datos completos en muchas muestras. Estudie las vías completas dentro de un pocillo y obtenga conjuntos de datos más completos al detectar compuestos, medir respuestas inmunitarias y mucho más.


Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.