Strings DNA片段合成服務

* 生產時間是指在我們的生產設施中合成GeneArt Strings DNA產品所需的工作日數。交貨時間是指生產時間之外的時間，並取決於貨物的目的地。

經菌落PCR鑑定得到正確長度的選殖百分比（選殖效率），以及基於全長選殖數量的正確序列之選殖百分比（保真度）。

使用8個長度不同（最長達2,800 bp）且具合適序列末端（AarI識別序列和6 bp填充核苷酸）的Strings DNA片段，並透過GeneArt IIs型組裝試劑盒Aar I 直接組裝。由此得到4個基因長度分別為5,056 bp、5,061 bp、5,267 bp和5,448 bp。在連接和轉殖後，將細菌鋪盤培養並於37°C 培養過夜。挑取16個選殖菌落，進行菌落PCR鑑定以確定全長選殖。對於所有4個組裝基因的8個菌落，都進行定序以確定序列正確的選殖數量。

10個長達3,000 bp的Strings DNA片段，使用GeneArt無縫選殖和組裝試劑盒進行選殖。在連接和轉化後，將細菌鋪盤並於37°C培養過夜。挑取8個（<1kb）或16個（>1kb）選殖菌落，進行菌落PCR鑑定以確定全長選殖；對4至8個全長選殖進行定序，以確定序列正確的選殖數量。

雖然Strings DNA片段的長度可達3,000 bp，GeneArt無縫組裝技術可用於直接組裝兩個長達1 kb的Strings DNA片段，而無需預選殖子片段。

如果您想使用無縫組裝技術組裝更多的Strings DNA片段、或更長的Strings DNA片段，建議對子片段進行預選殖，以減少為尋找正確選殖所需的組裝後篩選工作。此外，您也可以使用GeneArt Type IIs型組裝技術。

將5個長達1,000 bp並帶有attB位點的Strings DNA片段，選殖至pDONR 221中。在連接和轉殖後，將細菌鋪板盤於37°C 培養過夜。挑取8個選殖菌落，進行菌落PCR鑑定以確定全長選殖；對4至7個全長選殖進行定序，以確定序列正確的選殖數量。

Strings DNA產品可以使用任何選殖方法進行基因選殖，前提是設計中已包含合適的末端。末端序列可以在將序列上傳至GeneArt Services服務訂購中心之前添加，也可以在導入後添加。

Strings DNA片段是由寡核苷酸組裝而成的PCR擴增子，可隨時用於篩選，以鑑定出正確的選殖。Strings DNA片段會進行批量定序以作為品質管控的一部分，以幫助確保您所需的片段存在於產物中。

為了在超過90%的情況下鑑定出正確選殖，我們建議使用以下篩選指南。

GeneArt Strings DNA片段是定製的、非選殖的雙股線性DNA片段，由合成的寡核苷酸組裝而成，長度從200個鹼基對（bp）到3,000個鹼基對不等，採用與GeneArt高品質基因合成相同的製程。Strings片段可用於快速選殖您感興趣的基因。我們可在3-5個工作日（至多1,000 bp）或8個工作日（1,000到3,000 bp）之內生產至少200 ng的Strings DNA片段。GeneArt Strings DNA片段可於線上設計、優化序列和訂購，是選殖您表達質體的一種經濟高效的明智選擇。

雖然我們過去曾提供100–199 bp的Strings DNA片段，但目前已不再提供。

Strings片段是由寡核苷酸組裝而成的擴增子（PCR擴增）；是基因合成生產過程的中間產物。該過程會生成一個片段庫，因此需要進行選殖和篩選以鑑定正確的選殖。Strings片段在交付前會進行大量的定序管控，以確保片段庫中存在您所需的正確片段。

Strings DNA片段產品作為乾燥粉末提供，可直接用於再回溶和選殖。我們建議您開管之前先進行離心，向管底添加適量的水以獲得所需濃度，並放置於室溫下培養靜置至少1小時（或放於4°C靜置過夜）。隨後，小心再懸浮內容物並立即使用。如需長期儲存，請將Strings DNA片段再懸浮後，等量分裝並冷凍於–20°C。請避免反覆解凍。

不一樣。200至1,000 bp的Strings DNA片段的生產需要5個工作日，而1,000至3,000 bp的Strings DNA片段的生產則需要8個工作日。根據序列本身的性質，生產時間亦可能有所不同。

是的。由於您需要自己進行選殖才能獲得最終基因，因此Strings DNA片段的價格始終比基因合成便宜。

有的。我們建議使用GeneArt線上訂購平台進行下單，您可以使用免費的基因編輯和優化功能，來調整序列以滿足您的需求。在編輯和優化後，請再次檢查片段的最終序列是否完全符合實驗室進一步處理的需求（例如，片段的潛在同源重疊、或選殖所需的限制性位點和緩衝鹼基）。

沒有。Strings DNA片段不提供亞選殖和組裝服務，因為它旨在為您提供最快速、最實惠的基因獲取方式。如果您不想自己選殖基因，我們推薦您訂購全基因合成服務。

可以。您可以直接組裝2個Strings片段，而無需預選殖。Thermo Fisher Scientific提供多種無縫組裝技術，如GeneArt Type IIs型組裝或GeneArt無縫選殖和組裝技術。請參閱本頁的應用實例部分以獲得詳細資訊。根據序列長度和您想要組裝的子片段數量，尋找正確選殖的篩選難度可能很高。因此，我們通常建議進行預選殖子片段，以降低組裝後尋找正確選殖所需的篩選工作。

不是。Strings DNA片段的長度僅限於200至3,000 bp。如果您的序列較長，您需要以基因合成的方式訂購，或經由兩個或多個Strings DNA片段進行組裝。此外，Strings DNA片段的生產流程經過簡化，可以快速且經濟地為您提供基因產品。如果您的序列很複雜，您可能會收到訊息告知，指出由於複雜性過高而無法以Strings DNA片段形式生產。在這種情況，我們建議修改您的序列以符合生產要求（生產標準見下文），或以基因合成方式訂購您的基因。大部分情況下，使用訂購平台的基因優化功能可以使您的序列滿足Strings片段生產要求。如果仍然無法滿足生產需求，您可以手動編輯序列以實現生產。

重要的生產標準包括：

• GC含量在20% 至80% 之間（峰值，而非總體含量）
• 無長的二級結構或序列重複
• 無 >25 bp的A/T延伸，或 >20 bp的G/C延伸