HEPES

Gibco HEPES (4-(2-hidroxietil)-1-ácido piperazineetanesulfônico) é um agente de tamponamento químico orgânico zwitteriônico e é categorizado como um "bom" tampão que deriva de um conjunto de tampões descritos pelo Dr. Norman Good e seus colegas em 1966 (Good et. al., Biochemistry 1966). 

"Bons tampões", como o HEPES, possuem as seguintes caraterísticas:

  • valores de pKa entre 6.0 e 8.0
  • alta solubilidade
  • impermeabilidade da membrana
  • efeito limitado nas reações bioquímicas
  • absorção de luz ultravioleta e visível muito baixa
  • quimicamente e enzimaticamente estável
  • fácil de preparar.

O HEPES é amplamente usado em muitas reações bioquímicas e como agente de tamponamento em alguns meios de cultura celular.

Uso do HEPES na cultura celular

O sistema de tamponamento mais comumente usado para meio é o bicarbonato.  Isso se deve aos benefícios nutricionais, apesar da redução da capacidade de tamponamento em pH fisiológico.  A adição do HEPES fornece tamponamento suplementar ao meio de cultura celular com pH de 7.2 a 7.6.

O nível do HEPES no meio de cultura celular pode variar de 10 mm a 25 mm.  DMEN  GIBCO, ele está em uma concentração de 25 mm.   DMEM/F-12 GIBCO, é de 15 mm.  A concentração mais comumente usada é 25 mm. 

O HEPES não tem benefício nutricional para as células.  Ele é adicionado ao meio apenas para capacidade extra de tamponamento quando a cultura celular requer longos períodos de manipulação fora de uma incubadora de CO2.

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