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Suplementos de medios para cultivo celularConsulte el folleto de cultivos celulares Solicitar tampones de cultivo celular |
Los suplementos de medios son a menudo un componente crucial para que los experimentos de cultivo celular salgan bien. El uso de suplementos de cultivo celular aporta gran cantidad de ventajas, como personalizar las condiciones de crecimiento de las células, mejorar la viabilidad y el crecimiento celulares y conservar las células en buen estado durante más tiempo.
Los suplementos de medios de cultivo celular Gibco contribuyen a garantizar la fiabilidad y la uniformidad de sus cultivos celulares y resultados de investigación.
El uso de suplementos de medios de cultivo celular adecuados con antibióticos puede proteger sus células de la contaminación. Además, ciertos antibióticos de selección sirven para llevar a cabo de forma estable la transfección y el desarrollo de estirpes celulares.
La L-glutamina es un suplemento esencial que proporciona energía para dividir rápidamente las células. Gibco GlutaMAX ofrece una mayor estabilidad y favorece el bienestar de las células.
Los factores de crecimiento y las citocinas son importantes para la proliferación y el desarrollo de células en el cultivo. Los factores de crecimiento recombinantes y las citocinas Gibco PeproTech ofrecen calidad y uniformidad para respaldar los cultivos celulares sólidos y los modelos de enfermedades.
Es importante facilitar un tampón a las células que las proteja frente a los cambios en el pH. Este tampón esencial se consigue mediante la incorporación de HEPES o un tampón con bicarbonato de sodio en los medios de cultivo celular.
BSA aporta una mejor nutrición a las células en cultivo, lo que reduce la necesidad de suplementación con suero. BSA también es útil en otros flujos de trabajo de laboratorio, incluso como reactivo de bloqueo para inmunoensayos.
Producimos una amplia selección de suplementos de medios de cultivo celular para facilitar el crecimiento y el mantenimiento de sus células. Elija los suplementos de medios Gibco para personalizar su cultivo celular.
El bicarbonato sódico (NaHCO3) es un tampón común que se emplea en el cultivo celular para mantener el pH del medio en presencia de dióxido de carbono del 4 al 10 %. Además, el bicarbonato de sodio ofrece algunas ventajas nutricionales y rara vez es tóxico para las células.
La concentración final de bicarbonato sódico en los medios depende tanto de la formulación del medio como de la concentración de dióxido de carbono de la incubadora. Se recomienda el uso de diferentes concentraciones de CO2 en función de la concentración de bicarbonato sódico que se vaya a elegir. Si la formulación del medio contiene:
Aunque el bicarbonato es el tampón de cultivo celular que se emplea con mayor frecuencia debido a sus ventajas nutricionales, la capacidad de tampón del bicarbonato se reduce al pH fisiológico en comparación con el tampón HEPES. HEPES no ofrece ventajas nutricionales a las células, pero se puede añadir a los medios de cultivo celular en tampón a un pH de 7,2 a 7,6. Por tanto, la incorporación de HEPES proporciona una mayor capacidad de tampón cuando el cultivo celular requiere largos periodos de manipulación fuera de una incubadora de CO2.
Gibco HEPES (ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinetanosulfónico) es un agente tampón químico orgánico de ión dipolar y se clasifica como un «buen» tampón que deriva de un conjunto de tampones descritos por el Dr. Norman Good y sus colegas en 1966 (Good, et al. Biochemistry 1966).
A los «tampones buenos» como HEPES se les atribuyen las siguientes características:
El nivel de HEPES en el medio de cultivo celular puede variar de entre 10 mM y 25 mM. En DMEM Gibco, HEPES está presente en una concentración de 25 mM. Sin embargo, en DMEM/F-12 Gibco, se encuentra a una concentración de 15 mM. La concentración que se emplea con mayor frecuencia es de 25 mM.
El compuesto químico 2-Mercaptoetanol, utilizado con mucha frecuencia, procede de la fórmula HOCH2CH2SH. Es un híbrido de etilenglicol y se utiliza para reducir los enlaces disulfuro. Al eliminar los radicales hidroxilos (entre otros), puede actuar como un antioxidante biológico. El grupo hidroxilo confiere solubilidad en agua y reduce la volatilidad.
Para prolongar la viabilidad de las células en el cultivo y estimular el crecimiento, se pueden añadir suplementos de aminoácidos a los medios. Además, la incorporación de un suplemento de aminoácidos aporta nutrientes y reduce la carga biosintética sobre las células in vitro. Los aminoácidos no esenciales de esta solución se preparan en agua destilada y contienen 100 veces la concentración en un medio MEM-alfa.
El suplemento HAT es una mezcla líquida de hipoxantina sódica, aminopterina y timidina. Tras su dilución, HAT es adecuado para su uso como medio selectivo posterior a la fusión para eliminar las células de mieloma HGPRT que no se hayan fusionado o autofusionadas. La hipoxantina y la timidina proporcionan purinas y pirimidinas preformadas para la síntesis de ADN mediante hibridomas a través de la vía de rescate que utiliza HGPRT, que aporta la célula de fusión del bazo. El antagonista del ácido fólico, la aminopterina, inhibe la vía de la biosíntesis de exonucleósidos de novo.
El líquido suplementario HT es una mezcla de hipoxantina sódica y timidina. Después de la dilución, el suplemento HT es adecuado para su uso como medio de rescate. El suplemento HT proporciona purinas preformadas y pirimidinas para combatir los efectos de la aminopterina intracelular residual. Tras el restablecimiento de la vía de la biosíntesis de novo , se puede interrumpir la suplementación con HT.
La incorporación de la solución de vitamina MEM a los medios puede aumentar el crecimiento celular y la viabilidad del cultivo y reducir la carga biosintética de las célulasin vitro. Las vitaminas de esta solución, que se han preparado con una solución salina al 0,85 %, suponen 100 veces la concentración en un medio MEM estándar.
El piruvato sódico se utiliza a menudo como suplemento en medios de cultivo celular como fuente adicional de carbono. El piruvato sódico Gibco para el cultivo celular se suministra como una solución de 100 mM (100X) con una concentración final de 11 004 mg/L.
La fitohemaglutinina es una solución que se obtiene a partir de un extracto crudo de habas rojas Phaseolus vulgaris. Cuando se aplica a ciertas concentraciones, este suplemento puede inducir la blastogénesis en varias células in vitro mononucleares de mamíferos.
Gibco cell culture products are manufactured in facilities compliant with current good manufacturing practices (GMP) and adhere to a robust quality management system, helping to ensure the consistency, reliability, and high quality you can rely on.
We are committed to delivering products that serve the research needs of our customers, while striving to develop them in a way that minimizes our use of natural resources and our impact on the environment.
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