mRNA Therapeutics Commercial Supply

新兴治疗技术的发展 和商业化给市场带来了新的挑战，包括如何建立关键原材料的安全供应链到如何获得定制化解决方案。在Thermo Fisher Scientific，我们将利用我们广泛而深厚的技术和资源来应对这一挑战，以全力支持您的工作。让我们为您的研究应用选择合适的产品。

我们的解决方案涉及 mRNA 治疗开发的所有方面

产品

  • Thermo Scientific 综合全面的 TheraPure 体外转录试剂
  • 经验证的 Invitrogen Dynabeads 磁珠，可实现出色的可重复性检测
  • 丰富且独有的 mRNA 递送试剂

特点

  • 可扩展的体系，通过临床开发和商业化支持早期研究
  • 通过持续不断的流程优化驱动引领创新
  • 专业的技术专家团队
  • 出色的质量管理体系
  • 灵活的授权许可

核酸治疗网络研讨会:

mRNA 疫苗开发的关键原料
主讲人：Andrius Kocevas，产品经理，Thermo Fisher Scientific

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mRNA 治疗开发关键步骤中产品供应

Synthesis
  • TheraPure NTP
  • TheraPure 修饰核苷酸
  • TheraPure 酶（无动物源和无氨苄青霉素）
Purification
  • Dynabeads MyOne Carboxylic Acid 磁珠
Formulation and delivery
  • Invivofectamine Rx 试剂
mRNA 合成

mRNA 疗法的快速发展使得常规的、科研级的 体外转录 (IVT) 试剂不能满足需求，更需要按照更高质量标准专门设计和生产的原材料（表1）。用于 mRNA 疗法开发的 TheraPure 试剂可让我们的合作伙伴充分利用我们经验丰富的开发、分析和生产团队。

表 1.体外 RNA 合成解决方案。

产品质量控制生产

IVT 试剂：

  • TheraPure T7 RNA 聚合酶
  • TheraPure RNA 酶抑制剂 
  • TheraPure 无机焦磷酸酶
  • TheraPure NTP
  • TheraPure 修改核苷酸
  • ARCA (抗-反向帽类似物)

转录后修饰：

  • TheraPure 加帽酶
  • TheraPure 2’-O-甲基转移酶
  • TheraPure Poly (A) 聚合酶

模板降解：

  • TheraPure DNase I
  • ISO13485 和ISO9001 认证生产设施
  • 定制化 QC 检测
    • 生物负荷检测（微生物污染）
    • 内毒素检测
    • 核糖核酸酶检测
    • 残留宿主 DNA 检测
    • 内源或外源脱氧核糖核酸酶检测
    • 功能测试
    • 蛋白纯度检测
  • 规模化生产能力
  • 100,000 级洁净室标准（D级）
  • 定制配方和测试
  • 定制开发核酸试剂，包括修饰核苷酸和加帽试剂
  • 定制化分装、包装和标签

无动物源 (AOF) 和无氨苄青霉素 (AF) 酶

用于体外转录的 TheraPure 酶在严格无动物源和无氨苄青霉素条件下生产。这些酶在培养基中培养后经完全纯化确保无动物源成分。我们的 AOF 生产过程消除了朊病毒（牛海绵状脑病和传染性海绵状脑病）和病毒性疾病风险。整个生产过程中，从发酵到酶的配制，动物源成分均被AOF成分替代 。

生产过程中动物源成分的缺失可最大限度减少对溯源性文件和责任追溯的需求。此外，AF酶有助于降低氨苄青霉素过敏反应和其它副作用的风险。

mRNA 纯化

通过体外转录获得的 mRNA 需要经过几轮纯化。传统的纯化方案（如酚氯仿处理后进行沉淀或柱离心）步骤较多，纯化能力有限且不容易实现自动化。基于磁珠的纯化方案则较灵活、可扩大纯化规模且兼容自动化。 使用 Invitrogen Dynabeads MyOne Carboxylic acid 和独有 binding buffer 进行 mRNA 纯化，可比传统纯化方法获得更高的产量。

捕获纯化

  • Invitrogen Dynabeads MyOne Carboxylic Acid 用于 mRNA 的捕获（图1）
  • 流程化纯化
  • 在保密协议范围内，可提供经优化的缓冲液
  • 提高的 mRNA 浓度
图示为体外转录的 RNA 样本在结合、漂洗、mRNA 回收等步骤的纯化方案

图 1.使用 Invitrogen Dynabeads MyOne Carboxylic Acid 的捕获流程。

结合能力

  • 每毫克 Dynabeads MyOne Carboxylic Acid 可纯化高达 1.6 mg mRNA
  • 灵活、可扩展的实验方案，具有很高的回收率（图2）
直方图显示基于Dynabeads MyOne羧酸的mRNA纯化协议可以按比例缩放到所需的反应量，每mg珠的产量为1mg mRNA，不像旋转柱是不可缩放的。

图 2.mRNA 的高回收率，使用 Invitrogen Qubit 4 荧光计检测。

制剂和递送

作为世界领先的体外转染试剂供应商，我们的科学家团队致力于不断开发新技术，以满足日益增长的对新型 mRNA 递送试剂的需求，特别是在治疗应用方面。我们的体内 mRNA 递送平台在小动物模型中可以最小化的毒性进行最佳的器官递送（表2）。

表 2.体内 mRNA 递送解决方案。

技术Invivofectamine Rx mRNA
效能体内发光(1x1010 光子/秒)，1 mg/kg mRNA 剂量
毒性低毒性
特异性*肝、脾、肺、肌内 - 也可用于其它组织*
是否可扩展是
GMP*正在开发中*

*请通过电子邮件咨询

经优化的独有递送方案

我们通过经验证的实验设计 (DoE) 和在转染领域丰富的专业技术，利用组合方法来鉴定新型化合物和针对不同 RNA 有效负载的优化配方（图3）。

  • 广泛筛选潜在候选药物，以选择最佳 LNP 制剂
  • 用于 LNP 配方工艺参数优化的DoE 
图示为对用于体内 RNA 递送平台的脂质纳米颗粒配方进行筛选、鉴定和优化的实验设计方案

图 3.实验设计 (DoE) 和配方筛选示意图。

高效 mRNA 递送

Invitrogen Invivofectamine Rx 试剂提供了一种体内 mRNA 递送方法(图4)，可使我们的合作伙伴能够加快新技术的研究和开发。

  • 多组分的、专有的脂质纳米颗粒
  • 大小均匀 (90nm) >90% 包封率
  • 通过体内发光(1x1010 光子/秒) 显示效率为 1 mg/kg mRNA 剂量(图4)
  • 在肝、脾、肺和肌肉处显示出高特异性
  • 可扩展的流程
图 A 为荧光成像，显示了当使用 Invivofectamine Rx 试剂在体内递送 mRNA 到小鼠肝脏，其性能得到持续改善。图 B 显示静脉注射至小鼠后通过荧光成像观察到的倍数变化。

图 4.通过 DoE 持续改善试剂的性能。使用 Invitrogen Rx mRNA 对萤光素酶 mRNA (FLuc) 的体内递送证明试剂递送性能的不断提高，如（A）观察结果和（B）小鼠静脉注射 4 小时后萤光素酶表达的定量检测。

相关资源

支持

  • OEM 和定制解决方案——联系我们，获取按严格质量标准经过定制性能测试的产品供应，确保您产品的成功商业化

仅供科研使用，不可用于诊断目的。