采用 GeneBLAzer 底物上样试剂盒对 β-内酰胺酶活性进行定量

GeneBLAzer 底物上样试剂盒提供多种基于 FRET 或荧光强度的底物,可靠定量 β-内酰胺酶活性。适用于 CellSensor 细胞系、CellSensor 报告基因载体以及用于 GPCR 及 NR 的 GeneBLAzer 经验证功能检测。

除阳性细胞和阴性细胞的双色读数外,基于 FRET 的底物还具有比率式数据分析的优势。比率式方法消除了手动移液或液体处理仪器型号不同引起的孔间细胞数量和底物浓度差异。比率式方法还可减少或消除因激发路径长度、荧光检测器或体积变化而引起的变化。这些变化会导致实验噪声,并可能掩盖感兴趣的潜在生物反应。

我们种类繁多的底物和检测形式可为您提供适合实验目标和偏好的良好选择。

按应用排列的推荐 GeneBLAzer 底物上样试剂盒 

LiveBLAzer-FRET B/G 底物上样试剂盒

比率式、活细胞 β-内酰胺酶定量

LiveBLAzer-FRET B/G 上样试剂盒可对活细胞中的 β-内酰胺酶活性进行可靠的比率式检测。蓝色/绿色比提供归一化报告基团反应且 %CV 比单通道读数更小。每种底物均由两种荧光基团组成,这两种基团形成有效的 FRET 对,在缺乏 β-内酰胺酶活性的情况下产生 518 nm 的绿色荧光信号。存在 β-内酰胺酶活性时,底物的切割会破坏 FRET,从而产生 447 nm 的蓝色荧光信号。蓝色信号在显微镜下很容易观察到,同时也可在底部读数的荧光酶标仪检测到。

LiveBLAzer-FRET B/G 上样试剂盒:

  • 通过比率式蓝色/绿色读数尽可能降低实验噪声,从而减少错误命中
  • 可利用流式细胞术快速开发稳定细胞系
  • 灵敏度高,有利于小型化和测量微小的生物反应
  • 采用均相形式,最大限度减少样本处理并提高通量
Population of CHO-K1 cells expressing β-lactamase as measured by LiveBLAzer- FRET B/G Substrate
该活细胞显微镜图像显示了用 LiveBLAzer- FRET B/G 底物测得的表达 β-内酰胺酶的 CHO-K1 细胞群。

ToxBLAzer DualScreen 上样试剂盒

使用细胞毒性指示剂进行比率式、活细胞 β-内酰胺酶定量

ToxBLAzer DualScreen 检测以单检测形式将 LiveBLAzer™-FRET B/G 的优势与细胞毒性指示剂相结合。读数可以确定由细胞毒性化合物引起的假阳性,这对于下调转录或缺乏活细胞的筛选应用至关重要。细胞毒性指示剂荧光发生红移,以确保与 LiveBLAzer-FRET B/G 底物的蓝色和绿色发光兼容,从而可以检测同一孔中 β-内酰胺酶活性和细胞毒性读数(见下图)

ToxBLAzer DualScreen 检测:

  • 可快速鉴别出毒性或缺乏活细胞导致的假阳性
  • 通过比率式蓝色:绿色报告基因读数能最大限度降低实验噪声,从而减少错误命中
  • 通过多通路检测报告基因读数和细胞毒性读数,无需后续细胞毒性检测
Population of cells expressing beta-lactamase as measured by LiveBLAzer™-FRET B/G substrate
A. 该活细胞显微镜图像显示了用 LiveBLAzer-FRET B/G 底物测得的表达 β-内酰胺酶的细胞群。
B. 显示的是利用 β-内酰胺酶报告基团活性分析的同一细胞群体发射红光。

LyticBLAzer 上样试剂盒

LyticBLAzer 底物提供采用任何荧光计分析细胞裂解物中 β-内酰胺酶活性的终点法。LyticBLAzer 底物将用于裂解和检测的组分合并到一次试剂添加操作中,从而实现非常简单的检测。它们具有两种检测形式:比率式 (FRET) 或荧光强度 (FI)(基于 BODIPY 染料)。完整的 LyticBLAzer 底物试剂盒具有均相和非均相检测形式,每个均针对不同的检测条件进行了优化(见下图)

LyticBLAzer 底物试剂盒:

  • 实现在顶部读数或底部读数的荧光仪器上定量分析 β-内酰胺酶活性
  • 通过采用 LyticBLAzer-FRET B/G 比率式(蓝色:绿色)报告基因读数尽可能降低实验噪声,从而减少错误命中
  • 使用 LyticBLAzer-BODIPY FL 染料尽可能减少样本污染物(如灰尘和绒毛)引起的荧光干扰
  • 通过稳定的荧光提供较长的读取时间

 

仅供科研使用,不可用于诊断目的。

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