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同型对照抗体是没有特异靶标的一抗,但在类别和亚型上,其跟实验应用中的靶标一抗一致。同型对照抗体常被作为阴性对照,用来帮助分辨非特异性背景信号和特定的抗体信号。背景信号在多种实验中都是个重要问题,这取决于用于检测的一抗亚型和靶细胞类型。
与一抗相关的造成背景染色的原因包括:(1)抗体与靶细胞上的 Fc 受体结合,(2)抗体与细胞蛋白、碳水化合物和脂类的非特异性结合和(3)细胞自发荧光。
同型对照抗体应与一抗的种属和类别相同,包括轻链(例如:IgG2 Lamda,IgA1 Kappa)。如果使用直接标记的一抗,重要的是要使用相同的标记物以避免检测的差异。
虽然同型对照抗体主要应用于流式细胞术,但它们可作为标准封闭试剂和蛋白包被剂用于其他应用,包括免疫荧光、免疫细胞化学、蛋白免疫印迹和 ELISA 等。
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