结合荧光分析的灵敏度和微孔板读数的便利性,研究人员可通过高通量分析快速得到定量检测数据。微孔板可检测多种样品类型,完整的细胞、细胞裂解液或纯化样品等标记后都可产生荧光信号,然后通过测量孔中的荧光强度进行分析,而无需再进行专门的细胞成像。

我们可提供了多种探针和检测试剂,用于分析细胞活力、细胞增殖、细胞毒性、细胞凋亡、离子通量、活性氧的生成和各种酶活性。这些工具可进行各种准确可靠的动力学和终点法实验。 

荧光酶标仪检测应用

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检测半胱氨酸蛋白酶活化(凋亡早期)的试剂盒
 

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检测半胱氨酸蛋白酶活化(凋亡早期)的试剂盒
 

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测量各种分析物的活性,包括胆固醇、磷酸盐和焦磷酸盐、磷酸酶和磷脂酶

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使用多种检测方法来评估细胞活力,如还原电位或氧化还原电位、酶蛋白释放或膜完整性

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用于测量蛋白酶和其他酶的活性,如胶原酶、弹性蛋白酶、溶菌酶、逆转录酶以及 RNA 依赖的 RNA 聚合酶

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敏感检测 β-半乳糖苷酶或葡萄糖苷酶的试剂和对应底物


 

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在活细胞中追踪细胞内钙和镁或测量细胞内 pH 值,多种波长荧光基团可选

 

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Amplex Red 底物在各种代谢、神经生物学和炎症检测中被用来检测各种分析物,如葡萄糖、半乳糖、胆固醇、谷氨酸、黄嘌呤(或次黄嘌呤)、尿酸,胆碱和乙酰胆碱以及过氧化氢

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定量分析 dsDNA、ssDNA 和 RNA 以用于下游应用的检测,如二代测序、转染、实时荧光定量 PCR、微阵列实验、RT-PCR、差异显示 PCR、Northern blot、S1 核酸酶检测、RNase 保护检测和 cDNA 文库制备

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对样品中组分具有特异性的定量试剂盒;例如,CBQCA 与脂蛋白或脂质蛋白混合物兼容;而 NanoOrange 与还原剂兼容;Quant-iT 检测可兼容盐与溶剂但不兼容去污剂

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检测各种活性氧簇 (ROS)、如普遍的氧化应激、一氧化氮 (NO)、还原型谷胱甘肽 (GSH) 和髓过氧化物酶 (MPO)


Thermo Scientific plate readers

使用 Thermo Scientific 微孔板读数仪进行荧光检测

使用 Invitrogen 荧光染料可在 Fluoroskan 或 Fluoroskan FL 荧光微孔板荧光分析仪或 Varioskan LUX 多功能酶标仪上快速对 96-1,536 份样品进行高灵敏度荧光检测,获得最佳检测效果。利用自动化动态范围功能为每个孔提供最佳的增益,并利用自动化功能获得更高的通量。

读数仪产品比较

荧光酶标仪检测优化指南

  1. 选择最合适的荧光激发和发射滤光片(波长)。激发和发射波长数据已包含在产品手册和/或快速浏览卡片中。检测试剂与仪器之间的光谱匹配度较差时,会导致大量信号丢失。
  2. 调整仪器灵敏度设置以更大限度增强荧光信号。要达到最大的线性动态范围,需选择最高增益或灵敏度设置以同时适于预期检测值的最低值和最高值。
  3. 使用同样的样品体积。样品体积的微小差别也会导致信号的有大的差别。为得到可靠的测量结果,请确保样品体积位于仪器制造商所推荐的最小体积或更大体积之间。
  4. 充分混匀样品。混匀不充分将会导致聚集、沉淀,并引起反应速率不同或分析物和检测试剂的孔间浓度差异。
  5. 避免产生气泡。检测溶液中的气泡会导致光散射和错误信号。可以对微孔板进行短暂离心,或在配制溶液前进行脱气处理(不适用于活细胞检测),还可以使用移液器吸头来吸出较大的气泡。
  6. 制备复孔。重复分析可以提高检测的精确度。
  7. 避免“边缘效应”。含有合适荧光基团的溶液可用于确定微孔板所有板孔获得的荧光信号间的一致性。若在微孔板边缘板孔中发现了信号差异,可以引入合适的校正因子或不再使用这些板孔。
  8. 隔离明亮样品。在透明微孔板中,含有强荧光的样品会影响到邻近板孔中测量的信号(又叫孔间串扰)。可以在强荧光样品周围留下空的或空白对照的孔,或在邻近板孔中加入具有相似荧光强度的样品。还可以使用白色或黑色的微孔板代替透明平板。
  9. 避免样品发生光漂白。不到万不得已,绝对不要重复检测同一个样品。也不要重复检测标准品,因为在荧光检测过程中某些试剂可能会发生严重的光漂白。
  10. 样品浓度需要在检测范围内。对于未知样品,可尝试不同的稀释倍数。

相关资源

细胞分析-支持中心

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研究工具

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