通过优化起始材料，尽可能地提高您的 RT-qPCR 成功率

RT-qPCR 既需要使用高质量 RNA 作为起始材料，也需要将 RNA 转化为 DNA 拷贝，以实现准确的实时荧光定量 PCR 检测 (qPCR)。增加 RNA 定量步骤后，您将能够更好地优化 qPCR 分析。

单击以下选项卡，了解有关优化工作流程中每个步骤的更多信息。

RT-qPCR 检测的灵敏度和准确性取决于起始 cDNA 的质量和数量，而后者又取决于分离 RNA 的质量和完整性。为避免假阳性和背景，去除基因组 DNA 是一个重要步骤。

使用赛默飞世尔科技的 Invitrogen Ambion RNA 纯化产品时，有助于简化实时荧光定量 PCR 的 RNA 提取。 您也可以使用 Cells-to-CT 直接从细胞中获取 RT-qPCR 结果。

比较适用于新鲜和冷冻细胞的 RNA 分离试剂盒：

 
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 快速&可靠的方法高通量纯化来自大多数样本的 microRNA来自珍贵微量样本的 RNA
 PureLink RNA 小量提取试剂盒MagMAX-96 总 RNA 分离试剂盒mirVana miRNA 分离试剂盒RNAqueous-Micro 试剂盒
分离的 RNA 类型仅大 RNA 分子（mRNA 和 rRNA）仅大 RNA 分子（mRNA 和 rRNA）小分子 RNA & 大分子 RNA（microRNA、tRNA、mRNA、rRNA）小分子 RNA & 大分子 RNA（microRNA、tRNA、mRNA、rRNA）
分离方法快速、便利的硅胶柱磁珠法，可扩展，形式灵活纯度较高且便利；同时包括有机提取和硅胶柱快速、便利的低洗脱量硅胶柱
制备时间20 分钟<45 分钟30 分钟15 分钟
起始材料用量10 mg 至 100 mg 组织
多达 5 x 107 个细胞		多达 10 mg 组织
多达 100,000 个细胞		多达 100 mg 组织
多达 1 x 107 个细胞		多达 10 mg 组织
多达 100,000 个细胞
试剂盒规格（反应）50964050

使用 Qubit™ 和 Quant-iT™ RNA 测定时，即使在低浓度下，也可进行灵敏度较高的 RNA 和 microRNA 特异性定量，且污染物干扰极轻微。

与 UV 吸光度读数（区分度较小）不同的是，这些测定可区分 DNA、RNA、蛋白与游离核苷酸，其灵敏度高于 UV 吸光度读数，因此可以测量低丰度样本。此外，使用简便的规格可使您更轻松、更快速地获得定量测定结果。

了解有关适用于珍贵样本的 Qubit™ 和 Quant-iT™ 技术的更多信息。

 

为可靠地生成 cDNA 第一链，SuperScript IV VILO 预混液可为您提供在增强的缓冲系统中配制的成熟 SuperScript IV 逆转录酶。可减少低丰度或高丰度基因产物的扩增偏倚，并获取在多种起始材料中表现出卓越线性的数据。 

SuperScript IV VILO 预混液以便利的单管规格提供，可带来简化且节省时间的工作流程，并有助于降低污染风险。

了解有关 SuperScript IV VILO 预混液的更多信息 ›

 
RNA 纯化

RT-qPCR 检测的灵敏度和准确性取决于起始 cDNA 的质量和数量，而后者又取决于分离 RNA 的质量和完整性。为避免假阳性和背景，去除基因组 DNA 是一个重要步骤。

使用赛默飞世尔科技的 Invitrogen Ambion RNA 纯化产品时，有助于简化实时荧光定量 PCR 的 RNA 提取。 您也可以使用 Cells-to-CT 直接从细胞中获取 RT-qPCR 结果。

比较适用于新鲜和冷冻细胞的 RNA 分离试剂盒：

 
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 快速&可靠的方法高通量纯化来自大多数样本的 microRNA来自珍贵微量样本的 RNA
 PureLink RNA 小量提取试剂盒MagMAX-96 总 RNA 分离试剂盒mirVana miRNA 分离试剂盒RNAqueous-Micro 试剂盒
分离的 RNA 类型仅大 RNA 分子（mRNA 和 rRNA）仅大 RNA 分子（mRNA 和 rRNA）小分子 RNA & 大分子 RNA（microRNA、tRNA、mRNA、rRNA）小分子 RNA & 大分子 RNA（microRNA、tRNA、mRNA、rRNA）
分离方法快速、便利的硅胶柱磁珠法，可扩展，形式灵活纯度较高且便利；同时包括有机提取和硅胶柱快速、便利的低洗脱量硅胶柱
制备时间20 分钟<45 分钟30 分钟15 分钟
起始材料用量10 mg 至 100 mg 组织
多达 5 x 107 个细胞		多达 10 mg 组织
多达 100,000 个细胞		多达 100 mg 组织
多达 1 x 107 个细胞		多达 10 mg 组织
多达 100,000 个细胞
试剂盒规格（反应）50964050
RNA 定量

使用 Qubit™ 和 Quant-iT™ RNA 测定时，即使在低浓度下，也可进行灵敏度较高的 RNA 和 microRNA 特异性定量，且污染物干扰极轻微。

与 UV 吸光度读数（区分度较小）不同的是，这些测定可区分 DNA、RNA、蛋白与游离核苷酸，其灵敏度高于 UV 吸光度读数，因此可以测量低丰度样本。此外，使用简便的规格可使您更轻松、更快速地获得定量测定结果。

了解有关适用于珍贵样本的 Qubit™ 和 Quant-iT™ 技术的更多信息。

 
cDNA 合成

为可靠地生成 cDNA 第一链，SuperScript IV VILO 预混液可为您提供在增强的缓冲系统中配制的成熟 SuperScript IV 逆转录酶。可减少低丰度或高丰度基因产物的扩增偏倚，并获取在多种起始材料中表现出卓越线性的数据。 

SuperScript IV VILO 预混液以便利的单管规格提供，可带来简化且节省时间的工作流程，并有助于降低污染风险。

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操作方法视频

引用文献

Deben, C et al.(2013) 存档材料表达分析回顾：分离和定量从 FFPE 样本中提取的 RNA 。Diagn Mol Pathol 22(1):59-64.

“与分光光度分析相比，荧光分析更适用于定量从 FFPE 组织中提取的 RNA 样本。”（Qubit® RNA 定量）

Simbolo, M et al.(2013) 组织病理学样本下一代测序的 DNA 定性检测工作流程。PLoS One 8(6):e62692.

“使用 NanoDrop 测定的 DNA 浓度高于使用 Qubit 时的相应值，其与 qPCR 法 dsDNA 定量测定的一致性仅限于 FF 样本和细胞系中的高分子量 DNA，其中总 DNA 和 dsDNA 数量几乎重合。对于 FFPE 样本中部分降解的 DNA，经证实仅在使用 Qubit 时具有高度可重现性，且与 qPCR 测量结果一致。”

仅供研究使用。不可用于诊断程序。