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适用于 qPCR 和 RT-PCR 的 RNA 提取 |
逆转录 - 聚合酶链反应 (RT-PCR) 是一种通过逆转录酶将 RNA 转化为 cDNA,然后使用 DNA 聚合酶进行复制的过程。为了从逆转录获得良好的结果,起始 RNA 材料必须数量充足、完整且无基因组 DNA。
实时 PCR 也称为定量 PCR 或 qPCR,其可对 PCR 模板(如 DNA 或互补 DNA [cDNA])的拷贝数进行定量。用于 qPCR RNA 提取的 Invitrogen 试剂盒和试剂设计用于产生 RT-PCR 反应所需的 RNA 质量和数量
高纯度、完整 RNA 的金标准 | 在20分钟内获得高质量 RNA | RNA 和 DNA 的高通量纯化 | 完整、无需纯化的系统,适合 qRT-PCR 结果 | |
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支持的 PCR 类型 | 逆转录 PCR 及下游应用 | 逆转录 PCR 及下游应用 | 逆转录 PCR 及下游应用 | 直接 qPCR |
试剂/试剂盒 | TRIzol 试剂 | PureLink 试剂盒 | MagMAX 试剂盒 | Cells-to-CT 试剂盒 |
优势 | 被引用次数非常多,经济实惠 | 快速且便捷 | 可扩展且灵活 | 简洁,qRT-PCR 的理想之选 |
分离方法 | 有机试剂 | 硅胶膜,色谱柱或孔板形式 | 磁珠(可扩展性、灵活性) | 化学裂解 |
是否兼容高通量 | 否 | 否 | 是 | 是 |
是否包含 RT 试剂 | 否 | 否 | 否 | 是 |
是否包含 qPCR 试剂 | 否 | 否 | 否 | 是 |
制备时间 | ~1小时 | <20分钟 | ~45分钟 | 10分钟 |
兼容的样本类型 | 大多数样本类型,包括难以裂解的样本 | 细胞和组织 | 细胞、血液、植物、组织 | 细胞 |
起始材料用量 | 100 mg 组织或107个细胞(需要 1 mL 试剂) | 多达 200 mg 组织或 5 x 106 至 1 x 108 个细胞 | 多达 100 mg 组织或多达 5 x 106 个细胞 | 1–103 个细胞 |
RNA 样本应在 qPCR 前纯化。基因组 DNA 污染可导致假阳性 RT-PCR 结果。赛默飞世尔科技提供多种可用于去除 RNA 制备中可能存在的基因组 DNA 的 DNase。
无 DNA 的 DNase 处理和去除试剂盒包含从 RNA 样本中去除污染 DNA 以及去除 DNase 所需的所有试剂,无需使用蛋白酶 K 处理和有机提取。
TURBO DNase 酶试剂盒包括一种由野生型牛 DNase 基因工程改造而来的高活性酶。TURBO DNase 酶结合超低浓度 DNA 的精准度意味着该酶在去除痕量 DNA 污染时特别有效。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。