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The pull-down assay is a robust method by which a target protein is extracted from a mixture (e.g., cell lysate or serum) via its affinity to a specially prepared solid support. It is often possible to detect macromolecules that form stable complexes with the target protein in a pull-down assay—when the pull-down is accomplished using immobilized antibody, the method is known as coimmunoprecipitation (co-IP). After co-IP, immobilized immune complexes can be collected, eluted from the support, and identified, thereby revealing the composition of the retrieved multimers.
此 co-IP 试剂盒非常适合在沉降过程中维持蛋白质复合物。
“Dynabeads 绝对是我们迄今为止发现的更好用的大型复合物提取技术。”
洛克菲勒大学 Michael P. Rout 博士
如果您使用 Sepharose 微珠和离心柱等技术进行沉降,请注意,您的蛋白质复合物可能因暴露于大表面、机械应力(例如离心)、稀释和过度处理(预清洗)而发生解离。使用 Dynabeads 免疫共沉淀试剂盒(货号 14321D)有助于确保更好地保存天然蛋白质构象和大型蛋白质相互作用复合物。仅需将您的抗体直接与微珠结合,然后使用磁力架分离蛋白质复合物。尽管有一些研究人员选择使用 Sepharose 微珠进行预清洗,但非特异性结合也可能导致最终产物受到污染。跳过不必要的步骤并帮助确保获得完整的蛋白质复合物。
查看 IP、co-IP 和沉降亲和微珠及试剂盒的技术和产品选择指南,包括基于 Dynabeads 磁珠和 Pierce 琼脂糖树脂的产品,且还包括抗体结合配体(蛋白 A、G、L)、生物素结合配体(链霉素亲和素)和融合标签结合配体(适用于 His、GST、HA 和 c-Myc)。
利用磁珠介导的免疫沉淀鉴定蛋白质-核酸相互作用。提供优化的染色质免疫沉淀 (ChIP) 试剂盒,以及蛋白质-RNA 沉降试剂盒和相关技术。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。