1.Silencer Select siRNA 是一种化学修饰的 siRNA 吗？如果是，是什么修饰？
是；确切的修饰是受专利保护不公开的，该修饰将总体脱靶效应降低高达 90%，而不影响基因沉默效率。此修饰还增强了了与更好的基因沉默效果有关的链偏差。此外，我们还证明，与未修饰 siRNA 相比，修饰在细胞测定中产生更一致的表型。


2.100% 保证条款如何生效？
Life Technologies 保证，如果您购买针对同一靶标的两个 Silencer Select 预设计 siRNA，这两个 siRNA 均能够沉默 70% 或更多的靶标 mRNA。若要符合保证条款，siRNA 必须以≥5 nM 的浓度转染，并且在转染后 48 小时检测 mRNA 水平。建议使用实时 RT-PCR，但不强制。客户还必须使用阳性对照 siRNA 显示>80% 敲低，以证明转染效率。如果未观察到保证的敲低水平并且适当的阳性对照成功，将免费提供最多两个新 Silencer Select siRNA 设计的一次性更换。此保证不适用于任何替换产品。

上述产品更换是 LIFE TECHNOLOGIES 的唯一义务和客户对上述保证的唯一和专有补救措施。要安排退换，请联系技术服务。请准备好提供表明转染效率和 mRNA 敲低测量的数据。 如果您需要此类更换，请联系技术支持。

3.目前 Silencer siRNA 是何状态？我们还能订购它们吗？
Silencer siRNA 仍可享受相同的保证和定价。


4.如果没有针对我的靶标基因的 Silencer Select siRNA，我该怎么办？
如果我们目前没有针对您的靶标基因的 siRNA 序列，我们可以应用我们的 Silencer Select 预设计 siRNA 所用的算法设计针对您的靶标基因的 Silencer Select siRNA。此 siRNA 将含有我们的其他 Silencer Select siRNA 所含的修饰。（请注意，这些定制设计的 Silencer Select siRNA 将在您的订单中描述为“Silencer Select 预设计 siRNA，无库存”）。如需申请定制设计的 Silencer Select siRNA，请联系我们的技术支持团队。


5.您的 Silencer Select 阳性对照品序列是否不同？
Silencer Select GAPDH 阳性对照品 siRNA 序列未更改；它与 AM4624 (Silencer GAPDH siRNA) 序列相同，但具有 Silencer Select 修饰。


6.这些修饰的阳性对照品序列是否更有效？
在我们的实验中，Silencer Select GAPDH 阳性对照品 siRNA 与 Silencer GAPDH siRNA 具有相似的效力。


7.Silencer Select 阴性对照品序列是否不同？
Silencer Select 阴性对照品1号和2号是采用较严格的特异性过滤器生成的全新序列。此外，这些产品已经过阵列验证，已在多参数细胞测定中检测并表明其对基因表达或细胞表型的影响极小。


8.与 Silencer siRNA 相比，Silencer Select siRNA 有何改进？
这些 siRNA 序列通过新算法生成。该算法由 Ambion 的生物信息学团队使用支持向量机 (SVM) 方法开发。SVM 方法采用分类方法而非线性回归方法，因此，能够区分“超功能性”和“可接受”siRNA。

包括生物信息过滤器可增强特异性，这些过滤器去除针对非预期靶标且错配太少的 siRNA——可能有毒的 siRNA、与自然形成的 miRNA 种子区域匹配的 siRNA 和具有抗病毒反应基序的 siRNA。此外，siRNA 是根据脱靶转录物的 3'UTR 中可能的 siRNA 种子区域匹配的频率来排列。

与 Silencer siRNA 设计相比，Silencer Select 设计可引发 >80% 的靶标 mRNA 敲低，通常提高 28%。

最后但同样重要的是，Silencer Select siRNA 经过修饰以提高特异性。我们已经表明，修饰导致脱靶效应降低高达 90%，从而导致基因沉默实验的表型数据更一致、可靠。


9.Silencer Select 的性能与您的竞争对手相比如何？
Silencer Select siRNA 具有市场领先的效力和功效且脱靶效应较少，正如表达分析和基于细胞的表型测定所评估的一样。


10.推荐的转染量是多少？
与未修饰的 siRNA 相比，我们未发现 Silencer Select siRNA 的转染效率有何不同。但是，Silencer Select siRNA 的效力比其他 siRNA 高 5–100 倍，因此推荐的转染量比为 Silencer siRNA 推荐的转染量低 5–10 倍（取决于所用的细胞类型）。例如，大多数客户在 HeLa 细胞中使用 ~30 nM 的 Silencer siRNA。3-5 nM 的 Silencer Select siRNA 能够在 HeLa 细胞中直接使用，而不会影响敲低水平。


11.是否所有 Silencer Select 预设计和经验证 siRNA 序列在购买时仍会披露？
是，但修饰的位点和特征将不会被披露。


12.Silencer Select siRNA 是如何设计的？它们是否仅针对单个转录物 RefSeq 收录号？
Silencer Select siRNA 适用于靶向与特定基因相关的所有已知转录物。Ambion 使用 RefSeq 数据库 (NCBI) 作为转录组信息源。


仅供研究使用。不适用于诊断程序。