Search Thermo Fisher Scientific
因完全 GPC 生长培养基中存在了血小板衍生生长因子 AA 同源二聚体 (PDGF-AA) 和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF),从而使大鼠 GPC 保持未分化状态。图1 显示超过 80% 的 GPC 群体保留了未分化的表型标志物 A2B5。
图1. 通过细胞表面标志物 A2B5(绿色)的间接免疫荧光染色的大鼠 GPC。细胞核使用 DAPI(蓝色)染色。在使用 4% 多聚甲醛固定和染色之前,使细胞在 GPC 回收培养基中保持未分化状态三天。 |
扩增后,大鼠 GPC 保留了分化为少突胶质细胞和星形胶质细胞的潜能。 图2显示大鼠 GPC 分化为少突胶质细胞。超过 30% 的大鼠 GPC 对 GalC(少突胶质细胞特异性标志物)染色呈阳性。
图2. 大鼠 GPC 分化为少突胶质细胞。 细胞在不含有 PDGF-AA、EGF 和 bFGF 的生长培养基中分化,但在用 4% 多聚甲醛固定和随后染色的前三天添加 2% 胎牛血清。 通过间接免疫荧光(绿色)在培养物中 ≥30% 的细胞中检测到细胞表面标志物 GalC。 细胞核使用 DAPI(蓝色)染色。 |
在 GPC 回收培养基(StemPro NSC SFM、GlutaMAX-I 和 PDGF-AA)中解冻后,Gibco rGPC 可以进一步扩增至少一代。 增殖能力使研究人员的细胞数量增加了 2 倍以上,同时细胞仍保持其典型形态(图3)。
图3. 第 3 代 (P3) 大鼠 GPC 的明场图像,其在添加了 2 mM GlutaMAX-I 和 10 ng/mL PDGF-AA(即完全 GPC 生长培养基)的完全 StemPro NSC SFM 中培养了三天。 使用 10X 物镜采集图像。 |
仅供科研使用,不可用于诊断目的。